系统性互作组分析发现OCRL是登革病毒2型NS4A的相互作用蛋白，其通过独立于整体肌动蛋白细胞骨架重排的机制抑制病毒复制

《Scientific Reports》：Systematic interactome analysis identifies OCRL as a DENV 2 NS4A interactor that inhibits viral replication through a mechanism independent of global actin cytoskeleton rearrangement

　　

摘要

登革热病毒（DENV）属于Orthoflavivirus属，是一种具有重要医学意义的人类病原体。DENV编码七种非结构（NS）蛋白，发挥多种细胞效应。NS4A是一种16 kDa的膜结合蛋白；然而，其在正黄病毒（Orthoflavivirus）感染中的功能仍然知之甚少。在本研究中，我们旨在通过EGFP免疫沉淀联合无标记定量质谱技术鉴定DENV 2 NS4A的细胞互作组，从而阐明其功能。共鉴定出212种DENV 2 NS4A互作蛋白，其中调节内体运输的蛋白、具有ATP依赖性RNA作用的蛋白以及具有解旋酶活性的蛋白显著富集。肌醇多磷酸5-磷酸酶小脑肾综合征蛋白1（OCRL）、DEAD-box解旋酶、DDX18和DDX41被证实与DENV 2 NS4A相互作用并在DENV感染中发挥抑制作用。进一步的表征表明，DENV感染诱导OCRL mRNA在感染后48小时出现晚期上调。为进一步评估其功能作用，进行了siRNA介导的OCRL敲低实验，结果显著促进了DENV基因组复制、病毒蛋白表达和感染性病毒的产生。肌动蛋白细胞骨架定量纹理分析表明，OCRL耗竭虽调节了局部肌动蛋白束对比度，但并未引起整体空间破坏或网络碎片化。OCRL的抗病毒活性据推测与组织蛋白酶D介导的溶酶体降解途径有关。我们的研究结果表明，OCRL作为限制性宿主因子对抗DENV 2感染，而DDX18和DDX41则减少病毒产生。因此，本研究为登革热NS4A蛋白与宿主调节因子之间的复杂相互作用提供了新的见解，并突出了一种通过调节溶酶体运输来实现病毒限制的 novel 机制。