氟西汀通过上皮5-羟色胺（5-HT）1A受体/Wnt信号通路间接激活黑色素干细胞，促进黑色素细胞再生

《Journal of Investigative Dermatology》：Fluoxetine activates melanocyte stem cells indirectly through the epithelial 5-hydroxytryptamine (5-HT) receptor 1A/Wnt signaling to regenerate melanocytes

　　

摘要

黑素细胞干细胞（McSCs）是成年人表皮黑素细胞的主要来源，在皮肤稳态、修复和再生中发挥关键功能。临床前和临床研究证实，McSCs对白癜风等疾病具有治疗潜力。本研究表明，氟西汀治疗与McSCs的激活相关。以窄谱中波紫外线（NB-UVB）照射作为阳性对照，我们发现14天氟西汀治疗与McSC耗竭小鼠模型中表皮黑素细胞数量增加相关，该效应与治疗后1–3天毛囊McSCs激活上调相关。一致地，在McSC特异性Tg(-1.1tfap2b:eGFP)^cpu108斑马鱼中，我们观察到2天氟西汀治疗后表皮黑素细胞数量增加和McSCs激活。值得注意的是，在研究时间点，与NB-UVB照射不同，氟西汀治疗未伴随小鼠皮肤中的氧化应激、DNA损伤、凋亡或炎症。此外，5-羟色胺受体1A（HTR1A）和Wnt7a在第3天毛囊生发上皮细胞中共定位，两种分子在氟西汀治疗组中均上调。将氟西汀处理后的HaCaT细胞（24小时）的条件培养基应用于SK-MEL-2细胞（48小时）表明，氟西汀通过上皮HTR1A间接激活Wnt信号通路，调节黑素细胞分化。总之，本研究为研究早期黑素细胞的动态行为及开发皮肤修复策略提供了基础。

章节摘要

引言

黑素细胞干细胞（McSCs）是定向分化为黑素细胞谱系的成体干细胞，在胚胎发育早期来源于神经嵴（Garcia-Castro等，1999）。在休止期，McSCs位于毛囊隆起和生发部，与周围毛囊干细胞（HFSCs）共享其微环境。在生长期，生发部的McSCs和HFSCs协同激活Wnt信号通路（Rabbani等，2011）。McSCs暂时激活并分化为

14天氟西汀治疗与McSC耗竭小鼠模型中表皮黑素细胞数量增加相关

由于C57BL/6小鼠背部皮肤中的黑素细胞谱系仅位于毛囊内而非表皮中，C57BL/6小鼠模型是追踪新生表皮黑素细胞的理想模型。进行反复脱毛（RPT）以诱导生发部McSCs耗竭（Sun等，2023）（图1a），从而减少黑素细胞来源。仅进行RPT操作或后续操作后

讨论

既往研究表明，氟西汀可促进小鼠和斑马鱼胚胎黑素细胞的黑色素合成（Liu等，2018；Zhou等，2018）。本研究探讨了氟西汀在调节McSCs激活中的疗效和安全性。我们的结果表明，氟西汀可能通过上皮HTR1A/Wnt信号通路间接激活McSCs，从而产生表皮黑素细胞。值得注意的是，14天氟西汀治疗表现出

小鼠

8周龄雄性雌性C57BL/6J小鼠（18–22克）购自北京 SPF 生物科技有限公司。小鼠饲养于中国药科大学药物动物实验中心，标准12/12小时光暗周期，温度20–25°C，湿度40–60%，自由进食饮水。

统计分析

统计分析和绘图使用GraphPad Prism（v.10.1.2，GraphPad Software，美国加利福尼亚州拉霍亚）进行。通过以下方法评估正态性

其他方法

附加材料和方法，包括McSC耗竭小鼠模型的构建、多色免疫荧光染色、McSC特异性Tg(-1.1tfap2b:eGFP)^cpu108斑马鱼的构建、斑马鱼中McSCs和黑素细胞数量的计算、RNA测序和数据分析、HaCaT细胞条件培养基的准备、HaCaT来源条件培养基处理SK-MEL-2细胞以及RT-qPCR，均见补充材料和方法。

伦理声明

所有动物实验程序均按照中国药科大学动物实验伦理委员会批准的方案进行（批准编号：SYXK[苏] 2021-0011）。

数据可用性声明

支持本研究结果的原始数据可向通讯作者商靖教授合理请求获取。本研究相关的RNA测序数据可通过基因表达综合数据库研究编号GSE344141获取（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE344141）。

作者贡献

概念构思：YY, JS；数据整理：XZ, MZ, MY, YC；形式分析：XZ, XS；资金获取：JS；调查研究：XZ, MZ, MY, HZ, TG；方法学：XZ, MY, ZP, HZ, TG；项目管理：JS；资源支持：JS, YY；监督指导：YY, JS；验证：MZ；可视化：XZ, XS；原稿撰写：XZ, XS, YY, JS；审稿与编辑：XS, JL, YY, JS

生成式人工智能（AI）或大语言模型（LLMs）使用声明

本文献未使用任何AI或LLM工具。

补充材料

补充材料附于论文在线版本。

利益冲突

作者声明无利益冲突。

致谢

本工作由国家重点研发计划科学仪器与装备开发专项（第14个五年计划期间，项目编号：2022YFF0711100）以及国家自然科学基金（项目编号：82274035和81874331，中国）资助。JS为本工作的担保人。

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