脑脊液中食欲素-A放射性免疫分析的分析评估与方法比较：建立1型嗜睡症的临界值并探索其遗传和临床特征

《Sleep Medicine》：Analytical evaluation and method comparison of an orexin-A radioimmunoassay in cerebrospinal fluid: establishing a cut-off value for type 1 narcolepsy and exploring genetic and clinical characteristics

　　

• •
  一项自研的脑脊液（CSF）食欲素-A放射免疫分析法（RIA）已在临床上进行了评估。
• •
  NT1的153 pg/mL截断值显示出较高的诊断准确性。
• •
  9.7%的个体被识别为食欲素-A水平处于中间水平。
• •
  食欲素-A中间水平与HLA-DQB1*06:02相关联。
• •
  自研RIA测得的数值高于Phoenix Pharmaceuticals RIA。

章节摘要

食欲素与发作性睡病

食欲素（又称下丘脑分泌素）是一种主要在大脑外侧下丘脑产生的神经肽。它被加工为两种肽类——食欲素-A和食欲素-B，通过G蛋白偶联受体发挥作用[1]。食欲素在调节睡眠-觉醒周期、摄食行为、情绪反应、代谢以及自主神经系统和内分泌系统方面起着至关重要的作用。食欲素缺乏与发作性睡病之间的联系在其被发现后不久便已确立[2]、[3]。发作性睡病是一种……

研究目的

本研究旨在评估一种基于自研RIA的方法用于测量脑脊液（CSF）食欲素/下丘脑分泌素水平。研究还致力于确立1型发作性睡病（NT1）脑脊液食欲素-A的诊断截断值，并探究脑脊液食欲素-A水平与HLA基因型之间的关系。此外，对中间水平的脑脊液食欲素-A进行了分析，以探索潜在的病理机制。最后，将H1N1甲型流感疫苗Pandemrix接种（2009–2010）后的NT1和NT2病例进行了比较……

自研方法与Phoenix Pharmaceuticals放射免疫分析法的描述

自研RIA方法的应用如先前所述[18]。正如先前报道的，对于浓度为320 pg/mL和801 pg/mL的CSF样本，批内变异系数（CV）和批间变异系数均<6%。校准品、对照品和样本均以双份进行分析。

在对照组中，平均食欲素-A浓度为716 ± 146 pg/mL（Portelius等人，2014）。该检测的正常参考值为>400 pg/mL。低于50 pg/mL的浓度无法可靠地……

Sahlgrenska自研RIA方法与Phoenix Pharmaceuticals商业试剂盒的比较

选取了12个不同的CSF食欲素样本以及1个来自Phoenix试剂盒对照的样本，在Sahlgrenska自研RIA与Phoenix RIA试剂盒之间进行了检查和比较（表1）。样本#4至#8为个体CSF样本，而样本#9至#12由多例个体的CSF混合而成。样本的选择基于方法比较时可获得的材料。在将自研RIA与Phoenix RIA试剂盒进行比较时，样本被稀释至1:5。未进行测量……

脑脊液食欲素-A截断值的ROC曲线分析

进行了ROC曲线分析，以确定三种临床情况下脑脊液食欲素-A的最佳截断值。这些情况包括：(A) 多次睡眠潜伏期试验（MSLT）阳性结合有记录的猝倒症，对应ICSD-3的1型发作性睡病诊断标准（对照组73例，患者37例）；(B) 无MSLT数据的情况下有记录的猝倒症（对照组93例，患者70例）；(C) MSLT阳性但无记录的猝倒症（对照组111例，患者54例），见图2。最佳截断值……

讨论

本研究结果表明，自研的脑脊液食欲素-A水平测量方法可靠，且提供的食欲素-A浓度高于商业化的Phoenix Pharmaceuticals RIA试剂盒，该试剂盒在临床实验室中被广泛使用。我们的方法确定了NT1的截断值为153 pg/mL，比Phoenix Pharmaceuticals RIA试剂盒确立的标准截断值高出约38%。本研究进一步证实了……

局限性

本研究的横断面设计限制了建立因果关系的能力。样本量可能不足以定义可靠的食欲素-A诊断截断值。方法比较中还包含较少低浓度和中间浓度范围的样本。因此，观察到的两种检测之间的比例差异可能不代表接近诊断阈值的浓度。HLA-DQB1*06:02基因分型仅对165名受试者中的77名进行了检测……

结论

我们的研究结果证实，自研RIA方法用于测量脑脊液食欲素-A水平可以提供可靠的结果，具有高敏感性、特异性和重复性。该方法所得的食欲素-A浓度高于广泛使用的Phoenix Pharmaceuticals RIA试剂盒，并确立了NT1的诊断截断值为153 pg/mL，比商业试剂盒使用的标准截断值高出约38%。本研究进一步证实了HLA-DQB1*06:02与……之间的强相关性。

CRediT作者贡献声明

Sara ?keby：撰写——初稿、调查、形式化分析、数据整理。Johan Bjellvi：撰写——审阅与编辑。Tim Lyckenvik：撰写——审阅与编辑、形式化分析。G?sta Karlsson：监督、资源、方法学、调查、形式化分析。Maria S?rensen：资金获取、数据整理。Pontus Wasling：撰写——审阅与编辑、可视化、监督、资源、方法学、调查、资金获取、形式化分析、数据整理，……

数据可用性

本文的数据将在合理请求下与通讯作者共享。

利益冲突声明

HZ曾作为科学顾问委员会成员和/或顾问为AbbVie、Acumen、Alector、Alzinova、ALZPath、Amylyx、Annexon、Apellis、Artery Therapeutics、AZTherapies、Cognito Therapeutics、CogRx、Denali、Eisai、LabCorp、Merry Life、Nervgen、Novo Nordisk、Optoceutics、Passage Bio、Pinteon Therapeutics、Prothena、Red Abbey Labs、reMYND、Roche、Samumed、Siemens Healthineers、Triplet Therapeutics和Wave服务，曾接受Alzecure、BioArctic、Biogen、Cellectricon赞助的讲演……

Sara ?keby | Maria S?rensen | G?sta Karlsson | Tim Lyckenvik | Johan Bjellvi | Henrik Zetterberg | Kaj Blennow | Pontus Wasling