CD161在原发性胆汁性胆管炎中的表达及临床特征

《Immunology Letters》：Expression and clinical characteristics of CD161 in primary biliary cholangitis

　　# 摘要- **首次**在外周血血清中检测到可溶性CD161（sCD161）。- PBC患者的血清sCD161水平显著升高。- sCD161的表达与疾病严重程度之间存在相关性。- 血清sCD161在PBC的诊断和预后评估中显示出应用前景。## 引言原发性胆汁性胆管炎（PBC）是一种慢性自身免疫性胆汁淤积性肝病，患者常表现为疲劳和皮肤瘙痒，并可进展为肝纤维化、肝硬化甚至肝衰竭[1]。血清抗线粒体抗体（AMAs）是PBC重要的血清学标志物，但其水平并不反映疾病严重程度或进展[2]。肝活检仍是评估组织学分期和疾病严重程度的重要手段，这凸显了对有效无创生物标志物的迫切需求，以辅助PBC的诊断和疾病评估。PBC被认为源于遗传因素与环境因素的相互作用，抗原表位暴露和自身免疫耐受失衡进一步促进了疾病发展[3,4]。尽管PBC的确切发病机制尚未完全阐明，但越来越多的证据表明免疫失调——尤其是异常的T细胞反应——在疾病进展中起着关键作用。PBC患者的胆管可见明显的活化CD4?和CD8? T淋巴细胞浸润，其中包括Th1型和Th17型细胞[5]。共刺激分子和共抑制分子是抗原呈递细胞（APC）介导的T细胞反应——包括T细胞活化和增殖——的重要调节因子。因此，深入了解PBC所涉及的免疫调节机制，可能进一步揭示其发病机制，并为发现潜在的临床生物标志物提供新线索。CD161（又称NKRP1A和KLRB1）是一种免疫共刺激分子，最初被鉴定为自然杀伤（NK）细胞的标志物，也在T细胞亚群及其他免疫细胞上表达[6]。PBC患者外周血中CD161的异常表达也已被观察到[7]。Jang等人对PBC患者的外周血单核细胞进行了单细胞质谱细胞术分析，发现表达CD161的CD8? T细胞亚群在数量上显著少于健康对照（HCs）。此外，PBC患者循环中黏膜相关不变性T细胞（MAIT细胞）明显减少，而特征性高表达CD161的MAIT细胞则在肝脏中聚集[8,9,10]。这些观察提示，表达CD161的T细胞群体的改变可能与PBC中的免疫失调有关。然而，PBC患者不同外周T细胞亚群中CD161的表达模式尚未完全阐明。明确这些免疫细胞亚群中CD161的表达情况，有助于进一步理解PBC相关的免疫失调。值得注意的是，许多共刺激分子同时存在膜结合形式和可溶性形式，包括LAG-3、TIM-3和PD-1[11]。其可溶性形式可能具有与膜结合形式不同的免疫学特性和临床特性。然而，PBC中可溶性CD161（sCD161）的存在及其临床相关性尚未经过表征。本研究检测了PBC患者的血清sCD161水平，以及外周免疫细胞亚群上膜结合型CD161（mCD161）的表达。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）测定血清sCD161水平，通过流式细胞术评估mCD161表达。我们进一步分析了sCD161和mCD161与PBC患者临床特征的相关性，并探讨了可溶性与膜结合型CD161发生相互相反改变的可能机制。此外，我们还在PBC小鼠模型的肝脏和脾脏中评估了免疫细胞亚群上的CD161表达。总体而言，本研究旨在表征PBC中可溶性与膜结合型CD161的改变，并评估sCD161作为PBC无创生物标志物的潜在价值。## 部分片段### 患者与健康受试者本研究在南通大学附属常熟医院开展，并获机构人类研究伦理委员会批准（2023-KY-ZX35）。研究于2023年1月至2024年8月间招募了120名参与者，包括68例PBC患者和52名健康对照（HCs）。PBC患者的纳入与排除标准此前已描述[12]。### 实验室指标检测采用常规生化方法测定PBC患者与健康对照的血清生化指标。### 血清和外周血中的CD161表达水平本研究共纳入68例PBC患者、30例PHBC患者以及52例年龄和性别匹配的健康对照（HCs）。表1汇总了健康对照组与PBC组之间差异有统计学意义的实验室参数，表2展示了PBC队列的临床特征。为表征PBC中CD161的表达，我们在三组受试者中测定了血清sCD161水平。同时，采用流式细胞术检测了PBC患者和健康对照外周血单核细胞上mCD161的表达（图1A）。血清……### 讨论准确的诊断和及时的治疗对于改善PBC患者的临床预后至关重要。尽管AMA仍是PBC诊断的关键血清学标志物，但其水平无法可靠反映疾病严重程度或进展，这凸显了寻找额外无创生物标志物的必要性[17]。在本研究中，我们调查了sCD161的潜在临床价值，并表征了PBC中可溶性与膜结合型CD161的改变。为评估sCD161升高是否……### 利益冲突声明作者声明无利益冲突。### 致谢本研究受国家自然科学基金资助[82270556]；苏州市科技发展计划[SKY2022129、SKYD2023059]；常熟市卫生健康青年人才"国培导师"计划[CSQNGG202302]；苏州市重大疾病的临床试验[DTZXYJ202416]；苏州市重点临床疾病的规划[LCZX202125]；南通大学临床医学专项研究基金[2023JQ013]；苏州科教兴卫工程等资助。### CRediT作者贡献声明**Ying Liu**：撰写初稿、可视化呈现。**Qiange Zhang**：验证、方法学、调查研究。**Guoxin Xu**：方法学、调查研究。**Haixia Ma**：验证。**Yuehong Zhu**：资源、数据整理。**Xiaoli Xiang**：形式化分析。**Senlin Xue**：方法学。**Cuie Cheng**：资源、调查研究。**Bin Wang**：资源、方法学。**Fenying Lu**：资源、调查研究。**Yanping Zhu**：数据整理。**Lei Cao**：撰写—审阅与编辑、指导、获取研究经费、数据整理。**Tingwang**……---Ying Liu | Qiange Zhang | Guoxin Xu | Haixia Ma | Yuehong Zhu | Xiaoli Xiang | Senlin Xue | Cuie Cheng | Bin Wang | Fenying Lu | Yanping Zhu | Lei Cao | Tingwang Jiang