miR-23a-3p通过靶向SRC-3介导的自噬在氧化应激诱导的视网膜色素上皮细胞损伤中的作用

《European Journal of Medical Research》：Down-regulation of miR-23a-3p protects retinal pigment epithelial cells from oxidative stress via inducing SRC-3-mediated autophagy

　　

摘要

背景

年龄相关性黄斑变性（AMD）是一种主要的退行性眼病，最终会导致不可逆的视力丧失。本研究旨在揭示miR-23a-3p在AMD中的作用及其潜在机制。

方法

通过MTT实验和流式细胞术分析，测定H₂O₂处理的ARPE-19细胞活力和凋亡情况。采用商业试剂盒检测氧化应激和炎症相关标志物。利用DCFH-DA检测ROS水平。通过免疫荧光分析LC3B荧光强度。利用生物信息学分析和荧光素酶报告基因实验验证SRC-3与miR-23a-3p之间的分子关系。

结果

miR-23a-3p在H₂O₂剂量依赖性模式下在ARPE-19细胞中逐渐上调。miR-23a-3p抑制H₂O₂暴露的ARPE-19细胞活力和自噬，同时促进细胞凋亡、氧化应激和炎症。自噬抑制剂3-MA的预处理可以抵消miR-23a-3p抑制对H₂O₂处理的ARPE-19细胞活力、凋亡、氧化应激、炎症以及自噬的影响。SRC-3是miR-23a-3p的目标mRNA。SRC-3在H₂O₂剂量依赖性方式下在ARPE-19细胞中逐渐下调。SRC-3的表达受miR-23a-3p的负向调控。SRC-3沉默逆转了miR-23a-3p抑制对H₂O₂处理的ARPE-19细胞活力、凋亡、氧化应激、炎症以及自噬的影响。

结论

miR-23a-3p的下调通过诱导SRC-3介导的自噬来保护视网膜色素上皮细胞免受氧化应激。