中枢神经系统氧中毒(CNS-OT)部分是由高氧暴露期间产生的过量活性氧(ROS)驱动的。在此,我们开发了一种体外筛选平台,使用胚胎大鼠海马神经元在高氧应激(1.34 ATA)条件下评估抗氧化候选物,并通过二氢吖啶(DHR)123 荧光成像和流式细胞术量化 ROS。神经元培养在整个测定过程中保持存活,抗βIII 微管蛋白染色效率约为 87%,与神经突起生长相关的活力为 88%。在测试的化合物中,15 分钟高氧暴露后,萝卜硫素和硫氧还蛋白使 ROS 阳性神经元的减少幅度最大,在 1 μM 浓度下分别减少了 53.3% 和 54.2%。黑种草素在 0.1 μM 时显示出最大的 ROS 产生减少,减少幅度约为 48%,而在 1 μM 时其效果减弱,表明在测试浓度范围内呈非单调反应。30 分钟高氧暴露后,所有化合物的保护效果均降低。药物联合治疗对 ROS 抑制有适度改善,减少幅度在 12.8% 到 17.3% 之间。这些发现表明,所提出的体外平台能够在受控高氧条件下可靠地区分抗氧化效率,并可作为 CNS 氧中毒神经保护治疗临床前筛选和优化的实用工具。