Myracrodruon urundeuva提取物对微小扇头蜱的多靶点杀螨机制：从生殖干扰到计算机模拟酶抑制

《Experimental Parasitology》：Multi-target acaricidal mechanism of Myracrodruon urundeuva extracts against Rhipicephalus microplus: From reproductive interference to in silico enzyme inhibition

　　

研究人员发现，乙醇提取物对微小扇头蜱（Rhipicephalus microplus）表现出强效杀螨作用；该提取物可降低产卵量并损害雌虫的生殖适应性；组织学分析揭示严重的卵母细胞损伤和结构破坏；黄酮类化合物在计算机模拟（in silico）中显示对乙酰胆碱酯酶（AChE）和细胞色素P450（CYP450）具有高亲和力；多靶点机制支持可持续的蜱控制策略。

微小扇头蜱是牛群最重要的体外寄生虫之一，可导致动物死亡、生产力下降并传播血液原虫，给畜牧业造成重大经济损失。在巴西，使用合成杀螨剂是主要防控手段，但耐药种群快速演化及环境污染问题日益突出。植物源天然产物因含有复杂活性混合物，被认为是一种可持续的替代方案。Myracrodruon urundeuva是巴西半干旱地区的特有树种，富含黄酮类化合物，具有多种生物活性，但其对蜱类的杀螨作用研究较少。为此，研究人员评估了该植物叶提取物对微小扇头蜱的杀螨活性，并通过计算机模拟分子对接初步探索其分子机制。该研究发表于《Experimental Parasitology》。

研究人员采集Myracrodruon urundeuva成熟叶片，分别制备水提物和乙醇提取物。采用成虫浸渍试验和幼虫包封试验评价杀螨活性；通过卵巢组织学分析评估生殖损伤；利用超高效液相色谱-高分辨质谱（UHPLC-HRMS）鉴定化学成分；基于AlphaFold3预测靶酶结构，使用AutoDock Vina进行分子对接；并以卤虫（Artemia salina）无节幼体为指示生物进行生态毒性初筛。供试蜱群来自巴西EPAMIG的S?o Jo?o del-Rei标准敏感品系，幼虫来自Unaí地区自然感染的牛只。统计分析采用单因素方差分析、Scott-Knott检验和Probit回归计算半数致死/有效浓度。

**3.1 提取物对饱血雌虫的影响**
通过成虫浸渍试验，水提物（AE）在25～100 mg mL^-1浓度下的杀螨效力为19.49%～25.91%，但未显著降低幼虫孵化率；乙醇提取物（EE）在75和100 mg mL^-1时显著降低产卵能力和幼虫孵化率，最高效力达86.05%，且高于商品化阳性对照（57.08%），其降低雌虫生殖潜能的半数有效浓度（EC₅₀）为37.24 mg mL^-1。

**3.2 提取物对幼虫的影响**
通过幼虫包封试验，AE和EE在浓度超过50 mg mL^-1时幼虫死亡率分别为35.7%～74.03%和35.94%～81.32%；AE的半数致死浓度（LC₅₀）为29.18 mg mL^-1，EE在50 mg mL^-1时死亡率即达83.99%，高浓度下出现饱和平台，表明幼虫对EE高度敏感。

**3.4 微小扇头蜱卵巢组织学分析**
EE处理雌虫的卵巢切片显示卵母细胞形态改变、空泡化、质膜解体及细胞质降解，成熟卵母细胞（IV和V期）出现局部质膜脱离、细胞质颗粒化和广泛空泡化，表明提取物对生殖结构造成明显损伤。

**3.5 乙醇提取物化学成分分析**
UHPLC-HRMS鉴定出多种黄酮类化合物，包括异牡荆素（isovitexin）、槲皮素（quercetin）、槲皮素-3-阿拉伯糖苷、槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷、牡荆素-2''-O-鼠李糖苷（vitexin-2''-O-rhamnoside）和山柰酚-7-新橙皮糖苷（kaempferol-7-neohesperidoside），并检出萜类、酚酸和酰胺类成分。

**3.6 配体与靶酶的分子对接**
基于AlphaFold3预测的乙酰胆碱酯酶（AChE）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）和细胞色素P450（CYP450）三维结构，分子对接显示三种主要黄酮与这些酶的预测结合能在-7.517至-8.9 kcal/mol之间。其中vitexin-2''-O-rhamnoside对CYP450和AChE的预测结合能最负，kaempferol-7-neohesperidoside对GST最负，但这些结果仅为计算预测，不证明实际酶抑制。

**1.7 提取物对卤虫无节幼体的毒性**
水提物和乙醇提取物在0.01～