通过spICP-MS方法评估蛋白酶、蛋白酶K和TMAH在生物临床样品（CRMs）中用于纳米粒子鉴定的提取能力

《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》：Evaluation of extraction capabilities of protease, proteinase K, and TMAH for nanoparticle characterization in biological CRMs by spICP-MS

　　

摘要

可靠的方法开发和验证依赖于经过认证的参考物质（CRMs），这些参考物质理想情况下应能够提供不依赖于样品制备和分析方法的准确分析物浓度。尽管无机纳米颗粒（NPs）在生物系统中的研究日益增多，但目前尚无专为纳米颗粒表征而认证的生物基质CRMs。在本研究中，使用三种常用的提取protocol（基于蛋白酶K、蛋白酶和四甲基氢氧化铵TMAH）从五种生物CRMs（DOLT-4、DOLT-5、DORM-4、DORM-5和TORT-3）中提取样品。提取所得的样品通过单颗粒ICP-MS（spICP-MS）技术进行了分析，以确定含有Ag-、Al-、Cu-、Cr-、Fe-、Hg-、Se-、Si-、Ti-和Zn的纳米颗粒的颗粒数浓度（PNCs）和颗粒尺寸分布（PSDs）。不同提取protocol下的PNCs和PSDs存在显著差异，表明样品制备是纳米颗粒表征过程中变异性的主要来源。除了提取效果的差异外，还观察到TMAH试剂中某些元素的背景信号较强，这突显了在解释spICP-MS结果时评估试剂污染的重要性。对DOLT-4、DORM-5和TORT-3中含Hg和Se的纳米颗粒的研究进一步表明，组织消化不完全和残留的基质片段会使得颗粒的鉴定和解读变得复杂。总体而言，本研究系统地比较了用于分析生物CRMs中天然存在纳米颗粒的常用提取策略，指出了当前样品制备方面存在的局限性，并为未来方法开发及生物CRMs的设计提供了指导。

图形摘要