MYC 调控的长非编码 RNA SNHG1 在肝细胞癌中通过甲状腺激素受体信号通路调控 S 期激酶相关蛋白 2 介导的 p21 蛋白稳定性

《International Journal of Biological Macromolecules》：MYC-regulated long non-coding RNA SNHG1 controls S-phase kinase-associated protein 2-mediated p21 protein stability under thyroid hormone receptor signaling in hepatocellular carcinoma

　　*SNHG1 在肝细胞癌中频繁上调，并与侵袭性HCC特征相关。**TRβ 信号通路抑制 MYC 表达及 MYC 关联的 SNHG1 调控。**SNHG1 通过 miR-340-5p 相关的调控机制增强 SKP2 mRNA 稳定性。**SNHG1 促进 SKP2 依赖的 p21 泛素化与降解。**SNHG1 的恢复可部分逆转 TRβ 介导的体内肿瘤抑制作用。*## 引言肝细胞癌（HCC）由于高复发率和晚期治疗选择有限，仍然是全球癌症相关死亡的主要原因之一 [1]、[2]。尽管导致肝细胞癌变性的遗传改变已得到广泛表征，但将上游致癌信号与细胞周期调控联系起来的调控网络仍未能完全阐明。明确这些调控连接对于理解肿瘤进展和发现新的治疗靶点至关重要。长链非编码RNA（lncRNA）已成为HCC进展的关键调控因子。在这些因子中，小核RNA宿主基因1（SNHG1）已 consistently 被鉴定为HCC中的致癌性lncRNA [3]。SNHG1 在肿瘤中频繁上调，与侵袭性临床特征和不良预后相关 [4]。功能研究表明，SNHG1 通过调控p53信号通路、ceRNA网络和细胞周期程序来促进肿瘤增殖和侵袭 [5]、[6]、[7]、[8]。SNHG1 也被报道主要通过转录或RNA介导机制影响CDKN1A（p21）表达 [9]、[10]。然而，SNHG1 是否通过转录后机制（特别是通过调节蛋白稳定性）来调控p21仍然未知。鉴于p21水平通常由泛素介导的降解而非单纯转录来控制 [11]、[12]，SNHG1 是否通过调控p21蛋白周转来促进HCC进展仍然不清楚。此外，HCC中控制SNHG1 表达的上游调控机制仍未明确。S期激酶相关蛋白2（SKP2）是HCC细胞周期进展的另一个关键调控因子。作为SCF E3泛素连接酶复合物的组成成分，SKP2促进多种肿瘤抑制因子（包括p21、p27和FOXO1）的降解 [13]、[14]、[15]、[16]。SKP2表达升高与HCC增殖增加和不良预后相关 [13]、[17]。在这些底物中，p21因其限制G1/S转换的核心作用而尤为重要 [18]。然而，以SNHG1为代表的致癌性lncRNA是否调控这条泛素依赖的蛋白稳定性通路仍不清楚。特别是，SNHG1 是否调控HCC中SKP2依赖的p21蛋白周转尚未明确。MYC是HCC中的主要致癌驱动因子，也是增殖相关转录程序的核心调控因子 [19]、[20]、[21]。MYC还调控非编码RNA表达，提示其可能作为上游信号通路与致癌性lncRNA网络之间的调控中介。然而，MYC是否在HCC中参与SNHG1 依赖的蛋白稳定性通路调控仍不清楚。甲状腺激素（TH）信号通路已成为HCC中重要的肿瘤抑制通路。甲状腺激素通过其核受体TRα和TRβ调控分化、代谢和增殖，且TH/TR信号通路的失调与肝脏肿瘤发生相关 [22]、[23]。流行病学研究进一步将甲状腺功能减退与HCC风险增加相关联 [24]，而实验研究则表明T3通过诱导肝细胞分化、代谢重编程和抑制恶性表型来抑制肿瘤进展 [25]。TH/TR信号通路还被发现可调控细胞周期调节因子和非编码RNA，提示其对致癌调控网络具有协调控制作用 [26]、[27]、[28]。然而，TH/TR信号通路是否通过抑制致癌性lncRNA介导的蛋白稳定性网络来抑制HCC仍了解甚少。本研究探讨了甲状腺激素信号通路是否通过破坏MYC–SNHG1–SKP2调控轴来抑制HCC进展。我们将SNHG1 鉴定为甲状腺激素抑制的致癌性lncRNA，并证明TH/TR信号通路抑制MYC表达，进而降低SNHG1 表达。在机制上，我们表明SNHG1 通过调控SKP2表达和控制p21蛋白稳定性（而非仅通过CDKN1A转录）来促进HCC进展。综合以上发现，我们定义了一条TH/MYC/SNHG1/SKP2/p21信号级联，将内分泌调控与泛素介导的细胞周期控制联系起来。这些结果揭示了一个内分泌–lncRNA–蛋白稳定性调控网络，该网络参与肝细胞癌的进展。## 研究片段### 细胞培养与T3去除人肝癌细胞系J7（由台湾大学杨陈士博士提供）[29]、[30]、Mahlavu、SK-Hep1和HepG2（美国标准培养物收藏中心）以及Huh7（由台湾三军总医院谢泰佑博士提供）均在含有10%胎牛血清（FBS；EMD Millipore）、l-谷氨酰胺、1%青霉素/链霉素（PS）和非必需氨基酸（NEAAs）的DMEM培养基（Thermo Fisher Scientific, Inc.）中常规维持培养。为制备T3去除的FBS### 鉴定 SNHG1 为与HCC进展相关的T3/TR调控lncRNA为鉴定可能参与甲状腺激素受体（TR）介导的肝细胞癌（HCC）肿瘤抑制的lncRNA，我们对经T3处理的HepG2-TRα细胞进行了整合性转录组学分析，并将结果与配对HCC肿瘤组织及邻近非肿瘤肝脏组织中的lncRNA表达谱进行比较。该策略旨在鉴定被TR信号通路负调控同时又在HCC进展中上调的lncRNA。### 讨论在本研究中，我们将SNHG1 鉴定为一种甲状腺激素调控的致癌性lncRNA，它通过调节SKP2依赖的p21蛋白稳定性来促进肝细胞癌进展。我们的数据支持一个调控级联：TH/TRβ信号通路抑制MYC表达，导致SNHG1 表达降低、SKP2水平下降、p21蛋白稳定化以及肿瘤进展受阻。综合以上发现，支持了一条TH/TRβ–MYC–SNHG1–SKP2–p21调控轴，将内分泌调控与泛素介导的细胞周期控制联系起来。### CRediT作者贡献声明**Chih-Jung Chen：** 撰写–初稿、可视化、方法学、调查、形式分析、数据整理、概念设计。**Yang-Hsiang Lin：** 方法学、调查。**Wei-Chieh Huang：** 方法学、调查。**Chia-Hsing Shen：** 方法学、调查。**Chun-I Wang：** 方法学、调查。**Chau-Ting Yeh：** 资源、方法学、调查、数据整理。**I-Ta Lu：** 撰写–审阅与编辑、监督、资源、资金获取、数据整理。**Kwang-Huei Lin：**### 写作过程中生成式AI和AI辅助技术的声明在本文准备过程中，作者使用OpenAI ChatGPT协助进行语言编辑、修改后文本的组织以及清晰度和可读性的提升。在使用该工具后，作者对内容进行了必要的审阅和编辑，并对已发表文章的内容承担全部责任。### 资金支持声明本研究由台湾长庚纪念医院（CMRPD1L0111、CMRPD1M0361~3）、国家科技委员会（112-2326-B-039-002-MY3 和 NSTC 115-2311-B-039-001）以及台湾中国医药大学（CMU113-S-38、CMU114-S-26 和 CMU114-SR-96）的资助支持。## 利益冲突声明作者声明不存在可能影响本研究所报道工作的竞争性经济利益或个人关系。Chih-Jung Chen | Yang-Hsiang Lin | Wei-Chieh Huang | Chia-Hsing Shen | Chun-I Wang | Chau-Ting Yeh | I-Ta Lu | Kwang-Huei Lin | Hsiang-Cheng Chi