《Aquaculture, Fish and Fisheries》：Immunonutritional Effects of Nucleotides and Olive Bioactive Extracts on Growth Performance and Survival of Pacific White Shrimp Upon Vibrio parahaemolyticus (AHPND) Challenge
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可持续推进水产养殖可通过使用具有免疫调节活性的功能性饲料原料来支持。这些研究评估了日粮核苷酸（nucleotides, NU）和橄榄生物活性提取物（olive bioactive extract, OE）对凡纳滨对虾（Pacific white shrimp,
可持续推进水产养殖可通过使用具有免疫调节活性的功能性饲料原料来支持。这些研究评估了日粮核苷酸（nucleotides, NU）和橄榄生物活性提取物（olive bioactive extract, OE）对凡纳滨对虾（Pacific white shrimp, PWS），*Penaeus vannamei*的免疫营养效应。在循环水养殖系统（recirculating aquaculture system, RAS）中进行了一项为期56天的生长试验（n = 1000尾PWS；PL42-43；1.23 ± 0.23 g；5.11 ± 0.27 cm），试验日粮（水分5.47%–6.06%；粗蛋白43.03%–43.81%；粗脂肪6.95%–7.69%；粗纤维1.98%–2.28%；灰分9.50%–9.65%）分别添加500 ppm NU（NU500）、500 ppm OE（OE500）、500 ppm NU与500 ppm OE的组合（NU500OE500），或不添加补充物的对照日粮。此外，采用相同日粮处理进行了为期10天的由副溶血性弧菌（*Vibrio parahaemolyticus*）诱导的急性肝胰腺坏死病（acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND）攻毒试验（n = 600尾PWS；PL35；0.57 ± 0.11 g；3.85 ± 0.36 cm），并设有未攻毒、未添加补充物的组（阳性对照）。在生长试验中，与对照组相比，所有添加补充物的组均表现出显著更高的终末体重、增重、平均日增重和特定生长率。NU500和NU500OE500组的终末生物量、采食量和饲料转化率（feed conversion ratio, FCR）也显著改善，其中NU500OE500组的FCR显著低于所有其他处理组。NU500OE500组的总血细胞计数（total haemocyte count, THC）显著升高，而所有添加补充物组的透明细胞（hyaline cell, HC）水平均升高。攻毒试验结果显示，NU500（33.95 ± 9.62%）和OE500（40.99 ± 11.07%）组的存活率高于阳性对照组（30.63 ± 4.70%），但仅NU500OE500组（55.80 ± 10.02%）观察到显著提高。总之，在生长试验中，向PWS联合补充NU和OE改善了生长性能和免疫应答，并在攻毒试验中增强了对AHPND的抵抗力，支持其在虾饲料中的应用。
**免疫营养策略在凡纳滨对虾养殖中的应用：核苷酸与橄榄生物活性提取物的协同效应**
**一、研究背景与意义**
凡纳滨对虾（*Penaeus vannamei*）是全球养殖量最大的对虾品种，占全球甲壳类水产养殖产量的53%，2021年产量超过630万吨，产值约365亿美元，在亚洲和拉丁美洲水产养殖经济中具有举足轻重的地位。然而，由副溶血性弧菌（*Vibrio parahaemolyticus*）特定菌株引起的急性肝胰腺坏死病（acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND），又称早期死亡综合征（early mortality syndrome, EMS），自2009年在中国首次发现以来，已蔓延至全球主要对虾养殖国家，造成数十亿美元的经济损失，严重威胁对虾养殖业的可持续发展。传统上，抗生素被广泛用于控制此类细菌性疾病，但其大量使用显著增加了抗菌素耐药性风险，对虾类健康与公共安全均产生不利影响。因此，寻找有效的抗生素替代品、推动可持续疾病管理实践已成为行业的迫切需求。核苷酸（nucleotides, NU）是天然存在于动植物性食品中的免疫调节生物活性化合物，参与DNA和RNA合成等重要生理功能；在应激、免疫抑制或疾病等生理需求增加的时期，外源性核苷酸补充可增强免疫应答、提高感染抵抗力并维持肠道和肝脏功能。橄榄生物活性提取物（olive bioactive extract, OE）富含多酚类（如橄榄苦苷、羟基酪醇、酪醇）和三萜类化合物（如齐墩果酸、山楂酸），具有抗氧化、抗炎和抗菌特性。研究人员假设，这两种通过不同生物学途径发挥作用的免疫调节剂联合使用，可能通过互补机制产生更佳的整体健康效应。本研究的目的是评估单独或联合补充核苷酸（Nucleoforce?）和橄榄提取物（Aquolive?）对凡纳滨对虾生长性能、免疫应答及AHPND攻毒后存活率的影响。研究结果表明，联合补充可显著改善对虾的生长性能和饲料效率，增强非特异性免疫，并显著提高攻毒后的存活率，支持其在虾饲料中的应用前景。该论文发表于《*Aquaculture, Fish and Fisheries*》。
**二、主要技术方法**
研究所用凡纳滨对虾均来自越南ShrimpVet Dr T?m孵化场（亲虾来源于美国Shrimp Improvement Systems, SIS）。生长试验选用1000尾无特定病原体（specific pathogen-free, SPF）对虾（PL42-43；1.23 ± 0.23 g；5.11 ± 0.27 cm），在RAS系统中进行56天饲养，设NU500、OE500、NU500OE500和对照4个日粮处理组（每组5个重复水箱，每箱50尾）。攻毒试验选用600尾SPF对虾（PL35；0.57 ± 0.11 g），以AHPND致病性副溶血性弧菌菌株VPLA37（经PCR确认携带*pirAvp*毒素基因）进行浸泡攻毒，攻毒后监测10天存活率。免疫参数测定包括总血细胞计数（THC）、分类血细胞计数（DHC）和酚氧化酶（phenoloxidase, PO）活性；肝胰腺组织病理学按0–4级标准评分。统计分析采用Shapiro–Wilk正态性检验、Levene方差齐性检验、单因素方差分析（ANOVA）、Duncan多重比较检验及Kaplan–Meier生存分析。
**三、研究结果**
**3.1 生长试验**
56天饲养后，所有添加补充物的处理组较对照组均显著提高了终末平均体重、增重、平均日增重（average daily gain, ADG）和特定生长率（specific growth rate, SGR）（p < 0.05）。NU500和NU500OE500组的终末生物量、采食量和饲料转化率（FCR）均较对照组显著改善，其中NU500OE500组的FCR（1.09）显著低于所有其他处理组，较对照组（1.30）改善约16.2%。免疫参数方面，仅NU500OE500组的总血细胞计数（THC）较对照组显著升高（49.50 × 10
6 细胞/mL vs. 41.06 × 10
6 细胞/mL），所有补充组的透明细胞（HC）比例均显著高于对照组（72.17%–74.83% vs. 62.93%）。半颗粒细胞、颗粒细胞比例及PO活性在各组间无显著差异。肝胰腺组织学检查未发现组间显著差异。存活率方面，NU500（84.4%）和NU500OE500（85.0%）组显著高于对照组（78.0%）。
**3.2 攻毒试验**
攻毒后240小时，阴性对照组存活率为88.29%，阳性对照组为30.63%。NU500（33.95%）和OE500（40.99%）组存活率在数值上高于阳性对照组，但差异未达统计学显著水平。NU500OE500组存活率（55.80%）显著高于阳性对照组及NU500、OE500单独处理组（p < 0.05）。Kaplan–Meier生存分析显示各组生存曲线存在显著差异（log-rank = 74.83, p < 0.001）。组织病理学评估显示，攻毒组对虾呈现典型的EMS/AHPND相关病变，包括肝胰腺细胞脱落和肾小管坏死，而阴性对照组无此病变；补充添加物的各组组织学评分低于阳性对照组（PC组为3–4级，NU500组为1–2级，OE500组为0–2级，NU500OE500组为0–1级），其中OE500和NU500OE500组各有1尾个体评分达0级（正常）。
**四、讨论与结论**
本研究中，核苷酸与橄榄提取物联合补充在生长性能、免疫应答和抗病力方面均表现出优于单独使用的效果。联合组在攻毒试验中的存活率较阳性对照组提高25.17%，超过了两种成分单独使用效应之和（3.32% + 10.36% = 13.68%），提示两种免疫调节剂之间可能存在协同效应。这一协同作用可能源于核苷酸的免疫调节特性与OE的抗氧化和抗菌活性的功能互补：核苷酸通过改善核酸代谢支持免疫细胞增殖（如THC和HC水平的升高），而OE中的多酚和三萜类化合物则通过清除氧化应激和抗病原活性增强机体防御能力。值得注意的是，此前在越南和印度尼西亚进行的核苷酸单独补充研究虽观察到免疫和存活率的改善，但未能在生长性能上获得统计学显著提升；本研究中OE的加入可能强化了核苷酸的有益效应。研究局限性包括：生长试验与攻毒试验为独立设计，数据不宜直接联合比较；组织学样本量较小（每组仅2尾）；攻毒试验中未攻毒对照组存活率偏低。未来研究应采用析因设计评估不同配比组合，并在同一对虾群体中同时评估生长性能和攻毒存活率，以进一步优化配方并阐明分子机制。结论：联合补充核苷酸（Nucleoforce?）和橄榄提取物（Aquolive?）在生长试验中改善了凡纳滨对虾的生长性能和免疫应答，并在独立的副溶血性弧菌攻毒试验中提高了存活率；尽管存在若干局限性，该免疫营养策略有望增强对虾的疾病抵抗力，推动更可持续的水产养殖实践。
