建立体外DSS诱导上皮损伤模型以研究IL-6和丁酸盐对屏障功能的剂量依赖性影响
《International Journal of Molecular Sciences》:Establishment of an In Vitro DSS-Induced Epithelial Injury Model to Investigate Dose-Dependent Effects of IL-6 and Butyrate on Barrier Function
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时间:2026年09月10日
来源:International Journal of Molecular Sciences 5.6
摘要
硫酸葡聚糖钠(DSS)在体内被广泛用于诱导上皮损伤;然而,针对DSS的上皮特异性反应以及与屏障修复相关的机制仍知之甚少。在此,我们利用分化后的Caco-2细胞单层建立了一种体外DSS诱导的上皮损伤模型。暴露于2.5%(w/v)DSS 24小时后,成孔蛋白Claudin-2(CLDN2)显著上调(2.677倍),同时NADPH氧化酶1(NOX1)等氧化标志蛋白水平升高,并通过二氢乙啉(DHE)染色证实活性氧(ROS)生成增加。经跨上皮电阻(TEER)分析观察到上皮通透性升高,但细胞毒性未见明显增加。令人意外的是,ELISA分析显示,DSS暴露后白细胞介素-6(IL-6)显著下调(0.364 ± 0.034 pg/mL)。在持续DSS暴露期间,使用1 ng/mL重组IL-6(rIL-6)处理可改善上皮屏障功能,而5 ng/mL的较高剂量则未产生同样的修复反应。此外,用10 mM丁酸盐处理DSS损伤的Caco-2单层可显著改善上皮屏障功能。综上所述,本研究建立了一种可重复的DSS诱导的Caco-2上皮损伤模型,并证实了rIL-6的浓度依赖性效应以及丁酸盐的屏障修复作用,为研究相关于炎症性肠病(IBD)的肠屏障功能障碍提供了一个上皮特异性平台。
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