玻璃体腔内AAV.IVT18介导的RDH12基因增强治疗遗传性视网膜疾病临床前概念验证

《Stem Cell Research & Therapy》：AAV.IVT18-mediated RDH12 gene therapy restores retinal metabolism in Rdh12 knockout rats and patient-derived iPSC-retinal organoids

　　

摘要

目的

视黄醇脱氢酶 12 (RDH12) 的双等位基因变异会导致严重的遗传性视网膜疾病 (IRDs)，目前尚无可用的治疗方法。鉴于黄斑萎缩患者视网膜下递送存在的潜在风险，我们评估了玻璃体腔内 AAV 介导的 RDH12 基因增强。

方法

建立了 Rdh12 敲除大鼠模型和患者来源的 iPSC 视网膜类器官 (ROs)。通过测量all-trans 视黄醇水平来评估还原酶活性，并通过 ELISA 定量有毒醛类 4-羟基壬烯醛 (4-HNE) 的积累。治疗性 AAV.IVT18-hRDH12 通过大鼠玻璃体腔内注射和 ROs 转导进行递送。在大鼠模型治疗后的视网膜结构和功能进行了评估。

结果

Rdh12 敲除大鼠视网膜表现出all-trans 视黄醇产生减少和 4-HNE 蛋白加合物水平升高。患者来源的 ROs 出现了囊状结构变化，并显示视紫红质分布改变。AAV.IVT18-hRDH12 治疗恢复了两种模型中的 RDH12 表达。All-trans 视黄醇水平在敲除大鼠视网膜中增加约 11 倍，在患者来源的 ROs 中增加 83%，而两种模型中的 4-HNE 蛋白加合物水平均降低约 65%。AAV 治疗组和未治疗敲除大鼠之间的视网膜结构和视网膜电图反应没有差异。

结论

本研究为玻璃体腔内 AAV.IVT18 介导的 RDH12 基因增强提供了临床前概念验证。治疗增加了两种模型中的视黄醛还原酶活性并减少了 4-HNE 积累，支持对 RDH12 相关视网膜退行性变进行进一步评估。