针对顽固性水源病原体的靶向细胞包膜季铵化环糊精聚合物材料制备

《Journal of Environmental Chemical Engineering》:Preparations of cell envelope-targeting quaternized cyclodextrin polymer material against recalcitrant waterborne pathogens

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年09月10日 来源:Journal of Environmental Chemical Engineering 7.5

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   摘要由于水传播病原体具有紧凑的细胞包膜,它们在自然水和废水中通常难以被化学处理和消毒杀灭。本研究开发了一种新型靶向细胞包膜的季铵化环糊精聚合物(QCDP)材料,其特征是由季铵化环糊精(QCD)单元交联嵌入β-环糊精(β-CD)寡聚物网络中。QCDP同时具有来自正电荷单元和天然

  

摘要

由于水传播病原体具有紧凑的细胞包膜,它们在自然水和废水中通常难以被化学处理和消毒杀灭。本研究开发了一种新型靶向细胞包膜的季铵化环糊精聚合物(QCDP)材料,其特征是由季铵化环糊精(QCD)单元交联嵌入β-环糊精(β-CD)寡聚物网络中。QCDP同时具有来自正电荷单元和天然环糊精单元的多种反应位点。研究表明,QCDP能够以不同的模式和强度与细菌包膜的五个主要组分强烈结合。QCDP灭活速率常数受主要包膜组分的抑制效应顺序为:脂多糖 > 肽聚糖 > 心磷脂 > 磷脂酰甘油 ≈ 磷脂酰乙醇胺。QCDP的独特结构使其具有广谱杀菌活性和对革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌的种属差异性杀菌能力。确实,QCDP在模拟水和自然水中对大肠杆菌及多种耐药性ESKAPE病原体均表现出高效的灭活效果(1.7至9.2?个对数值),并且其表现优于或可媲美现有的膜破坏型杀菌剂。经QCDP改性的柱体即使在通过200个孔体积的自然水后,对大肠杆菌的去除效率仍超过96.8%,表明其具有长效杀菌性能。因此,本研究为开发高效抗微生物材料以应对水传播病原体提供了战略性设计方法。

引言

水传播细菌感染对人类健康和环境构成严重威胁,已成为21世纪主要的公共卫生挑战之一[1], [2]。抗生素的滥用导致了多重耐药(MDR)细菌的出现,尤其是ESKAPE病原体,预计到2050年每年将导致约1000万人死亡[3], [4], [5]。这些顽固的病原体具有复杂的多层细胞包膜,对抗菌剂构成了巨大的屏障[6], [7]。革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)包膜组成的异质性,以及它们对环境条件(如消毒处理)的响应性,进一步加剧了抗菌剂所面临的挑战[8], [9]。
靶向包膜的抗菌剂,如抗生素、纳米材料、抗菌肽和阳离子聚合物,因其低耐药风险和广谱抗菌活性而引起了广泛关注[7], [10], [11], [12], [13]。多种抗生素(如多黏菌素、多黏菌素B、棒曲霉素和奎诺范星菌素)主要通过直接靶向包膜组分(如脂多糖-LPS)来破坏包膜结构,和/或抑制包膜相关物质的合成或转运(如肽聚糖-PGN的前体)[7], [10], [14]。虽然这两种作用通常会导致细菌外膜的失稳和通透性增加,但不可避免地会诱导细菌耐药性[15], [16], [17]。细菌耐药性通常与包膜组分的修饰有关,例如多黏菌素诱导的LPS修饰和达巴万星诱导的磷脂酰甘油修饰[18], [19]。
纳米材料(如金属纳米颗粒和碳基材料)能有效破坏细菌细胞膜,其中涉及多种化学破坏和物理破坏机制[11], [20]。氧化和去磷酸化是化学破坏的代表,而形状介导的切割效应、颗粒介导的膜失稳和脂质萃取则是物理破坏的代表。然而,金属纳米材料(如银纳米颗粒)对人体组织细胞具有固有的毒性,且在长期高剂量暴露下会引起二次环境污染[21]。
抗菌肽(AMPs)通过膜扰动发挥抗菌活性,这与其阳离子两亲性的结构特征有关[22], [23]。例如,天然鹰嘴豆来源的AMP–Leg2肽(KTA和KTR)通过双靶向细菌包膜中的LPS和PGN,对大肠杆菌O157:H7表现出优异的抗菌效果[24]。据我们所知,AMPs的生产通常需要复杂的生物技术方法,如基因工程和细胞表达系统[25]。
阳离子聚合物通过其自身正电荷的静电相互作用作为新兴的抗菌材料,因其相对安全且耐药风险低[12], [26]。例如,被认为是有前景的抗菌候选者的两亲性树枝状大分子由长疏水烷基链和叔胺端基封端的聚酰胺胺树枝状体组成[12]。两亲性树枝状大分子主要靶向细菌膜磷脂,包括磷脂酰甘油(PG)和心磷脂(CL)。接枝了季铵盐单体的淀粉衍生物聚合物(St-g-PDMC)具有水溶性,通过改变细菌膜完整性和增强通透性表现出99.56%的杀菌效果[26]。然而,通常需要高聚合物剂量才能在水中达到高效,因为溶解性有机质(DOM)与细菌的竞争性吸附会降低性能,且聚合物本身的回收和再利用较为困难。
环糊精(CDs)已广泛应用于生物医学、水处理和催化领域,因为它们中的大多数(如β-CD)可低成本商业获取且具有优良的环境相容性[27], [28]。环糊精是众所周知的环状寡糖,具有相对疏水的内腔和亲水的外表面,其化学结构易于修饰[27], [29], [30]。这些独特性质有利于开发各种功能材料,如吸附剂、分子反应器和抗菌剂[31], [32], [33]。天然和化学修饰的环糊精均能包合生物膜组分(如脂肪酸和磷脂)并以不同程度破坏膜的完整性[34]。例如,类似多黏菌素的β-环糊精衍生物是具有膜活性的两亲性材料和针对G+和G-细菌的抗菌剂[35]。共轭低聚电解质与磺丁醚β-环糊精钠的主客体包合复合物能够通透磷脂双分子层(类似于细菌膜),并对多种G+细菌表现出强效杀菌效果[36]。已有研究证实,带电荷的环糊精和双环糊精可能作为单体介导聚合物网络并增强其对污染物和细菌的可及性[30], [37]。因此,通过设计具有高度可及性的聚合物网络,以天然环糊精和正电荷环糊精为双单体,制备具有多个反应位点从而具有广谱抗菌活性的新型环糊精聚合物材料是非常理想的。
本研究提出了一种两阶段制备季铵化环糊精聚合物(QCDP)的方法,通过将两性季铵化环糊精(QCD)整合到聚合物网络中。以阳离子环糊精(QCD)和天然β-CD为双单体,以环氧氯丙烷(EPI)为交联剂合成QCDP材料。通过主要包膜化合物的竞争性抑制实验以及对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的细胞生物测定,提出了QCDP对G+和G-细菌的可能灭活机制。在多种模拟水和自然水体系中研究了QCDP对大肠杆菌和六种ESKAPE病原体的灭活性能。进行了QCDP柱实验以评估其在自然水样中的长期性能。

章节摘要

材料与试剂

β-环糊精(β-CD,纯度99%)和环氧氯丙烷(EPI)分别购自滨州致远生物科技有限公司(山东,中国)和天津大茂化学有限公司(天津,中国)。马来酸酐(MAH)和[2-(甲基丙烯酰氧基)乙基]三甲基氯化铵(DMC)(75?wt%)购自上海麦克林生化科技有限公司(上海,中国)。N,N-二甲基甲酰胺(DMF)购自能科化学(上海,中国),储存于4??分子筛中。

QCDP材料的结构与性能

QCDP的FTIR光谱显示2925?cm-1处C-H非对称伸缩振动、1159?cm-1处C-O-C伸缩振动和1030?cm-1处C-OH伸缩振动的展宽(图2a),这是EPI交联的CDPs中环糊精单元的特征[37]。此外,QCDP中1576?cm-1和1440?cm-1处的吸收峰分别归属于C=C伸缩振动和N?-CH3变形振动。这两个官能团均来源于含有DMC和MAH单元的单体QCD,

结论

我们通过分步引入天然β-CD和正电荷QCD,制备了一种靶向包膜的阳离子环糊精聚合物(QCDP)作为新型杀菌剂。QCDP材料具有来自相对疏水的环糊精空腔和正电荷亲水表面的多种功能位点。QCDP以不同的模式和强度与各种包膜组分相互作用,其中外膜中的LPS最为重要,其次是

CRediT作者贡献声明

赵丁胜:可视化,方法学,数据整理。卢智辉:撰写——初稿,方法学,形式分析,数据整理。张海云:形式分析。王坤:方法学,形式分析,数据整理。蔡希云:撰写——审阅与编辑,监督,调查,经费获取,概念构思。

利益冲突声明

作者声明不存在可能影响本文所报告工作的已知竞争性经济利益或个人关系。

致谢

本研究得到国家自然科学基金(编号:22276027)和中央高校基本科研业务费专项资金的支持。

备注

作者声明无竞争性经济利益。
卢智辉|赵丁胜|王坤|张海云|蔡希云
工业生态与环境工程教育部重点实验室,大连理工大学环境科学与工程学院,辽宁大连 116024,中国
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