《Frontiers in Public Health》：Serological evidence uncovers undocumented mpox exposure in febrile patients in Nigeria
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摘要
引言：猴痘病毒（MPXV）已成为全球健康威胁，全球报告的病例数不断增加。自2017年再次出现以来，尼日利亚经历了持续的疫情，这凸显了建立强有力的监测机制以识别传播动态的迫切需求。尽管存在这种紧迫性，但关于尼日利亚寻求医疗护理患者中MPXV血清阳性率的数据
摘要
引言：猴痘病毒（MPXV）已成为全球健康威胁，全球报告的病例数不断增加。自2017年再次出现以来，尼日利亚经历了持续的疫情，这凸显了建立强有力的监测机制以识别传播动态的迫切需求。尽管存在这种紧迫性，但关于尼日利亚寻求医疗护理患者中MPXV血清阳性率的数据仍然稀少。由于MPXV的临床症状与其他常见发热原因重叠，其可能被低估。
方法：研究人员利用Luminex微球免疫测定法中的A35R和A29L抗原评估尼日利亚多个医疗机构发热患者的MPXV血清阳性率。该研究于2023年6月至2024年7月期间在翁多州、贝努埃州、高原州和奥孙州招募了245名发热个体。对血浆样本进行了针对MPXV A35R和A29L抗原的抗体的分析。采用了手动3标准差阈值方法和基于R的SeroNIST分析框架。统计分析评估了检测可靠性，并确定了与MPXV暴露相关的潜在风险因素。
结果与讨论：两种抗原显示出相似的暴露模式（p = 0.297）。3SDV阈值方法确定的A35R和A29L血清阳性率分别为47.4%和40.4%。SeroNIST方法分别得出A35R和A29L的估计值为30.51%和21.17%。参与者（n=62；25.31%）对两种抗原均表现出反应性。双变量分析显示，只有居住州对两种抗原的血清状态有显著影响，而性别、职业和婚姻状况仅显著影响A29L的血清状态。多变量回归表明，没有任何变量与A35R血清阳性显著相关；然而，来自翁多州的参与者显示出更高但不显著的血清阳性几率。对于A29L，卫生工作者、男性和来自奥孙州的参与者的血清阳性几率显著较低，而年龄26-36岁者的几率较高但不显著。这些结果证实了发热患者中存在相当大的MPXV暴露，并呼吁开展纵向和特定地区的研究，以揭示尼日利亚MPXV血清阳性率的时间和地理趋势。
猴痘病毒（monkeypox virus，MPXV）作为一种人畜共患正痘病毒（Orthopoxvirus），近年来已成为全球公共卫生威胁，在地方性和非地方性地区的报告病例不断增加。尼日利亚自2017年疫情复燃以来持续报告病例，但针对该国医疗机构就诊患者的血清流行病学数据仍然匮乏。由于MPXV感染与疟疾、伤寒等其他常见发热疾病的临床表现重叠，导致大量感染可能未被识别，仅依赖聚合酶链反应（PCR）等分子检测又受病毒排毒窗口期和实验室条件的限制，因此血清学监测成为补充手段，可揭示既往、无症状或临床未识别的暴露。为了填补这一空白，研究人员开展了一项多中心横断面血清流行病学研究。
研究人员利用Luminex微球免疫测定法（Luminex bead-based immunoassay），以MPXV的A35R和A29L重组蛋白为抗原，检测了2023年6月至2024年7月期间来自尼日利亚翁多州（Ondo）、贝努埃州（Benue）、高原州（Plateau）和奥孙州（Osun）15个医疗机构的245名发热患者（年龄15至36岁）血浆中的抗MPXV抗体。该年龄段的选取旨在排除1980年牛痘疫苗接种终止前可能接种过的人群，从而减少牛痘疫苗残留免疫的交叉反应。研究分别采用传统“均值+3标准差”（mean + 3SDV）阈值法和基于R的SeroNIST概率框架评估血清阳性率，并进一步分析了社会人口学因素与血清阳性状态的关联。研究结果显示，发热患者中存在可观的MPXV暴露证据，且居住州是影响血清阳性的重要因素。这一发现支持将血清学监测纳入尼日利亚现行mpox监测系统，为完善发热疾病哨点监测和公共卫生应对提供了依据。
主要技术方法方面，研究人员从静脉血中分离血浆，利用MagPlex微球偶联重组MPXV A35R和A29L抗原，以牛血清白蛋白（BSA）偶联微球作为背景对照，通过Luminex xMAP平台读取中位荧光强度（MFI）并定量抗体反应。样本队列来源为尼日利亚四个州的15个医疗机构，包括翁多州（Akure North、Akure South、Owo）、贝努埃州（Otukpo）、高原州（Vom）及奥孙州（Ede的RUN健康中心）。血清阳性判定采用两种互补策略：手动3SDV法（基于阴性对照的均值+3标准差）和R-based SeroNIST框架（基于对数转换的MFI信号建模阳性/阴性分布并计算概率）。统计分析包括Mann–Whitney U检验、Pearson卡方检验、Fisher精确检验、Cohen's Kappa一致性分析、Spearman秩相关分析及多变量逻辑回归。
### 研究人群与人口学特征
研究共招募245名发热患者，其中女性156名（63.7%），男性89名（36.3%）；年龄介于15至36岁，以15-25岁为主（147名，60%）。职业方面，学生最多（90名），其次为自雇人士（76名）、卫生工作者（46名）、公务员（19名）和农民（14名）。婚姻状况上，单身160名，已婚85名。来自翁多州的参与者最多（108名），其次为贝努埃州（74名）、奥孙州（32名）和高原州（31名）；农村与城市分布分别为73名和172名。该人口学特征显示女性、学生和单身人群参与率较高，这一分布可能影响结果的外推性。
### MPXV血清阳性率
采用两种阈值方法估计血清阳性率。人为的3SDV法以均值+3标准差计算截断值：A35R的MFI截断值为244.11，A29L为254.66，由此得出A35R和A29L的血清阳性率分别为47.4%和40.4%。基于R的SeroNIST框架通过概率建模得出A35R血清阳性率为30.51%（95%不确定性区间：25.16–35.77%），A29L为21.17%（95%不确定性区间：16.75–25.65%）。此外，有62名参与者（25.31%）对两种抗原均呈反应性，54名仅对A35R反应，37名仅对A29L反应（见图3b）。Cohen's Kappa系数κ=0.25（p=0.00008）提示两种抗原结果的一致性属于“一般”水平，Spearman相关系数ρ=0.329（p=1.34×10
?7）表明二者呈弱至中度正相关，说明A35R和A29L抗体反应既有重叠又存在差异。
### 决定MPXV血清阳性的因素分析
双变量分析显示，居住州与A35R（p=2.353e-09）和A29L（p=0.002）血清阳性均显著相关；婚姻状态与A35R显著相关（p=0.0129）；性别（p=0.023）、婚姻状态（p=0.026）和职业（p=0.0141）仅与A29L血清阳性显著相关。多变量逻辑回归中，对于A35R，各变量均无显著关联，但翁多州参与者出现较高但不显著的血清阳性几率；对于A29L，男性（调整比值比AOR显著低于参考组）、卫生工作者和奥孙州参与者的血清阳性几率显著较低，而26-36岁年龄组呈较高但不显著的几率。这些结果表明，MPXV暴露风险在不同地区和社会人口学群体中分布不均，居住州是最稳定的影响因素。
讨论部分指出，本研究聚焦于年轻发热患者，排除了牛痘疫苗残留免疫的干扰，所观察到的抗体反应更可能源于自然感染暴露。A35R和A29L分别为胞外包裹病毒粒子蛋白和胞内成熟病毒粒子蛋白，二者联合检测可捕获更广谱的抗体反应，提高暴露识别的敏感性。与以往在一般人群或疫情队列中的研究相比，本研究以发热门诊患者为对象更具公共卫生哨点意义。研究中发现的血清阳性率与尼日利亚持续的MPXV传播相吻合，其中较高的A29L血清阳性风险与年龄、职业和地区差异可能反映了不同暴露途径。多变量回归中男性、卫生工作者和奥孙州参与者较低的几率，可能与本研究中男性样本较少、感染控制措施以及地区生态差异有关，需谨慎解读。阈值方法比较显示，SeroNIST框架较传统3SDV法更严格，能提供不确定性区间，但对控制样本数量和分布假设有一定依赖。
研究结论部分可总结如下：本研究证明尼日利亚四个州医疗机构就诊的发热患者中存在可测量的MPXV血清阳性率，使用A35R和A29L抗原识别出显著的暴露证据，支持将血清学监测整合进当前mpox监测系统。未来需开展涵盖暴露史和分子诊断的大规模纵向研究，以明确传播路径并量化尼日利亚真正的MPXV暴露负担。将Luminex免疫测定纳入发热患者的常规哨点监测，可提高疫情准备与应对能力，并为公共卫生干预和风险沟通提供依据。
