视网膜类器官来源外泌体通过早期抑制MAPK通路及调控转录组代谢对慢性眼压升高模型中视网膜神经节细胞发挥神经保护作用

《Stem Cell Research & Therapy》：Retinal organoid-derived exosomes enhance retinal ganglion cell survival in chronic ocular hypertension

　　摘要背景：迄今，视网膜类器官来源的外泌体（Exo-ROs）在慢性眼压升高（COH）中对视网膜神经节细胞（RGC）的保护治疗潜力尚未被探索。本研究旨在评价Exo-ROs在大鼠COH模型中的神经保护作用及其潜在的分子机制。方法：通过诱导人多能干细胞（iPSCs）分化为视网膜类器官（ROs），于第60天从条件培养液中分离外泌体。通过在Sprague-Dawley大鼠上进行环巩膜缝合术诱导慢性眼压升高，随后进行Exo-ROs的玻璃体腔内注射。采用Brn3a免疫荧光染色和明视觉负反应（PhNR）评估RGC存活和功能。为阐明其机制，于第3天检测MAPK通路激活情况，并在治疗1个月后进行全RNA测序。结果：Exo-ROs显著改善了COH眼中RGC的存活率，并保护了PhNR振幅（p < 0.001）。在治疗后第3天，Exo-ROs显著抑制了COH诱导的ERK、JNK和p38磷酸化，表明早期抑制了应激诱导的MAPK信号通路。外泌体microRNA谱分析进一步证实了这一发现，显示靶向MAPK通路的miRNA富集。此外，治疗后1个月的全RNA测序结果显示，Exo-ROs部分恢复了COH视网膜的转录组谱，特异性调控了与脂肪酸β-氧化和免疫应答调节相关的生物学过程。结论：Exo-ROs在实验性COH中赋予强大的神经保护作用，该过程与早期抑制应激诱导的MAPK信号通路以及长期调控视网膜转录组代谢相关。Exo-ROs代表了一种有前景的无细胞治疗策略，可用于青光眼管理。