《Poultry Science》：miR-182-5p regulates proliferation and senescence in chicken Leydig cells via the Wnt/β-catenin pathway by targeting
FOXN3
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公鸡的繁殖性能是影响家禽业生产效率和遗传进展的重要因素。Leydig细胞（LCs）通过合成和分泌睾酮支持雄性生殖功能；然而，调控鸡LCs功能的转录后机制仍未完全阐明。先前研究表明，200日龄公鸡睾丸中miR-182-5p表达水平高于500日龄公鸡，提示其可能与
公鸡的繁殖性能是影响家禽业生产效率和遗传进展的重要因素。Leydig细胞（LCs）通过合成和分泌睾酮支持雄性生殖功能；然而，调控鸡LCs功能的转录后机制仍未完全阐明。先前研究表明，200日龄公鸡睾丸中miR-182-5p表达水平高于500日龄公鸡，提示其可能与睾丸功能的年龄相关变化有关。本研究旨在体外探究miR-182-5p的作用。miR-182-5p过表达促进了鸡LCs的增殖，抑制了衰老，并升高了睾酮水平，而抑制miR-182-5p则产生相反效应。在鸡成纤维细胞系（DF-1细胞）中进行的双荧光素酶报告基因实验证实，miR-182-5p靶向FOXN3的3′非翻译区（3′UTR）。敲低FOXN3产生的效应与miR-182-5p过表达一致，支持FOXN3作为miR-182-5p的功能性下游介质。此外，miR-182-5p增强了Wnt/β-catenin信号通路，而共转染可抑制该通路的FOXN3过表达载体，削弱了miR-182-5p诱导的增殖和睾酮水平升高以及衰老减少。这些发现支持一个miR-182-5p/FOXN3/Wnt/β-catenin调控轴，在体外调节鸡LCs的增殖、衰老和睾酮水平。需要进一步的年龄比较和体内研究来确定该机制是否有助于自然生殖衰老或影响公鸡的繁殖性能。
miR-182-5p通过靶向FOXN3调控鸡Leydig细胞增殖与衰老的机制研究
家禽行业中，公鸡的繁殖性能直接影响种蛋受精率和后代遗传品质，是决定生产效率和经济效益的关键因素。随着公鸡年龄增长（尤其是约45周龄后），常出现睾丸萎缩、重量减轻和睾酮水平下降，这些年龄相关变化可能源于Leydig细胞（LCs，睾丸间质细胞）的内在改变、垂体促性腺激素刺激减弱或两者共同作用。LCs是睾丸中产生睾酮的主要细胞，支持精子发生和维持雄性生育力。因此，LCs功能及其调控网络的变化可能参与公鸡生殖衰老过程。微小RNA（miRNA）是一类约22个核苷酸的非编码RNA，通过与靶信使RNA的3′非翻译区（3′UTR）结合，导致翻译抑制或mRNA降解，在转录后水平发挥关键调控作用。在家畜和家禽中，多种miRNA已被报道调节LCs增殖和睾酮合成，如miR-7481-3p、miR-27b-3p等。miR-182-5p在哺乳动物多种细胞中参与调控增殖、衰老和分化，但在禽类中其功能尚不明确。前期研究对200日龄和500日龄公鸡睾丸进行miRNA测序，发现miR-182-5p在200日龄组高表达，提示其与年龄相关睾丸功能变化有关。然而，miR-182-5p对鸡LCs的直接作用及分子机制仍不清楚。因此，本研究旨在阐明miR-182-5p在鸡LCs中的功能与调控通路。
研究人员采用体外培养的原代鸡LCs，通过转染miR-182-5p模拟物（mimic）和抑制剂（inhibitor）双向调节其表达。实验结果显示，miR-182-5p过表达显著促进LCs增殖、抑制衰老并提高睾酮水平，而抑制miR-182-5p则产生相反效应。利用靶基因预测和双荧光素酶报告基因实验，研究人员证实FOXN3是miR-182-5p的直接靶基因。功能实验表明，FOXN3敲低与miR-182-5p过表达效应一致，而FOXN3过表达则抑制LCs增殖、促进衰老并降低睾酮
