《Theriogenology》：Repeated systemic β-NGF administration improves ejaculate characteristics in rams
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•全身性β-NGF增加了射精量和每次射精的精子总数。•它增强了射精精子的总活动力、前向活动力、快速活动力以及正常形态精子。•睾酮浓度未发生变化。•β-NGF给药后，这些变化持续约20天。引言在骆驼科动物中，精浆中存在一种排卵诱导因子（OIF），负责诱导排卵。该因子已被分离和纯
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全身性β-NGF增加了射精量和每次射精的精子总数。
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它增强了射精精子的总活动力、前向活动力、快速活动力以及正常形态精子。
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睾酮浓度未发生变化。
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β-NGF给药后，这些变化持续约20天。
引言
在骆驼科动物中，精浆中存在一种排卵诱导因子（OIF），负责诱导排卵。该因子已被分离和纯化[1]，并随后在大羊驼和羊驼中被鉴定为β-神经生长因子（β-NGF）[2,3]。在骆驼科动物中，交配后精浆中的β-NGF通过子宫内膜被吸收；交配过程中生殖黏膜的磨损可能促进其进入血液循环[4,5]，触发排卵前的LH激增，随后引发排卵[6]。此外，它还促进排卵前卵泡的血管化以及黄体形成早期阶段的黄体组织血管化[7]，并调节类固醇生成酶[8]。尽管β-NGF在中枢水平具有内分泌效应[9]，但其受体存在于卵巢卵泡和黄体中[10]，表明它也可能在局部发挥作用。
β-NGF在物种间高度保守[11]，并且也存在于公牛、马和公羊的精浆中，尽管其浓度远低于大羊驼或羊驼[12]。由于交配可以改变绵羊和牛的接受期以及排卵时间[13,14]，因此提出假设：在自发排卵动物中，精浆成分可能以与骆驼科动物中所述类似的方式影响雌性生殖生理[15,16]。支持这一假说的是，从大羊驼精浆中纯化的β-NGF可诱导牛分泌黄体生成素（LH）[16,17]，并增强母羊黄体活性[17]。此外，β-NGF促进从牛卵泡中分离的颗粒细胞的类固醇生成[18]。
在雄性中，对大羊驼和羊驼全身性施用纯化的β-NGF可诱导与雌性中观察到的相似的LH反应，随后睾酮分泌增加[1]。与此一致的是，β-NGF及其受体（TrKA和p75）已在公羊男性生殖道的多个组成部分中被鉴定出，包括睾丸、附睾、输精管壶腹、精囊、前列腺和球腺[19]，提示其在男性生殖功能中发挥作用。此外，β-NGF及其受体在公羊生殖细胞[19]和射精精子[20]中也被检测到。与这些发现一致的是，体外补充β-NGF可改善多种物种的精子功能，包括兔子[21]、金黄仓鼠[22]、牛[23]和大羊驼[24]。
实验研究进一步支持β-NGF在男性生殖中的作用。鼻内施用β-NGF可恢复衰老加速雄性小鼠的LH和睾酮浓度、性行为及生育力，并改善精子质量和数量[25]。在大鼠中，β-NGF在慢性应激下增强睾丸功能并改善精子运动学[26]。相比之下，对雄性大羊驼和羊驼静脉注射β-NGF可诱导LH显著增加，但睾酮浓度仅轻微增加[27]。然而，全身性施用β-NGF对公羊射精精子的影响仍未知。
因此，我们假设重复施用从大羊驼精浆中纯化的β-NGF会改变成年公羊从非繁殖季过渡到繁殖季期间射精特征和血清睾酮浓度。据此，本研究的目的是评估重复全身性β-NGF施用对成年公羊射精精子、阴囊周径和血清睾酮浓度的影响。
章节摘要
材料与方法
兽医学院动物使用伦理委员会批准了本研究（方案1506，exp 111900-000109-22）。
精液采集程序、阴囊周径和睾酮浓度
精液采集所需的电脉冲次数和循环睾酮浓度随时间变化（两者P < 0.001），而阴囊周径未发生变化。对于所有这些变量，处理效应以及处理与时间之间的交互作用均无显著性差异（表1）。睾酮在处理期和随访期的变化曲线如图1所示。
射精特征
两组精子浓度和射精量随时间的变化不同，如所示
讨论
据我们所知，这是首项表明重复全身性β-NGF施用可改变公羊射精特征时间曲线的研究。最明显的反应是在特定给药后时间点精子总数的短暂增加，而所评估的基于百分比的精子活动力、形态或膜功能指标均无变化。因此，这些发现提供了外源性β-NGF引起男性生殖反应的初步证据，同时也表明
结论
春季重复全身性施用β-NGF在特定给药后时间点短暂增加了每次射精的精子总数，而未改变活动力、形态正常或膜功能正常精子的百分比。这些变化未伴随循环睾酮或阴囊周径的可检测差异。其可重复性、潜在机制以及对精液保存和生育力的影响仍有待确定。
CRediT作者贡献声明
Javier Meilán：写作 – 审阅与编辑，写作 – 初稿撰写，可视化，监督，调查，形式化分析，数据管理，概念化。Federica Salomone：写作 – 审阅与编辑，调查，数据管理。Sebastián Castillo：写作 – 审阅与编辑，调查，数据管理。Marcelo Ratto：写作 – 审阅与编辑，写作 – 初稿撰写，资源，资金获取，概念化。Rodolfo Ungerfeld：写作 – 审阅与编辑，写作 –
数据可用性声明
本研究生成或分析的数据集可向通讯作者提出合理请求后获取。
致谢
作者感谢Victoria Fernandez照料动物，感谢Patricia Silveira在实验室工作（包括睾酮测量）中提供的帮助，感谢Fabio Cardoso、María Jesús Frisch、Norberto Villa和Alejandro Gómez在数据收集中提供的帮助。
Javier Meilán|Federica Salomone|Sebastián Castillo|Marcelo Ratto|Rodolfo Ungerfeld
