辣椒素激活的AjTRPV受体参与日本海参(Apostichopus japonicus)幼体的趋热行为

《Comparative Biochemistry and Physiology Part A: Molecular & Integrative Physiology》:Capsaicin-activated AjTRPV contributes to thermotaxis of Apostichopus japonicus larvae

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年09月10日 来源:Comparative Biochemistry and Physiology Part A: Molecular & Integrative Physiology 2.4

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  •AjTRPVA 和 AjTRPVB 主要定位于耳状菌(auricularia)的纤毛带中。•AjTRPV 通道具有与辣椒素和热激活相关的保守残基。•AjTRPV 通道在 A. japonicus 耳状菌幼虫中介导正向趋热性。引言温度是决定动物生存、生理功能、地理分布和生命周期动

  
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    AjTRPVA 和 AjTRPVB 主要定位于耳状菌(auricularia)的纤毛带中。
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    AjTRPV 通道具有与辣椒素和热激活相关的保守残基。
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    AjTRPV 通道在 A. japonicus 耳状菌幼虫中介导正向趋热性。

引言

温度是决定动物生存、生理功能、地理分布和生命周期动态的关键环境因素。作为变温动物,棘皮动物生活在导热性高的水生环境中,这使得它们的生理和行为极易受到温度波动的影响。在幼虫阶段,温度对海洋无脊椎动物的胚胎发育、变态存活、进食和生长表现有深远影响(McEdward, 1985; Karelitz et al., 2017)。例如,在28°C的高温 stress 下,金乌贼 Sepia esculenta 的幼虫会触发转录水平的免疫反应(Zhu et al., 2026a, Zhu et al., 2026b)。TRPA1 在海星 Patiria pectinifera 的幼虫中参与对有害高温的正向趋热性(Saito et al., 2017)。作为具有生态和经济价值的棘皮动物物种,海参 Apostichopus japonicus 的幼虫对温度压力表现出高度敏感性(Zhao et al., 2023)。然而,A. japonicus 幼虫对温度敏感性的分子机制仍知之甚少。
瞬时受体电位(TRP)通道是一类在真核生物谱系中高度保守的非选择性阳离子通道,在真菌、植物、原生动物和后生动物中都发现了其同源物。TRP 通道作为多模态细胞受体,介导多种感觉过程,包括视觉、嗅觉、温度感知和机械感觉(Perraud et al., 2001, Perraud et al., 2003; Tracey et al., 2003; Kang et al., 2011)。几种 TRP 昵称在特定温度范围内被激活。值得注意的是,瞬时受体电位香草酸(TRPV)亚家族的成员在哺乳动物中充当主要的热伤害感受器。不同的温度环境驱动了专门的热感知机制的进化,并塑造了 TRP 通道的热敏感性(Hori et al., 2023)。例如,适应高温的土鼠 Ictidomys tridecemlineatus 和骆驼 Camelus ferus 的 TRPV1 具有较高的温度激活阈值,而适应寒冷的蝾螈 Ambystoma mexicanum 的 TRPV1 则具有较低的激活阈值(Laursen et al., 2016; Hori et al., 2023)。除了脊椎动物外,TRP 通道也参与无脊椎动物的热行为。Caenorhabditis elegans 的 AFD 神经元中的 TRP 通道介导趋热性和避热反应(Ohnishi et al., 2020)。此外,TRPA1 通道在海星 P. pectinifera 的幼虫中介导正向趋热性(Saito et al., 2017)。
尽管 A. japonicus 的温度依赖性生理反应已有充分记录,但驱动这些行为的具体分子机制仍不清楚(Yang et al., 2006; Song et al., 2024)。我们之前的工作鉴定了 A. japonicus 的 TRPV(AjTRPV)通道,并证实了它们在辣椒素化学激活下的功能保守性(Wang et al., 2026)。在本研究中,基于三方面的证据,AjTRPVA 和 AjTRPVB 被确定为潜在的热感受器。首先,序列比对显示 AjTRPVA 和 AjTRPVB 与其他 AjTRP 家族成员相比,与实验验证的热敏感 TRPV 同源物的序列相似性更高。AjTRPVA 与脊椎动物的 TRPV1 有大约 30% 的蛋白质序列同源性,与 C. elegans 的热感受 TRPV 有大约 40% 的同源性。其次,已发表的转录组数据表明 AjTRPVA 和 AjTRPVB 在幼虫发育过程中表现出时间动态表达,暗示它们可能在幼虫感觉成熟和环境适应中起作用(Boyko et al., 2019)。第三,广泛的比较研究表明 TRPV 亚家族通道在所有后生动物中作为多模态感觉受体;我们之前的辣椒素激活实验进一步支持 AjTRPV 蛋白具有化学感受活性,这与典型 TRPV 的感觉功能一致(Wang et al., 2026)。结合序列保守性、幼虫动态表达模式和保守的化学感受活性,我们推测 AjTRPVA 和 AjTRPVB 是可能调节幼虫热感知和趋热性的合理热感受器候选者。然而,现有的转录组研究尚未关注 TRPV 通道在热感知中的功能,AjTRPV 通道对热感知的贡献仍有待阐明。在本研究中,我们量化了 A. japonicus 早期生命周期中 AjTRPV 基因的转录水平,通过全切片原位杂交技术研究了它们的组织空间表达,筛选了可能与热诱导的 AjTRPV 蛋白激活相关的保守氨基酸残基,并进行了辣椒素刺激实验,以解析它们在热感知和调节幼虫趋热行为中的潜在作用。

章节片段

A. japonicus 幼虫的制备

2025 年 4 月,我们从中国青岛的一个水产养殖场收集了 150–250 克的 A. japonicus 成年个体作为亲本。总共六只 A. japonicus> 个体被饲养在玻璃纤维水箱中。所有成年 A. japonicus> 在实验过程中保持健康,没有死亡。自然产卵和受精后,胚胎在 18°C 的海水中培养,盐度维持在 30–31,光照周期为 12 小时/12 小时黑暗,同时持续通风。幼虫

AjTRPVA 和 AjTRPVB 表达谱的分析

RT-qPCR 结果显示,在 A. japonicus 的早期生命周期中,AjTRPVA 和 AjTRPVB 表达谱相似(图 2)。AjTRPVA 和 AjTRPVB 在耳状菌幼虫阶段的表达水平最高。五叶幼虫阶段的表达水平显著高于囊胚阶段(p < 0.01)和担轮幼虫阶段(AjTRPVA, p < 0.05; AjTRPVB, p < 0.001)。为了表征它们的空间分布,对 AjTRPVA 进行了转录定位

讨论

作为 变温海洋动物,A. japonicus 对温度波动非常敏感,并且适应环境温度变化的能力有限。温度是决定 A. japonicus 生存、生理、行为和生物地理分布的主要环境因素。趋热性是一种先天行为机制,通过这种机制,变温动物会向温度适宜的微生境移动。功能性的热感受系统是这种动物的必要前提

结论

总之,我们综合了多方面的证据,包括 AjTRPVA 和 AjTRPVB 在耳状菌幼虫阶段的高表达、它们在幼虫纤毛带中的主要空间定位、三维结构特征以及与热激活相关的保守氨基酸残基,构建了一个多维分析框架。这些数据表明 AjTRPVA 和 AjTRPVB 通道具备热感受功能的所有必要条件。

手稿准备过程中使用生成式 AI 和 AI 辅助技术的声明

本手稿的编写过程中没有使用任何生成式 AI 工具或 AI 辅助技术。

CRediT 作者贡献声明
Xuemin Wang: 写作 - 原稿撰写、可视化、方法学研究、数据分析、概念化。Zhichao Li: 可视化、数据采集。Yanlin Wang: 写作 - 审稿与编辑、研究指导、项目管理、数据采集、概念化。

伦理声明

所有实验均遵循 ARRIVE 指南(https://arriveguidelines.org)进行。所有动物护理和使用程序均获得了中国海洋大学的机构动物护理和使用委员会的批准(许可证编号:20141201)。实验遵循《中国实验动物护理和使用指南》(GB/T 35892–2018)。

动物实验

本研究遵循 ARRIVE(动物研究:体内实验报告)指南进行。
本研究已获得中国海洋大学的机构动物护理和使用委员会的批准(批准编号:20141201)。

资助

本研究得到了 国家自然科学基金 的支持 [资助编号 42276103]。

利益冲突声明

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