《Revista Argentina de Microbiología》：High prevalence of
Rickettsia felis in fleas from pets in central Argentina
编辑推荐：
摘要专业翻译
媒介传播疾病约占全球传染病的20%。近年来，蜱和某些跳蚤物种的影响日益加剧。本研究旨在调查阿根廷中部城市地区宠物（猫和犬）体表寄生虫中立克次体属（Rickettsia spp.）的存在及其种类鉴定。研究共分析了136只宠物（98只犬和38只猫），
摘要专业翻译
媒介传播疾病约占全球传染病的20%。近年来，蜱和某些跳蚤物种的影响日益加剧。本研究旨在调查阿根廷中部城市地区宠物（猫和犬）体表寄生虫中立克次体属（Rickettsia spp.）的存在及其种类鉴定。研究共分析了136只宠物（98只犬和38只猫），采集到309只体外寄生虫，包括150只成体蜱（48.5%）和159只跳蚤（51.5%）。所有蜱均鉴定为血红扇头蜱复合种（Rhipicephalus sanguineus sensu lato），所有跳蚤均鉴定为猫栉首蚤指名亚种（Ctenocephalides felis felis）。研究人员对144个体外寄生虫混合样本（59个跳蚤样本和85个蜱样本）进行了立克次体属特异性聚合酶链式反应（PCR）检测，靶向柠檬酸合酶基因（gltA）、外膜蛋白A基因（ompA）和外膜蛋白B基因（ompB）。所有蜱样本均未检出立克次体脱氧核糖核酸（DNA），而59个猫栉首蚤指名亚种混合样本中有21个（35.6%）检出gltA基因阳性。所有阳性样本经ompA和ompB基因测序确认与猫立克次体（Rickettsia felis）具有100%的一致性。最低感染率（MIR）为13.2%。系统发育分析显示，获得的序列与过渡群（TRG）中的猫立克次体聚类。研究结果扩展了猫立克次体在阿根廷已知的地理分布范围，并强调了在宠物跳蚤中进行立克次体监测对公共卫生的重要性。
论文解读
一、研究背景与研究意义
媒介传播疾病约占全球传染病的20%，近年来其发生率和影响显著上升。在南半球，这类疾病的传播主要与立克次体属（Rickettsia spp.）细菌相关。立克次体为革兰氏阴性、专性胞内寄生菌，目前包含32个物种，分为五个系统发育群：斑点热群（SFGI和SFGII）、斑疹伤寒群（TG）、加拿大群（CG）和贝利群（BG）。其中猫立克次体（Rickettsia felis）属于过渡群（TRG），是近年来备受关注的新兴病原体。
犬猫等宠物最常见的体外寄生虫包括犬栉首蚤（Ctenocephalides canis）、猫栉首蚤指名亚种（Ctenocephalides felis felis）、人蚤（Pulex irritans）以及血红扇头蜱复合种（Rhipicephalus sanguineus sensu lato）等。这些广泛分布且具泛嗜性的体外寄生虫可作为多种人畜共患病原体的传播媒介，包括多种立克次体病、巴尔通体病、埃立克体病、无形体病和腺鼠疫等。
在阿根廷，以往关于人兽共患病的研究主要集中于蚊媒和蜱媒病原体，跳蚤传播疾病近年来才开始受到科学关注。猫立克次体已在全球39种节肢动物中被检出，包括跳蚤、蜱、虱和蚊子等。猫栉首蚤指名亚种不仅是猫立克次体的主要传播媒介，还可能是其环境储存宿主。实验室研究已证明，猫立克次体可通过跨期传播和经卵传播在跳蚤种群中有效维持。然而，目前尚无证据表明存在参与其自然传播循环的脊椎动物宿主。
尽管猫立克次体在南美洲已在多个国家的栉首蚤属（Ctenocephalides spp.）跳蚤中被检出，包括秘鲁、智利、巴西和乌拉圭等，但仅有少数人类病例被报道，且尚未有确证的人类感染病例被持续报道。鉴于南美洲跳蚤种群中观察到的较高感染率，猫立克次体在自然条件下可能不具有显著的致病性，或者从节肢动物媒介向脊椎动物宿主传播并导致疾病的机制尚不明确且可能效率低下。
在此背景下，本研究旨在调查阿根廷中部城市地区宠物（猫和犬）体外寄生虫中立克次体属的存在及其种类鉴定，以丰富阿根廷立克次体流行病学知识，为公共卫生风险评估提供科学依据。
二、主要技术方法
研究人员于2019年10月至12月期间，在阿根廷国立罗萨里奥大学兽医学院教学医院（FCV-UNR）采集就诊宠物体表的跳蚤和蜱。该医院接收来自阿根廷中部地区多个省份（包括圣菲省、科尔多瓦省、布宜诺斯艾利斯省和恩特雷里奥斯省）各城市的动物。研究共涉及136只宠物（98只犬和38只猫），所有动物均来自城市地区，部分宠物可自由出入公共场所。体外寄生虫经形态学鉴定后，按同一动物同一物种进行混合分组（跳蚤每池1-6只，蜱每池1-3只）。研究采用特异性PCR扩增立克次体柠檬酸合酶基因（gltA，401 bp片段）进行初步筛查，阳性样本进一步扩增外膜蛋白A基因（ompA，530 bp片段）和外膜蛋白B基因（ompB，830 bp片段）。阳性PCR产物经纯化后进行Sanger测序，所得序列通过BLAST算法与GenBank数据库进行同源性比对，并基于ompB基因采用最大似然法（ML）构建系统发育树。
三、研究结果
宠物体外寄生虫感染情况。 在136只宠物中，猫仅被跳蚤寄生，而犬同时被跳蚤和蜱寄生。共采集到309只体外寄生虫，包括150只成体蜱（48.5%）和159只跳蚤（51.5%）。所有蜱均鉴定为血红扇头蜱复合种，其中69只雄性和81只雌性，68只标本部分或完全饱血。所有跳蚤均鉴定为猫栉首蚤指名亚种。在98只犬中，85只（86.7%）检出蜱寄生，37只（37.7%）检出跳蚤寄生；在38只猫中，28只（73.6%）检出跳蚤寄生。
立克次体分子检测结果。 研究人员共分析了144个体外寄生虫混合样本，包括59个跳蚤样本和85个蜱样本。所有蜱样本均未检出立克次体DNA，而59个猫栉首蚤指名亚种混合样本中有21个（35.6%）gltA基因阳性。所有gltA阳性样本的ompA和ompB基因PCR检测亦为阳性。这21个阳性样本中，10个来自犬，11个来自猫。最低感染率（MIR）为13.2%。
序列鉴定与系统发育分析。 ompA和ompB基因测序结果经BLASTn比对，确认与猫立克次体具有100%的一致性，几乎所有序列的E值均为0.0。基于ompB基因750 bp片段的系统发育分析显示，来自阿根廷中部四个省份（圣菲省、布宜诺斯艾利斯省、恩特雷里奥斯省和科尔多瓦省）的10条猫立克次体序列均聚类于过渡群（TRG）分支内，与已知猫立克次体参考序列形成单系群。
四、讨论与结论
本研究报告了阿根廷中部城市地区犬猫的猫栉首蚤指名亚种中存在猫立克次体，检测范围覆盖了所有采样的省份，包括圣菲省、布宜诺斯艾利斯省、恩特雷里奥斯省和科尔多瓦省。部分检出城市如圣菲省的罗萨里奥市具有较高的人口密度，提示公共卫生风险值得关注。
值得注意的是，本研究中所有蜱样本均未检出立克次体DNA，这与先前报道的血红扇头蜱复合种中马赛立克次体（Rickettsia massiliae）流行率在2%至20%之间的研究结果形成对比。这一差异可能归因于当地蜱种群中病原体流行率相对较低，提示需要更大样本量或持续监测才能在该特定区域检出其存在。
猫立克次体在猫栉首蚤指名亚种混合样本中的检出率为35.6%（21/59），最低感染率为13.2%。这一结果低于Nava等人报道的阿根廷首次记录猫立克次体时的22.6%，也低于Venzal等人报道的41%流行率。巴西的流行率约为38%，智利的一项研究显示流行率高达70%。根据Brown和Macaluso的综述，在至少分析100只猫栉首蚤指名亚种的研究中，猫立克次体流行率在0.3%至75%之间，不同地区差异显著。
关于猫立克次体对人类疾病的影响仍存在争议。在美国，跳蚤传播立克次体病的暴发地区，猫立克次体的流行率高于斑疹伤寒立克次体（Rickettsia typhi）。然而，猫立克次体和斑疹伤寒立克次体感染的临床表现几乎无法区分，且血清学分析因立克次体物种间的交叉反应而存在重大局限性。迄今为止，猫立克次体尚未从人类体内分离培养成功，即使在重症病例中也是如此。在非洲，猫立克次体已被报道为不明原因发热的新兴病因，约15%的发热患者血液中可通过PCR检出猫立克次体DNA。但在无发热个体的皮肤拭子中检出该病原体，引发了关于分子分析前皮肤表面微生物污染导致假阳性结果的担忧。
在南美洲，尽管猫立克次体已在多个国家的跳蚤中被检出，但尚无持续确证的人类病例报道。考虑到南美洲跳蚤种群中观察到的较高感染率，猫立克次体在自然条件下可能不具有显著致病性，或者从节肢动物媒介向脊椎动物宿主传播并导致疾病的机制尚不明确且可能效率低下。
阿根廷多项从野生动物采集的跳蚤中调查病原体感染的研究表明，猫立克次体是跳蚤中最常检出的病原体，也已在其他跳蚤物种如啮齿动物的Polygenis (Polygenis) axius axius中被检出。这一发现提示猫立克次体可能通过不同宿主在自然界中维持传播循环。
尽管猫立克次体在南美洲尚未被明确确定为常见的人类病原体，但其存在于频繁寄生宠物且与人类密切接触的跳蚤中，引发了重要的公共卫生关注。加强监测和进一步研究对于阐明其媒介能力和传播效能，以及评估其对该地区人类健康的潜在影响至关重要。
