《Immunity & Ageing》：Acute viral respiratory infections are not associated with an increased IMMune Age indeX (IMMAX) four weeks after infection: a prospective observational cohort study
编辑推荐：
背景：决定个体免疫衰老发生速度的因素尚未完全阐明。贯穿生命周期的病毒感染被认为是相关调节因素。潜伏性慢性感染（如巨细胞病毒（CMV）或EB病毒（EBV））占据免疫空间，并与以生物标志物测量的免疫学衰老加速相关。免疫年龄指数（IMMAX）是一种基于流式细胞术、经
背景：决定个体免疫衰老发生速度的因素尚未完全阐明。贯穿生命周期的病毒感染被认为是相关调节因素。潜伏性慢性感染（如巨细胞病毒（CMV）或EB病毒（EBV））占据免疫空间，并与以生物标志物测量的免疫学衰老加速相关。免疫年龄指数（IMMAX）是一种基于流式细胞术、经验证的IMM-AGE指标替代标志物。目前尚不清楚西欧地区常见的轻至中度社区获得性病毒感染是否会引起评估个体免疫学年龄的生物标志物升高。因此，本研究检测了病毒感染前至感染后IMMAX的变化，同时探索了呼吸道疾病急性期IMMAX的反应。方法：开展了一项前瞻性观察性研究，纳入77名21至65岁的参与者。基线评估（t0）包括记录人口学数据并计算IMMAX。在出现呼吸道感染症状时，分别于症状出现后72小时内（t1）、1周后（t2）和4周后（t3）采集血样进行IMMAX随访评估。在t1时进行病毒多重PCR以鉴定致病病原体。此外，保持临床健康超过6个月的参与者接受第二次IMMAX评估（t4），并作为对照组。主要结局指标为t0至t3期间IMMAX的变化，同时采用线性混合效应模型评估时间和病因依赖性差异。结果：26名参与者发生呼吸道感染，包括人鼻病毒（n=9）、SARS-CoV-2（n=9）、副流感病毒（n=1）和7例PCR阴性呼吸道疾病。在确诊病毒感染队列（n=19）中，IMMAX值在感染早期急性阶段短暂升高，恢复后不再观察到该变化。然而，对所有急性呼吸道疾病病例（n=26）的亚组分析揭示了一个显著差异：SARS-CoV-2感染参与者在t1时IMMAX值显著高于基线，而在t3时低于基线，且全部9名参与者在t3时均已临床康复。结论：本观察性队列研究前瞻性地调查了社区获得性感染伴随免疫年龄测定。轻度至中度病毒感染并完全康复后，无论潜在病因如何，均与感染后4周IMMAX评分升高无关。然而，急性SARS-CoV-2感染导致全身免疫细胞比例的明显改变，凸显了其免疫学需求。
论文解读：免疫衰老（immunosenescence）是指免疫系统随年龄增长而发生的结构和功能退化，表现为初始T细胞减少、记忆T细胞增加、T细胞受体（TCR）多样性下降，以及衰老细胞通过衰老相关分泌表型（SASP）驱动低度全身性炎症（即炎症老化）。这一过程与心血管代谢疾病、神经退行性疾病及肿瘤风险增加相关，同时损害宿主防御功能，导致感染易感性和严重程度升高。病毒感染是终身累积的免疫暴露之一，但急性病毒感染是否加速免疫衰老尚不明确。相比之下，潜伏性慢性感染如巨细胞病毒（CMV）已被证实可通过记忆T细胞膨胀、CD8+T细胞耗竭等机制显著塑造免疫衰老表型。为量化免疫学年龄，研究者开发了基于流式细胞术的免疫年龄指数（IMMAX），该指标基于NK/T细胞比值、CD4+/CD8+T细胞比值、CD4+和CD8+记忆/初始T细胞比值及CD28?CD8+T细胞比例五个参数，在德国工作人群队列中建立并验证。既往研究提示急性COVID-19可能引起免疫年龄加速，但轻中度社区获得性呼吸道病毒感染后IMMAX是否持续改变仍属未知。为此，研究人员开展了一项前瞻性观察性队列研究，旨在检验急性病毒性呼吸道感染前后IMMAX的变化，并探索感染急性期及不同病原体之间的差异。
研究人员于2023年12月至2025年9月期间招募了77名21至65岁的参与者，按年龄分层确保IMMAX范围代表性。基线（t0）采集人口学数据和血样计算IMMAX，并排除近4周内有感染或疫苗接种者以及慢性炎症、恶性肿瘤或影响免疫功能的用药者。参与者若出现呼吸道感染症状，需在72小时内联系研究团队，随后在急性期（t1）、1周（t2）和4周（t3）随访采血，同时于t1采集鼻咽拭子进行病毒多重PCR检测。保持6个月无感染症状者作为健康对照组，于t4再次评估IMMAX。主要结局为t0至t3的IMMAX变化，采用线性混合效应模型和Dunnett多重比较检验进行统计分析。样本量预先基于效应量f=0.3、把握度0.8计算，考虑约75%脱落率后计划招募至少70人。流式细胞术采用七色抗体组合直接免疫标记全血，经溶血、洗涤后获取淋巴细胞，依据已发表的设门策略计算相对细胞频率并代入IMMAX公式换算为等值寿命年（EYOL）和年龄差。
研究期间共有27名参与者报告呼吸道感染，其中1人因确诊金黄色葡萄球菌感染被排除，最终26人构成急性呼吸道疾病队列。PCR检测确认19例病毒感染，包括人鼻病毒（n=9）、SARS-CoV-2（n=9）和副流感病毒（n=1），另7例为PCR阴性呼吸道疾病。健康对照组8人完成6个月随访。基线时全部34名参与者的IMMAX与实足年龄显著相关（Spearman r=0.463，p=0.006），验证了指标的一致性。主要结局分析显示，确诊病毒感染队列中IMMAX从t0到t3的估算平均差为?0.014（95%CI ?0.037–0.009，调整后p=0.310），无显著变化。然而，混合效应模型检测到显著的时间效应，Dunnett事后比较显示t1时IMMAX较基线显著升高（平均差0.026，95%CI 0.002–0.050，调整后p=0.035），提示急性期存在一过性升高。按病原体分层的探索性亚组分析揭示了明显差异：SARS-CoV-2组在t1时IMMAX显著高于基线（平均差0.044，95%CI 0.009–0.079，调整后p=0.019），t3时则显著低于基线（平均差?0.032，95%CI ?0.001至?0.063，调整后p=0.041）；人鼻病毒组和其他病因组则相对稳定。进一步对IMMAX五个组分进行动态分析发现，SARS-CoV-2感染期间NK/T比值、CD28?CD8+T细胞百分比及CD8+记忆/初始比值均出现显著改变，其中NK/T比值在恢复后显著下降（调整后p=0.049），记忆/初始CD8+比值和CD28?CD8+T细胞频率在t1时显著高于基线（调整后p分别为0.032和0.019）。t-SNE可视化显示，同一参与者的各时间点样本在11个特征空间中紧密聚集，表明个体免疫特征具有高度稳定性，即使在SARS-CoV-2感染期间整体IMMAX短暂升高时仍保持聚集模式。
讨论部分指出，急性病毒性呼吸道感染引起的IMMAX改变是短暂且可逆的，完全康复后4周不留下持续性升高，这与既往应用单细胞RNA测序衰老时钟（sc-ImmuAging）在急性COVID-19中的发现一致：感染期间免疫年龄加速，恢复后趋于正常。SARS-CoV-2特异性的IMMAX偏移主要由CD8+T细胞相关组分驱动，包括记忆/初始比值和衰老相关CD28?CD8+T细胞频率的变化，而鼻病毒感染未显示此类改变。由于IMMAX仅包含相对比例，这些变化不能归因于绝对细胞数量的扩张或收缩。轻中度感染未导致早期NK/T比值与人鼻病毒感染明显区分，但恢复期NK/T比值的下降是COVID-19组独有特征，可能与NK细胞活化程度和疾病严重度相关。研究还注意到一例细菌性扁桃体炎参与者在抗生素治疗后IMMAX仍持续较高，提示非病毒性感染可能具有不同免疫衰老动力学。局限性包括亚组样本量小（每组8-9人）、混杂的症治疗药物影响、无法排除对照组的无症状感染、仅随访4周不足以评估长期变化。总之，研究结论为：急性病毒感染个体的IMMAX评分总体稳定，急性期短暂升高在临床康复后消失；SARS-CoV-2感染导致由CD8相关组分驱动的独特偏移，提示不同病因的呼吸道感染在IMMAX测量中有所反映，因此急性症状性感染期间评估免疫年龄应谨慎解读。
