《Frontiers in Endocrinology》：Vaginal Nugent Lactobacillus morphotype score and endometrial pathogen detection: a two-centre retrospective study
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摘要
引言：这项双中心回顾性观察研究调查了阴道Nugent乳杆菌形态评分（Lactobacillus morphotype score, LMS）是否与不孕女性的子宫内膜病原体检测和宫内乳杆菌丰度相关。
方法：研究纳入了282名女性（A中心，n=92；B中心，
摘要
引言：这项双中心回顾性观察研究调查了阴道Nugent乳杆菌形态评分（Lactobacillus morphotype score, LMS）是否与不孕女性的子宫内膜病原体检测和宫内乳杆菌丰度相关。
方法：研究纳入了282名女性（A中心，n=92；B中心，n=190），她们在2025年3月至12月期间同时接受了阴道Nugent评分和子宫内膜定量PCR（quantitative PCR, qPCR）检测。在检测前1个月内使用过抗生素或任何益生菌的女性被排除。采用Spearman秩相关和调整了中心、年龄、体重指数（body mass index, BMI）及反复种植失败（recurrent implantation failure, RIF）的多变量logistic回归评估相关性。
结果：LMS与子宫内膜病原体检测呈正相关（ρ=+0.229，p<0.001）。在调整中心、年龄、BMI和RIF后，LMS每增加1分与病原体检测几率升高相关（调整后比值比[odds ratio, OR]=1.40，95%置信区间[confidence interval, CI] 1.17–1.68；p<0.001）。然而，判别性能有限（曲线下面积[area under the curve, AUC]=0.636，95% CI 0.567–0.705），且在LMS为0时病原体检出率仍为23.3%。LMS与宫内总乳杆菌（ρ=?0.488，p<0.001）和卷曲乳杆菌（Lactobacillus crispatus）（ρ=?0.411，p<0.001）呈负相关。所有56名LMS为4的女性均为L. crispatus阴性；然而，当LMS 4被视为阳性结果时，其预测L. crispatus缺失的敏感性仅为30.8%。
讨论：阴道LMS是一个相关的初步无创指标，但不能替代直接的子宫内膜评估，也不能可靠地排除子宫内膜病原体检测。
**论文解读：阴道Nugent乳杆菌形态评分与子宫内膜微生物特征的关系**
**研究背景与目的**
子宫内膜微生物群对生殖结局的影响日益受到关注。既往认为子宫腔无菌，但新一代测序技术证实子宫内膜存在独特的微生物群落，且其菌群失调与不孕、反复种植失败及复发性流产相关。由于阴道与子宫内膜解剖上连续，阴道菌群可能上行迁移，因此简单评估阴道菌群或许能间接反映子宫内膜状态。然而，近期随机对照试验提示，治疗阴道菌群失调并不能改善体外受精临床妊娠率，故需分别研究子宫内膜微环境。Nugent评分是诊断细菌性阴道病的金标准，其包含乳杆菌形态评分（LMS），评估革兰染色下大革兰阳性杆菌的数量。本研究旨在探讨阴道LMS是否与子宫内膜病原体检测及宫内乳杆菌丰度相关，从而评估LMS作为子宫内膜微生物状态的初步无创指标的潜力。
**研究方法概括**
研究为双中心回顾性观察研究，纳入2025年3月至12月期间在日本A中心（92例）和B中心（190例）同时接受阴道Nugent评分与子宫内膜qPCR检测的282名不孕女性，排除检测前1个月内使用抗生素或任何益生菌者。阴道标本取自后穹窿，按原始Nugent方法进行革兰染色评分；子宫内膜标本在分泌期经宫颈清洗后使用无菌导管采集，采用OpenArray平台进行定制化实时PCR检测26种病原体、4种乳杆菌及乳杆菌属。主要终点为LMS与子宫内膜病原体检测的Spearman相关，次要终点包括LMS与宫内乳杆菌总量及菌种的相关性。采用多变量logistic回归调整中心、年龄、BMI和RIF，并以ROC曲线评估判别能力。
**研究结果**
*患者人口统计学特征*：282名患者平均年龄37.0±4.3岁，35.5%有RIF，25.2%有复发性流产；A中心RIF比例（54.3%）高于B中心（26.3%）。
*Nugent评分分布*：LMS 0占36.5%，LMS 4占19.9%；GMS 0占91.8%，MMS 0占98.9%，多数患者其他两种形态评分为0。
*LMS与子宫内膜病原体检测*：LMS与病原体检测呈显著正相关（ρ=+0.229，p<0.001），即使在LMS 0时检出率仍达23.3%。限制于GMS=0且MMS=0的259例（91.8%）后，相关性减弱但仍显著（ρ=+0.164，p=0.008），提示LMS与病原体的关联部分受其他Nugent成分影响。
*多变量与诊断性能分析*：调整中心、年龄、BMI和RIF后，LMS每增加1分，病原体检测的调整后OR为1.40（95% CI 1.17–1.68；p<0.001），且无中心交互作用（p=0.581）。但AUC仅为0.636，不同阈值下的敏感度32.6%–73.9%，特异度41.6%–86.3%，提示单独使用LMS的判别能力有限，不足以作为规则内或规则外试验。
*物种特异性分析*：卷曲乳杆菌（L. crispatus）与LMS负相关最强（ρ=?0.411，p<0.001），惰性乳杆菌（L. iners）呈弱负相关（ρ=?0.137，p=0.021），而加氏乳杆菌（L. gasseri）和詹氏乳杆菌（L. jensenii）无显著相关。所有56例LMS 4者均为L. crispatus阴性，但以LMS≥4作为阳性标准时，预测L. crispatus缺失的敏感性仅30.8%，特异性和阳性预测值均为100%。
*LMS与宫内乳杆菌总量*：LMS与宫内总乳杆菌呈显著负相关（ρ=?0.488，p<0.001），调整后偏相关ρ=?0.435（p<0.001），且二元检出分析和定量分析均一致；中位数从LMS 0的4,746拷贝/mL降至LMS 4的0拷贝/mL（LMS 3时非单调性升高至1,676拷贝/mL）。
*中心间一致性*：两中心在总乳杆菌、L. crispatus和病原体检测上均呈方向一致且显著的Spearman相关（例如病原体检测：A中心ρ=+0.293，p=0.005；B中心ρ=+0.167，p=0.022）。L. iners仅在A中心显著，L. gasseri在两中心方向相反，L. jensenii均不显著。
**讨论与结论**
讨论部分指出，LMS与病原体检测的相关性较弱（ρ=+0.229），而与宫内乳杆菌耗竭的相关性较强（ρ=?0.488）。LMS 4可特异性地提示L. crispatus缺失，但敏感性低，不能作为独立诊断工具。需注意qPCR无法区分活菌、死菌与游离DNA，且经宫颈采样可能存在下生殖道微生物携带污染，因此观察到的关联可能源于生物学连续性、采样转移或两者兼有。LMS不应触发子宫内膜检测或抗菌治疗，最多在已考虑进行子宫内膜评估的特定患者中提供辅助背景信息。研究局限性包括未评估生殖结局、两中心效应量存在差异、回顾性设计等。
研究结论为：在不孕日本女性中，较高的阴道LMS与较低的宫内乳杆菌丰度相关，且与子宫内膜病原体检测存在较弱的相关性；然而，有限的判别性能以及LMS 0时仍存在的病原体检出表明，LMS不能替代直接的子宫内膜评估，也不能可靠地排除子宫内膜微生物异常。因此，LMS应被视为初步的无创指标，而非经过验证的筛查或诊断试验；在临床应用前需开展包含生殖结局的前瞻性外部验证。
