多维参考库助力复杂样品中胆汁酸的高分辨鉴定——整合离子迁移谱与液相色谱-串联质谱的新方法

《Sustainable Microbiology》：Unlocking the Bile Acid Universe: Advanced Workflows and a Multidimensional Library of 280 Unique Species

　　

摘要

微生物与胆汁酸密切相关，尤其在肠道中表现突出。肝脏从胆固醇合成初级胆汁酸，而肠道菌群将其转化为多种多样的次级形式，这些形式作为强效信号分子发挥作用。由于胆汁酸的变化与健康疾病越来越密切相关，准确测量肠道和循环系统中的胆汁酸至关重要。然而，胆汁酸分析评估具有挑战性，因为许多胆汁酸在液相色谱（LC）中共洗脱，在质谱（MS）中具有相同的前体质量，并产生相似的串联质谱（MS/MS）图谱。因此，传统的LC-MS/MS工作流程难以区分胆汁酸，这也促使引入了正交分离技术，如离子迁移谱（IMS）。本研究评估了粪便、血清和血浆中胆汁酸提取的最佳参数；比较了不同LC条件；并评估了电喷雾电离在不同极性下的性能。此外，我们引入了一个公开可用的多维参考库，包含280种独特胆汁酸的LC保留时间、IMS碰撞截面值以及准确的前体质量，其中包括未结合型、宿主结合型和微生物结合型胆汁酸（264种内源性和16种氘标记物种）。该多维库有助于在复杂样品中鉴定胆汁酸，从而更全面地探索其生物学功能及与疾病的关联。