《Neurochemistry International》：Cell-permeable PEP-1-SH3GL3 protects neurons from ischemic damage by reducing oxidative stress and pro-inflammatory cytokine release in the gerbil hippocampus
编辑推荐：
•沙鼠海马CA1区在缺血后12小时和7天SH3GL3免疫反应呈双相性升高。•合成的可透过细胞的PEP-1-SH3GL3对过氧化氢诱导的氧化应激具有神经保护作用。•PEP-1-SH3GL3通过减少促炎细胞因子的释放来减轻缺血引起的海马神经元损伤。引言海马的脑缺血性损伤是由局灶性
- •
沙鼠海马CA1区在缺血后12小时和7天SH3GL3免疫反应呈双相性升高。
- •
合成的可透过细胞的PEP-1-SH3GL3对过氧化氢诱导的氧化应激具有神经保护作用。
- •
PEP-1-SH3GL3通过减少促炎细胞因子的释放来减轻缺血引起的海马神经元损伤。
引言
海马的脑缺血性损伤是由局灶性或全脑血流量减少引起的，是导致认知障碍的主要原因之一（Hayes等人，2024年）。蒙古沙鼠（Meriones unguiculatus）是研究缺血性脑损伤最常用的动物之一，因为其Willis环（即脑部底部的动脉环）中的后交通动脉发育不完全（Du等人，2018年）。在沙鼠中，颈总动脉的中断会导致缺血手术后3至4天海马CA1区神经元选择性死亡，进而引起认知障碍（Ishibashi等人，2006年；Kwon等人，2023年；Kondo等人，2026年）。缺血性损伤后CA1区神经元死亡有多种机制被提出，包括兴奋性毒性、氧化应激和炎症（Lochhead等人，2024年；Akhtar等人，2026年；Jiang等人，2026年）。
大脑具有独特的结构，如血脑屏障，它能保护大脑免受毒素和病原体的侵害，同时维持氧气和葡萄糖的供应（Ju等人，2026年）。为了穿越生物膜，需要特定的肽序列（包含疏水性富含色氨酸结构域、间隔基和亲水性富含赖氨酸结构域）才能在体外和体内将蛋白质递送到细胞内（Kim等人，2026年）。在细胞穿透肽中，PEP-1肽可以将全长蛋白质以完全生物活性的形式递送到细胞内。在之前的研究中，我们证明PEP-1-载体蛋白质能够有效地递送到海马HT22细胞和沙鼠海马中（Hahn等人，2022a、2025年）。
Src同源3结构域（SH3）家族在进化上高度保守，由50个氨基酸组成。它通过与富含脯氨酸的配体结合参与蛋白质-蛋白质相互作用（Pawson和Gish，1992年），并在各种细胞事件（包括信号转导和细胞骨架重组）中发挥关键作用（Scaife和Margolis，1997年；Kaneko等人，2008年）。SH3结构域GRB2样基因家族包含三个成员：SH3结构域GRB2样1（SH3GL1）、SH3GL2和SH3GL3。其中，SH3GL3又称endophilin A3或extra eleven nineteen（EEN）-B2，在人类大脑和睾丸中表达水平较高（Sittler等人，1998年）。值得注意的是，SH3GL3在大脑皮层和海马中的表达量最高（Sittler等人，1998年）。此外，SH3GL3通过与Huntingtin蛋白相互作用调节神经分化，并与脑源性神经营养因子（BDNF）的上调密切相关（Sari，2011年）。在乳腺癌中，SH3GL2和SH3GL3表达升高与预后改善相关（Mehta等人，2025年），而SH3GL3的下调则显著增加胶质母细胞瘤细胞中的不良预后（Kim等人，2024年）。在肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）引起的肺部感染中，使用重组SH3GL3蛋白治疗可降低促炎细胞因子的表达（Yueqing等人，2025年）。尽管已有证据支持SH3GL3在缺血后细胞损伤中的作用，但其参与机制仅在心梗/再灌注后的脊髓（Li等人，2019年）和大脑中动脉阻塞后的脑组织中进行了研究（Roshan等人，2023年）。因此，在本研究中，我们考察了缺血后海马CA1区SH3GL3免疫反应结构的时相形态学分布，并研究了PEP-1-SH3GL3对HT22细胞氧化应激的作用以及对沙鼠缺血性损伤的影响。
章节摘要
暂时性前脑缺血模型的建立
雄性蒙古沙鼠购自日本SLC株式会社（日本静冈县），动物饲养按照《实验动物饲养和使用指南》（第8版，2011年）进行。所有动物实验程序均经首尔国立大学机构动物护理和使用委员会批准。沙鼠（6月龄）使用5%异氟烷（Baxter，美国伊利诺伊州迪尔菲尔德）进行麻醉，手术过程中使用2.5%异氟烷维持麻醉。体温
缺血后沙鼠海马CA1区SH3GL3的表达
在对照组中，海马CA1区检测到SH3GL3免疫反应结构，尤其是在锥体细胞层。缺血后两天SH3GL3免疫反应结构的分布相似，但SH3GL3免疫反应逐渐增加，在缺血/再灌注后12小时达到峰值，然后回落到对照水平。缺血/再灌注后4至7天，在齿状回外丛状层和齿状回内丛状层观察到SH3GL3免疫反应结构。值得注意的是，大量
讨论
SH3GL3，又称endophilin A3，是含SH3结构域蛋白质家族的成员（Kaneko等人，2008年），SH3结构域在各种生物过程中发挥重要作用（Scaife和Margolis，1997年；Kaneko等人，2008年）。值得注意的是，SH3GL3在人类大脑中高表达，在大脑皮层和海马中表达水平最高（Sittler等人，1998年）。在本研究中，我们观察到
CRediT作者贡献声明
Woosuk Kim：撰写—初稿，验证，软件，调查，形式分析，数据整理，概念化。Hyun Jung Kwon：撰写—初稿，验证，形式分析，数据整理，概念化。Kyu Ri Hahn：软件，方法论，形式分析，数据整理。Heekyeong Go：形式分析，数据整理，概念化。Dae Young Yoo：撰写—审阅与编辑，验证，方法论。Dae Won Kim：撰写—审阅与编辑，验证，软件，数据
伦理声明
本研究按照ARRIVE（动物研究：体内实验报告）指南进行。本研究经首尔国立大学机构动物护理和使用委员会批准。
资金来源
本工作得到了韩国国家研究基金会（NRF）（由韩国政府（MSIT）资助）的资助（RS-2023-00239377，资助对象为Seung Myung Moon）。
Woosuk Kim|Hyun Jung Kwon|Kyu Ri Hahn|Heekyeong Go|Dae Young Yoo|Dae Won Kim|Jaekwan Lim|Seung Myung Moon
