摘要: 哮喘是全球常见的慢性气道炎症性疾病之一,现有治疗虽可控制症状,但难以从根本上调控免疫病理过程。小儿降气平哮合剂是临床治疗哮喘的经验方,前期研究证实其可有效改善哮喘症状,但作用机制尚待阐明。本研究整合哮喘患者鼻刷样本(GSE152004)与哮喘小鼠肺组织(GSE41665)转录组数据,采用机器学习筛选核心靶点,结合免疫细胞浸润分析探究其与哮喘免疫微环境的关联,并在卵清蛋白诱导的哮喘小鼠模型中开展药效学研究与机制验证。药效学结果显示,小儿降气平哮合剂显著降低模型小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-5水平,减轻气道炎症浸润、黏液分泌及胶原沉积。机器学习共筛选出7个核心基因,其中
IL-13与白细胞介素-1受体样蛋白1(interleukin-1 receptor-like 1,
IL-1RL1)表达呈显著正相关,且与活化树突状细胞、M1型巨噬细胞等促炎性免疫细胞浸润密切相关。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫组织化学与实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)验证表明,小儿降气平哮合剂可显著下调哮喘小鼠BALF中IL-13、IL-1RL1蛋白表达,抑制肺组织补体C1q A链(C1QA)、C1q C链(C1QC)的阳性表达,并降低白细胞介素-33(interleukin-33,
IL-33)、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,
TSLP)及补体受体低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipoprotein receptor-related protein 1,
LRP1)的mRNA转录水平。综上,小儿降气平哮合剂可能通过干预“上皮警报素-补体介导递呈-2型免疫放大”这一级联反应轴(即抑制IL-33/TSLP释放、阻断C1QA/C1QC-LRP1介导的抗原递呈、调控IL-1RL1/IL-13轴),系统性纠正哮喘2型辅助性T细胞(helper T cell 2,Th2)免疫微环境失衡,从而改善实验性哮喘表型。本研究为小儿降气平哮合剂的后续机制探索及临床应用提供了实验依据。动物实验获得中国中医科学院动物伦理委员会批准(批准号:2026B039)。
