《Modern Pathology》：OTP, CD44, Ki-67 Immunohistochemistry to Predict Prognosis in Preoperative Lung Neuroendocrine Tumor Biopsy Specimens
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既往研究已确定OTP、CD44和Ki-67是肺类癌（即肺神经内分泌肿瘤，LNET）的预后生物标志物。研究人员旨在评估能否利用这些生物标志物在LNET术前活检标本中建立风险分层。研究人员从荷兰病理登记系统（PALGA）中选取接受根治性切除术的LNET患者（TNM
既往研究已确定OTP、CD44和Ki-67是肺类癌（即肺神经内分泌肿瘤，LNET）的预后生物标志物。研究人员旨在评估能否利用这些生物标志物在LNET术前活检标本中建立风险分层。研究人员从荷兰病理登记系统（PALGA）中选取接受根治性切除术的LNET患者（TNM 8版分期I–III期，2003–2021年），并在匹配的切除标本和活检（Bx）标本上进行OTP、CD44和Ki-67的免疫组化检测。三位病理学家依据WHO 2021年分类（WHO）对所有病例进行复核。OTP和CD44采用H-score评估，Ki-67增殖指数（PI）采用肉眼热点计数法评估。活检标本中诊断为类癌非特指型（NOS）者视为低复发风险，非典型类癌（AC）视为高风险。免疫组化染色病例被分为低风险（OTP≥50，CD44≥30，Ki-67<5%）或高风险（其他情况）。共98例患者符合入组条件。中位随访83个月期间发生19例复发事件。该生物标志物组合正确识别了89%（17/19）复发患者为高风险，优于WHO分类——后者仅将11%（2/19）的复发患者归为AC。生物标志物组合的阴性预测值为0.96，而WHO分类为0.82。在无复发生存分析中，生物标志物组合显示出更好的预后分层效能，并具有更高的观察者间一致性（生物标志物：κ=0.673；WHO：κ=0.276，两者均p<0.001）。与WHO分类相比，生物标志物在活检与切除标本之间的表达更为稳定，提高了两者间的一致性（生物标志物：κ=0.584，p<0.001；WHO：κ=0.169，p=0.037）。总之，OTP、CD44和Ki-67生物标志物组合能够在活检标本上可靠识别低风险LNET，在预后分层和活检-切除一致性方面均优于WHO分类。通过在术前活检中准确识别具有分子低风险谱的肿瘤，该组合有助于为考虑行亚肺叶切除的患者提供治疗选择指导。
这是一项针对肺神经内分泌肿瘤（lung neuroendocrine tumors, LNET）术前活检标本的回顾性队列研究，旨在验证OTP、CD44及Ki-67免疫组化标志物组合在术前活检中的预后预测价值。研究背景方面，LNET根据2021年世界卫生组织（WHO）分类分为低级别典型类癌（typical carcinoid, TC）和中间级别非典型类癌（atypical carcinoid, AC），两者的手术策略不同：TC可行亚肺叶切除，而AC推荐肺叶切除。然而，术前活检常因组织量有限、核分裂象和坏死评估困难而存在较高的观察者间变异，WHO建议将具有类癌形态但无法明确分级的活检标本归为类癌非特指型（carcinoid not otherwise specified, NOS），这导致术前难以准确区分低危与高危患者。因此，需要可靠的分子标志物来辅助术前决策。既往研究已在切除标本中证实OTP、CD44和Ki-67组成的标志物组合能够将患者分为低复发风险和高复发风险，且能提高病理医师间诊断一致性，但在术前活检标本中尚缺乏验证。研究人员据此开展本研究，以评估该标志物组合在术前活检中对术后复发风险的预测能力。
研究从荷兰病理登记系统（PALGA）中筛选出98例具有配对活检和切除标本的LNET患者，其中包括19例术后复发事件，中位随访83.3个月。研究人员对活检和切除标本均进行OTP、CD44和Ki-67免疫组化染色，由三位病理医师独立阅片。OTP和CD44采用H-score量化，Ki-67增殖指数采用热点计数法评估。基于预设截断值，将患者分为低风险（OTP≥50、CD44≥30且Ki-67<5%）和高风险（任一标志物不满足上述标准）。同时，研究人员按照WHO 2021分类对活检标本进行病理复核，并额外评估了最新提出的WHO 2026分类（以Ki-67 5%作为G1/G2界值）中加入OTP/CD44的附加价值。统计分析采用Kaplan-Meier法评估无复发生存（relapse-free survival, RFS），以Fleiss’ Kappa评估观察者间一致性，以Cohen’s Kappa评估活检与切除标本间的分类一致性。
研究结果显示，在98例活检标本中，WHO 2021分类将94例归为NOS、4例归为AC，而生物标志物组合将53例判为低风险、45例判为高风险。19例复发患者中，标志物组合将89.5%（17/19）识别为高风险，而WHO分类仅将10.5%（2/19）识别为AC。标志物组合的阴性预测值达0.962，显著高于WHO分类的0.819；Kaplan-Meier分析显示高风险组的风险比（hazard ratio, HR）为11.9（95% CI 2.7–51.5, p<0.001），远高于AC定义的3.5（p=0.096）。在WHO 2026新分类中，G1病例复发率为14.8%，G2为60.0%；加入OTP/CD44后，G1且OTP/CD44双阳性者复发率降至0，显著改善了预后分层。活检与切除标本的一致性方面，标志物组合的κ值为0.584（p<0.001），远高于WHO分类的0.169（p=0.037）。在三个标志物中，OTP的一致性最高（κ=0.830），CD44次之（κ=0.573），Ki-67最低（κ=0.022，无统计学意义）。观察者间一致性从WHO分类的κ=0.276提高至标志物组合的κ=0.673，三位病理医师的结果一致。CD44丢失是导致高风险分类的主要驱动因素，而Ki-67在活检中判别效能最弱，且易受截断值附近病例影响。在临床淋巴结分期（cN）亚组中，74%的复发事件发生在cN0患者，而标志物组合在cN0亚组中能将低风险患者的复发率降至4.3%（2/46），显著低于WHO 2021 NOS分类的17.1%和WHO 2026 G1分类的14.1%。
讨论部分指出，该研究首次在术前LNET活检标本中验证了OTP/CD44/Ki-67标志物组合的预后价值，其优于WHO传统形态学分类，并且能够为临床淋巴结分期提供额外的预后信息。标志物组合的活检-切除一致性较高，提示基于活检的风险分层在大多数情况下能够代表整个肿瘤的生物学特征，但少数病例因活检组织有限可能低估风险。观察者间一致性的提高支持其在常规临床实践中的可重复性。CD44被证实具有独立于OTP和Ki-67的附加预后价值，而Ki-67虽然应用广泛但在活检中表现较弱，可能需要与其他标志物联合使用。研究中存在一定局限性，包括需要前瞻性验证、染色流程集中于单一中心、部分患者随访数据不完整、R1切除病例的潜在影响、低风险亚肺叶切除病例数过少，以及因复发事件有限无法进行多因素分析。此外，62%的高风险病例未发生复发，提示可能需要结合TERT等额外生物标志物及临床参数进一步优化。结论部分强调，整合OTP、CD44和Ki-67免疫组化能够可靠识别低复发风险患者，弥补WHO标准在小标本中的不足，在术前提供关键的预后信息，从而有助于临床医师区分适合亚肺叶切除与至少需要肺叶切除的患者，推动LNET个体化手术治疗决策。
