非洲猪瘟病毒(ASFV)对全球养猪业构成了灾难性威胁,最近在欧洲、亚洲和加勒比地区爆发的疫情显著增加了美国价值数十亿美元的猪肉产业的生物安全风险。目前的诊断金标准依赖实验室检测,导致疫情应对出现严重延迟。为解决这一问题,研究人员开发了一种基于功能化金纳米颗粒(GNPs)的等离子体生物传感器,用于快速、无需扩增地检测ASFV。这些金纳米颗粒表面修饰了11-巯基十一烷酸(MUDA),并与针对p72(B646L)基因保守区域的ASFV特异性寡核苷酸探针结合使用。检测机制基于酸诱导的聚集:目标ASFV DNA与探针杂交后形成刚性双链结构,保护纳米颗粒免受酸液破坏,从而保持宝石红色;而在缺乏目标DNA的情况下,纳米颗粒会聚集,导致颜色从红色变为蓝色。优化后的等离子体生物传感器显示出100%的分析特异性,在19个代表猪群环境的非目标细菌基因组DNA样本中未出现交叉反应。根据IUPAC 3σ标准确定的检测限为:探针1每反应285个拷贝,探针2每反应402个拷贝,与在本实验条件下使用相同稀释系列进行的qPCR参考检测结果(约每反应312个拷贝)处于同一数量级。一个基于智能手机的Bio-Analytics应用程序通过RGB颜色转换算法进行定量分析,其信噪比(S/N)与台式分光光度测量结果高度相关(A???/A???比值,R2 = 0.96),并且诊断结果与qPCR结果一致。该平台提供了一种稳健且成本低廉(约2美元/次检测)的ASFV筛查方法,无需扩增,具有在需要的地方即时应用的潜力,但未来仍需在临床样本中进行验证。