摘要
新烟碱类杀虫剂吲哚虫脒（IMD）在农业中广泛使用，对水生生态系统构成潜在威胁，但其对淡水鱼类的肝毒机制尚不清楚。本研究探讨了铁死亡、线粒体功能障碍、炎症反应以及miR-153c/SQSTM1介导的铁蛋白自噬通路在IMD诱导的鲤鱼（Cyprinus carpio）肝细胞肝毒性中的作用。通过CCK-8实验，选用0.6 μM IMD用于后续实验。IMD暴露引发铁死亡，表现为细胞内Fe2+积累增加、促铁死亡基因和蛋白表达上调，以及铁死亡抑制因子（SLC7A11和GPX4）表达下调。线粒体功能障碍表现为ATP含量降低、mtDNA水平下降以及NADPH/NADP+比值降低，同时线粒体分裂基因（Fis1和Drp1）和融合基因（Mfn1和TFAM）表达异常。此外，IMD诱导氧化应激（ROS和MDA升高；T-AOC、CAT和SOD活性下降）及明显的炎症反应，促炎细胞因子表达上调。在机制方面，IMD下调miR-153c表达，同时SQSTM1在mRNA和蛋白水平均上调，双荧光素酶报告基因实验验证了SQSTM1是miR-153c的直接靶标。过表达miR-153c通过miR-153c/SQSTM1轴减轻了IMD诱导的铁蛋白自噬、铁死亡和炎症反应。综合上述发现表明，IMD通过miR-153c/SQSTM1介导的铁蛋白自噬通路触发铁死亡、线粒体功能障碍和炎症反应，从而诱导鲤鱼肝毒性，为揭示IMD肝毒性的机制及潜在干预靶点提供了理论依据，有助于减轻IMD的生态风险。
