鼠尾草属植物 Salvia elegans Vahl 中 Rosifoliol/Agarospirol 及 7α-Hydroxysandaracopimaric Acid 对局部炎症与 LPS 激活 RAW-Blue 细胞的作用

《Molecules》：Effect of Rosifoliol/Agarospirol and 7α-Hydroxysandaracopimaric Acid from Salvia elegans Vahl on Local Inflammation and LPS-Activated RAW-Blue Cells

　　

Salvia elegans Vahl. 被用于炎症相关疾病，但其直接抗炎活性鲜有研究。研究人员评价了乙酸乙酯提取物（SeAcOEt）的体内外作用：采用 12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（TPA）诱导小鼠耳水肿模型，并通过对脂多糖（LPS）刺激的 RAW-Blue? 巨噬细胞测定 NF-κB/AP-1 依赖的分泌型胚胎碱性磷酸酶（SEAP）报告基因活性，考察分离代谢物对炎症信号的影响。植物化学鉴定采用薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱（HPLC）、质谱与核磁共振（NMR）。SeAcOEt 得到三个部位：SeFA 含 rosifoliol（1）/agarospirol（2）萜类混合物；SeFB 含熊果酸（3）与 7α-hydroxysandaracopimaric acid（4）；SeFC 含 jaceosidin（5）与 isosakuranetin-5-O-rutinoside（6）。SeAcOEt 抑制 TPA 诱导耳水肿 87.3%，SeFB 活性最高（97.4%），与吲哚美辛相当。萜类混合物与 7α-hydroxysandaracopimaric acid 可降低 LPS 刺激 RAW-Blue? 巨噬细胞中 NF-κB/AP-1 依赖的 SEAP 报告基因活性。S. elegans 的抗炎作用可能来自 SeFB 中多种植物化学物的联合贡献，而非单一成分。该研究报道了 7α-hydroxysandaracopimaric acid，并为该物种传统用于炎症提供了药理学证据。

研究背景方面，炎症是感染或组织损伤的保护性反应，但失调会参与多种急慢性疾病。核因子 κB（NF-κB）调控多条促炎基因表达，RAW-Blue? 巨噬细胞可经 NF-κB/AP-1 启动子分泌 SEAP（分泌型胚胎碱性磷酸酶），是抗炎药物筛选工具。Salvia 属（鼠尾草属）含 900 余种，具抗炎、镇静、降压等用途；S. miltiorrhiza、S. multicaulis、S. plebeia 等已被证明可抑制 LPS 诱导 NO、iNOS、TNF-α、COX-2 及 NF-κB 活性。Salvia elegans Vahl. 原产墨西哥与中美洲，民间用叶浸剂治腹痛、根茎敷治水肿与外伤，传统用于创伤性水肿等炎症，但此前缺乏验证药理学模型下的直接抗炎评价。已有研究涉及 ACE 抑制、血管紧张素 II 拮抗、抗焦虑抑郁，以及肥胖小鼠中降促炎细胞因子，但支撑传统抗炎用途的体内外证据不足，活性成分与化学组成关系不清。研究人员因此开展研究：以 SeAcOEt 及部位、单体为对象，用 TPA 小鼠耳水肿与 LPS 刺激 RAW-Blue? 细胞，明确 S. elegans 局部抗炎能力、主要贡献成分及 NF-κB/AP-1 信号抑制情况。论文发表于《Molecules》。

主要技术方法上，研究人员在墨西哥 Ozumba 采集 S. elegans 地上部分 6 kg，凭证标本存于 INAG 相关标本馆；用乙酸乙酯浸提得 SeAcOEt，经正相硅胶柱以正己烷/乙酸乙酯/甲醇梯度分部位，再经 GC-MS、HPLC、ESI-MS、一维与二维 NMR 鉴定化合物。体内用 ICR 雄性白化小鼠行 TPA 耳水肿实验，体外用 RAW-Blue? 巨噬细胞行 LPS 诱导 SEAP 报告实验，并以 SwissTargetPrediction 做靶点预测，统计用 ANOVA 与 Dunnett 检验。

2.1 来自 SeFA、SeFB 与 SeFC 的化合物：SeFA 经 GC-MS 鉴定主含 rosifoliol（1，25.2%）与 agarospirol（2，19.5%）即 TM；SeFB 经 HPLC 与标准品比对及 ESI-MS 获熊果酸（UA，3），再由 RP-18 与一维/二维 NMR 鉴定 7α-hydroxysandaracopimaric acid（4，首次自 S. elegans 分出，isopimaric acid 型二萜，C-7 α 羟基）；SeFC 分得 jaceosidin（5，6-hydroxiluteolin 型黄酮，两个甲氧基）与 isosakuranetin-5-O-rutinoside（6）。HPLC 显示 SeAcOEt 中 3 为 0.039 mg/g、4 为 0.045 mg/g，SeFB 中 3 为 0.43 mg/g、4 为 0.19 mg/g。

2.2 S. elegans 提取物、部位及化合物的抗炎效应：TPA 耳水肿中，vehicle 两耳重量差约 12.6±1.2 mg；吲哚美辛 1 mg/耳抑炎 91.2%；SeAcOEt 1 mg/耳抑炎 87.3%；SeFA 中 TM（1/2）抑炎 55.7%；SeFB 抑炎 97.4%，剂量反应 E_max=102%、ED₅₀=0.092 mg/耳；SeFC 抑炎 65.6%，主成分 jaceosidin（5）；isosakuranetin-5-O-rutinoside（6）1 mg/耳无显著作用。化合物 4 体内 E_max=17%、ED₅₀=1.087 mg/耳。RAW-Blue? 中，TM 抑 NF-κB 激活 E_max=28.9%、IC₅₀=4.08 μg/mL；化合物 4 E_max=36.6%、IC₅₀=37.0 μg/mL。研究人员据此认为 SeFB 高效能来自 UA 与 7α-hydroxysandaracopimaric acid 等多成分组合。

讨论部分指出，TPA 经 PLA₂（磷脂酶 A₂）促花生四烯酸释放、COX-2（环氧化酶-2）与 NF-κB 级联致炎；吲哚美辛作阳性对照验证模型。SeFB 优于吲哚美辛，因含 UA（文献 ED₅₀ 0.02 mg/耳、抑 COX-2 与 NF-κB 核转位）及新二萜 4；pimarane 骨架本身具抗炎意义。SwissTargetPrediction 提示 4 可作用 PPARG、PPARA、MME、PTGER2、PTGER4、PTGDR 等，提示其经 PPAR（过氧化物酶增殖物激活受体）与前列腺素受体调节急性及代谢相关炎症。jaceosidin 文献中抑 COX-2、TNF-α、IL-1β 与 NF-κB；isosakuranetin-5-O-rutinoside 因缺 C-7 羟基等结构特点而无局部抗炎效。rosifoliol/agarospirol 还可预测作用于 CYP19A1、AR、NR1H3、SREBF2、NPC1L1，关涉性激素合成与胆固醇稳态。加和模型估各成分贡献为 UA 59.1%、TM 5.0%、4 为 2.8%、5 为 2.7%，总和 90.0% 接近 SeAcOEt 实测 87.3%；SeFB 计算 92.6% 接近 98%。研究局限在仅急性模型、靶点待受体结合/基因表达/分子对接验证、缺药代与毒性数据。

结论部分翻译如下：本研究首次对 Salvia elegans 乙酸乙酯提取物进行药理学与植物化学综合表征，整合化学轮廓与体内、体外及计算手段。结果显示提取物具显著局部抗炎活性；生物活性导向分段确定 SeFB 为最活跃部位，富集熊果酸与新二萜 7α-hydroxysandaracopimaric acid。谱学分析确立该二萜为 S. elegans 首次报道，拓展该药用植物化学认知。药理评价进一步证明 rosifoliol/agarospirol 混合物与 7α-hydroxysandaracopimaric acid 可降低 LPS 刺激 RAW-Blue? 巨噬细胞的 NF-κB/AP-1 依赖 SEAP 报告基因活性。但 SeFB 活性明显高于单体 4，说明提取物药效更可能由多代谢物联合贡献而非单成分。计算靶点预测提示这些代谢物可作用炎症信号、前列腺素受体、核受体及脂质代谢蛋白，但预测仅为假设生成，须实验验证。总之，研究为 S. elegans 传统抗炎用途提供药理学证据，并为后续明确主要代谢物单独与联合贡献、验证分子靶点及阐明机制奠定基础。