《Sleep Medicine》：Candidate Biomarkers in Narcolepsy in H1N1-Vaccinated Cohorts: A Proteomic and Transcriptomic Study
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•血清蛋白质组学提示了H1N1疫苗接种后嗜睡症患者中的候选生物标志物。•在瑞典和芬兰NT1队列中分析了276种蛋白质。•六种蛋白质在两个队列中均显示出重叠的差异表达。•UNC5C在蛋白质水平和转录组水平上均得到验证。•ILKAP水平降低可区分疫苗接种的嗜睡症患者与对照组。引言
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血清蛋白质组学提示了H1N1疫苗接种后嗜睡症患者中的候选生物标志物。
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在瑞典和芬兰NT1队列中分析了276种蛋白质。
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六种蛋白质在两个队列中均显示出重叠的差异表达。
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UNC5C在蛋白质水平和转录组水平上均得到验证。
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ILKAP水平降低可区分疫苗接种的嗜睡症患者与对照组。
引言
嗜睡症是一种致残性神经系统疾病，其特征为快速眼动（REM）睡眠失调、日间过度嗜睡、猝倒、睡眠瘫痪、入睡前幻觉、夜间睡眠片段化以及睡眠始动快速眼动（SOREM）期的出现，后者构成诊断标准之一（1）。该疾病还与认知障碍（2）及代谢改变相关（3, 4, 5）。在欧洲和北美，其患病率估计为每10万人中20–50例（6, 7），发病通常发生在青少年期，35岁左右出现较小的第二个高峰（8）。嗜睡症1型（NT1）是最常见的类型，其特征为猝倒和食欲素缺乏，后者由产生食欲素的神经元丧失所致，导致睡眠–觉醒周期不稳定（9）。相比之下，嗜睡症2型（NT2）缺乏猝倒和食欲素缺乏，目前对其了解较少。
2009–2010年甲型流感（H1N1）疫苗接种活动后，使用AS03佐剂的Pandemrix疫苗的国家观察到NT1发病率显著升高（10）。儿童和青少年的风险增加5–14倍，成人增加2–7倍（11）。Pandemrix于2009年9月在欧洲获批（12），在瑞典和芬兰的接种覆盖率尤其高，其中瑞典有61%的人口接受了疫苗接种（12）。一年后，这些国家的NT1发病率上升至每10万人年高达15例，而大流行前的发病率约为每10万人年1例（11）。与自发病例相比，Pandemrix相关NT1据报道具有独特的临床特征，包括疾病发作迅速和诊断延迟较短（13, 14）。近期研究已证实Pandemrix诱导的NT1与免疫过程和神经元存活相关基因存在关联（15）。
NT1的公认生物标志物包括SOREMPs（16）、HLA-DQB1*06:02等位基因（17）以及脑脊液（CSF）食欲素缺乏（18）。越来越多的证据支持自身免疫对疾病发病机制的贡献（19），且ATP受体P2Y11被认为参与NT1中的睡眠–觉醒调节（20）。此外，NT1、NT2与特发性嗜睡症之间日益增加的重叠（21）促使人们关注潜在的共同生物学机制，尽管这些疾病在何种程度上共享共同的病理生理或免疫途径仍不确定。
高通量蛋白质组学和转录组学技术的进步使得全面分析循环蛋白质和转录本成为可能，为发现生物标志物和深入了解嗜睡症病理生理学提供了新的机会（22）。其中一项技术是邻近延伸检测法（PEA），这是一种高灵敏度且高特异性的抗体检测方法，能够在小样本量中同时定量多种蛋白质。本研究旨在利用Olink Bioscience提供的PEA技术探索新的潜在血清生物标志物。虽然NT1主要影响中枢神经系统，但血清可能捕捉到下游的生物学变化，并为生物标志物发现提供了一个易于获取的来源。一个优先目标是探索Pandemrix相关病例与自发性嗜睡症患者之间蛋白质水平的差异，利用瑞典和芬兰NT1队列中包含Pandemrix疫苗接种状态信息这一优势。
章节摘要
嗜睡症队列
嗜睡症病例来自两个独立队列：用于主要分析的瑞典队列和作为外部验证样本的芬兰队列。NT1的诊断依据标准国际诊断标准，基于整体临床评估以及客观睡眠检测及/或脑脊液低食欲素-1缺乏（<110 pg>
人口学数据
瑞典、芬兰和转录组队列的人口学特征总结见表1。瑞典队列包括39名NT1患者和48名健康对照；除一名患者外，所有患者均有猝倒症状，32名HLA-DQB1*06:02阳性，18名患有疫苗接种后两年内发病的Pandemrix相关NT1，20名患有特发性嗜睡症。芬兰队列包括38名NT1患者，其中26名患有疫苗接种后两年内发病的Pandemrix相关疾病。
讨论
本探索性研究利用瑞典患者-对照队列，通过分析三个Olink panel中的260种蛋白质，并在独立的芬兰队列中验证了154种蛋白质，探讨了NT1的蛋白质生物标志物。还利用目前唯一公开的人类嗜睡症数据集进行了转录组学分析。六种重叠蛋白质（UNC5C、VWC2、CPA2、HAGH、GFR-α-1和CLEC10A）在两个队列中患者与对照之间均显示出差异表达，其中UNC5C在
结论
总之，UNC5C是跨数据集最一致的候选生物标志物发现，提示了与神经发育和存活相关的通路。虽然未在跨队列中得到验证，但ADAM23和SCARB2分别在瑞典和芬兰队列中经多重检验校正后仍保持显著，指向其在突触连接和溶酶体完整性中的作用。其他蛋白质（VWC2、CPA2、HAGH、GFR-α-1和CLEC10A）提示了突触功能、氧化应激的参与
CRediT作者贡献声明
Muataz Lafta：撰写——审稿与编辑，撰写——初稿，可视化，验证，软件，项目管理，方法学，调查，形式分析，数据整理，概念构思。Helgi B. Schi?th：撰写——审稿与编辑，监督，资源，方法学，概念构思。Anne-Marie Landtblom：撰写——审稿与编辑，监督，资源，项目管理，方法学，数据整理，概念构思。Anne Huutoniemi：撰写——审稿与编辑，
数据可用性
本研究中生成或分析的所有数据均包含在本发表的文章及其补充信息文件中。
致谢：
我们衷心感谢参与本研究各个队列的所有参与者。
Muataz S. Lafta|Aleksandr V. Sokolov|Mattis Kitok|Shala G. Berntsson|Valter Niemel?|Anne Huutoniemi|Markku Partinen|Helgi B. Schi?th|Anne-Marie Landtblom
