《Environment International》：Association of prenatal co-exposure to OPEs and PAEs with ASD symptom trajectories in preschool children: the modifying role of vitamin D
编辑推荐：
研究人员基于马鞍山出生队列（Ma'anshan Birth Cohort, MABC）发现，母亲孕期尿液中平均单甲基邻苯二甲酸酯（monomethyl phthalate, MMP）、单(2-乙基-5-氧代己基)邻苯二甲酸酯（mono-(2-ethyl-5-o
研究人员基于马鞍山出生队列（Ma'anshan Birth Cohort, MABC）发现，母亲孕期尿液中平均单甲基邻苯二甲酸酯（monomethyl phthalate, MMP）、单(2-乙基-5-氧代己基)邻苯二甲酸酯（mono-(2-ethyl-5-oxohexyl) phthalate, MEOHP）及高分子量邻苯二甲酸酯总和（ΣHMWP）与儿童较高孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder, ASD）症状轨迹相关。妊娠第三孕期似乎是关联敏感窗口。二苯基磷酸酯（diphenyl phosphate, DPHP）、二丁基磷酸酯（dibutyl phosphate, DBP）和二烷基有机磷酸酯总和（Σdi-OPEs）对ASD症状轨迹具有性别特异性效应。母亲维生素D可能修饰OPEs/PAEs对ASD症状轨迹的效应。OPEs与PAEs对学龄前儿童ASD症状轨迹呈混合效应。
研究背景方面，孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder, ASD）是一组以社交沟通与互动障碍、受限重复行为及狭窄兴趣为特征的神经发育障碍，幼年起病，全球疾病负担居神经系统疾病前十。亚临床ASD症状比临床诊断更常见，早期识别与干预十分关键。有机磷酸酯（organophosphate esters, OPEs）与邻苯二甲酸酯（phthalic acid esters, PAEs）是两类新兴环境污染物，常共检于人体生物样本，作为增塑剂用途重叠、暴露途径相似，产前胎儿神经发育关键期共暴露值得关注。动物研究提示Di(2-ethylhexyl) phthalate（DEHP）可致子代ASD样行为，人类研究提示PAEs早期暴露与儿童ASD风险正相关；OPEs结构近似有机磷农药，可经谷氨酸、γ-氨基丁酸及内分泌通路影响神经发育。已有研究发现服用产前维生素时PAEs暴露与儿童ASD风险降低有关，本团队既往研究也发现孕期维生素D可降低OPEs所致ADHD症状风险。维生素D缺乏在孕产妇中普遍，孕产期维生素D不足儿童ASD风险升高54%。目前知识缺口包括：ASD症状多为单时间点评估，缺乏纵向轨迹；性别差异研究不足；OPEs/PAEs半衰期短需分孕期重复评估以识别敏感窗口；OPEs与PAEs共暴露对ASD轨迹影响未知。该研究发表于《Environment International》。
关键技术方法上，研究人员依托马鞍山出生队列（Ma'anshan Birth Cohort, MABC），于2013年5月至2017年9月在马鞍山市妇幼保健院招募首孕期孕妇，最终纳入2400对母婴。母亲在孕早、中、晚期采集晨尿，空腹采血测血清25-羟维生素D（25(OH)D）；尿液采用溶剂诱导相变萃取联合超高效液相色谱串联质谱（solvent-induced phase change extraction-UPLC-MS/MS）定量OPEs，固相萃取-高效液相色谱串联质谱（SPE-HPLC-MS/MS）定量PAEs，肌酐校正稀释；儿童3、5、6岁用Clancy孤独症行为量表（Clancy Autism Behavior Scale, CABS）评估ASD症状；协变量经有向无环图筛选；低于检出限以LOD/√2替代，按孕期与性别分层，并用平均25(OH)D分为缺乏（<20 ng/mL）与非缺乏（≥20 ng/mL）进行修饰分析。
研究结果如下。
2.1 研究人群（Study population）：研究人员从MABC剔除多胎、胎停、流产、引产、死胎、异位妊娠及未提供三孕期尿样者，再剔除ASD症状评估少于两次儿童，最终2400对母婴进入分析，早、中、晚孕期样本量分别为2301、2320、2247。
2.2 OPE/PAE/25(OH)D样本与检测（Sample collection and OPE/PAEs/25(OH)D measurement）：母亲早孕10.41周、中孕25.98周、晚孕34.37周采尿存于-80 ℃；空腹血分离血清存-80 ℃。定量6种OPE代谢物（TCEP、DPHP、BCIPP、BBOEP、BEHP、DBP）与6种PAE代谢物（MMP、MEP、MBP、MEHP、MEHHP、MEOHP）；25(OH)D用放射免疫法测，按三孕期均值判维生素D营养状态。
2.3 儿童ASD症状收集（Collection of children's ASD symptoms）：3–6岁随访用CABS筛查，14条目、0–2分，总分≥14为ASD症状初筛切点；本研究3、5、6年Cronbach α为0.800、0.798、0.851。
2.4 协变量（Covariates）：纳入母亲入组年龄、孕前BMI、智商、孕期增重、产次、教育、家庭月收入、6月龄喂养方式、分娩方式、儿童性别等。
2.5 数据处理与统计分析（Data processing and statistical analysis）：低于LOD用LOD/√2，肌酐校正浓度；以三孕期重复暴露与3/5/6岁重复症状评估构建轨迹模型，分析个体与混合OPE/PAE暴露、敏感窗口、性别分层及维生素D状态修饰。
讨论部分总结：研究人员指出，既往多为单时点ASD评估，本研究以重复测评揭示OPEs/PAEs共暴露与ASD症状轨迹关系；第三孕期敏感窗口与胎儿晚期神经回路形成及污染物短期暴露累积有关；DPHP、DBP、Σdi-OPEs存在性别特异性，提示胎儿性别相关胎盘转运与激素环境差异；母亲25(OH)D非缺乏可减弱OPE/PAE神经发育有害关联，与维生素D调节神经递质、信号通路及抗氧化作用一致。研究局限包括CABS为筛查量表而非诊断工具、残留混杂可能、单中心队列外推需谨慎。
研究结论部分翻译：平均MMP、MEOHP和ΣHMWP与儿童较高ASD症状轨迹相关；第三孕期似为关联敏感窗口；DPHP、DBP和Σdi-OPEs对ASD症状轨迹具有性别特异性效应；母亲维生素D可能修饰OPEs/PAEs对ASD症状轨迹的效应；OPEs与PAEs对学龄前儿童ASD症状轨迹呈混合效应。
