基于转录组学的针灸保护卵巢早衰小鼠卵巢功能机制洞察

《Chinese Journal of Integrative Medicine》：Transcriptomic Insights into Acupuncture Mechanisms in Protecting Ovarian Function in Mice with Premature Ovarian Insufficiency

　　

摘要

目的

通过转录组分析，探索针灸对环磷酰胺诱导的早发性卵巢功能不全（POI）小鼠卵巢功能的保护作用的分子机制。

方法

将20只雌性C57BL/6小鼠分为4组：对照组、模型组、针灸组和非经络/非穴位（NOMA）组。通过环磷酰胺注射在模型组、针灸组和非经络/非穴位组中诱导POI。针灸组在关元（CV 4）、双侧归来（ST 29）和三阴交（SP 6）穴位进行针刺治疗，持续3周。干预结束后，计算卵巢组织重量和卵巢系数，检测血清中关键生殖激素（包括促卵泡激素（FSH）、促黄体生成素（LH）和抗缪勒管激素（AMH））水平，并观察卵巢组织病理学变化以评估卵巢功能。进行转录组测序以鉴定差异表达基因（DEGs），随后进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析，以探索关键功能术语和信号通路。最后，应用Western blot验证与线粒体功能、内质网应激和炎症通路相关的核心蛋白表达。

结果

模型组显示卵巢重量降低和FSH水平升高。与模型组相比，针灸组表现出显著更高的卵巢重量和系数、更低的FSH水平以及增加的E₂和AMH水平（所有P<0.01）。转录组分析揭示了各组间4,021个差异表达基因。GO和KEGG分析表明，这些差异表达基因主要涉及卵母细胞发育、类固醇激素合成，以及与线粒体功能、内质网应激和炎症信号相关的通路。Western blot分析显示，针灸部分恢复了线粒体功能标志物细胞色素c氧化酶亚基IV和NADH脱氢酶1β亚复合体亚基8，并降低了内质网应激标志物（葡萄糖调节蛋白78和钙联蛋白，P<0.01）。针灸还下调了促炎蛋白（IL-17R、IL-17A、NF-κB p65、p-NF-κB p65、ERK1/2和p-ERK1/2），并上调了与代谢稳态相关的蛋白（过氧化物酶体增殖物激活受体γ、受体互作蛋白140、烟酰胺磷酸核糖转移酶和Sirtuin 1，P<0.01）。

结论

针灸通过调节细胞功能和炎症通路，有效缓解环磷酰胺诱导的小鼠POI，改善卵巢功能和卵泡质量，为POI提供了一种新的治疗策略。