哈萨克斯坦西伯利亚狍（Capreolus pygargus）作为猞猁带绦虫（Taenia lynciscapreoli）中间宿主的分子证据

《International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife》：Siberian roe deer ( Capreolus pygargus) as an intermediate host of Taenia lynciscapreoli in Kazakhstan: molecular evidence

　　

本研究调查了哈萨克斯坦的西伯利亚狍（Capreolus pygargus）作为猞猁带绦虫（Taenia lynciscapreoli）中间宿主的情况。研究人员在四只西伯利亚狍的肺脏中检测到T. lynciscapreoli的幼虫期（metacestodes），并通过部分线粒体NADH脱氢酶亚基1（nad1）基因测序确证了分子鉴定。BLASTn分析显示，所获序列与参考的T. lynciscapreoli序列具有100%的一致性。本研究为T. lynciscapreoli在哈萨克斯坦完成其生活史提供了分子证据。

猞猁带绦虫（Taenia lynciscapreoli）是一种异主性寄生绦虫，其传播依赖捕食者—猎物相互作用。欧亚猞猁（Lynx lynx）为其主要终宿主，灰狼（Canis lupus）为偶见终宿主；已知中间宿主包括狍（Capreolus）、西伯利亚狍（Capreolus pygargus）、驼鹿（Alces alces）和驯鹿（Rangifer tarandus），幼虫期（metacestodes）主要寄生于肺脏。该虫种已在斯堪的纳维亚、中欧和东南欧多国、西西伯利亚及俄罗斯远东地区报道。近期，研究人员在哈萨克斯坦北部的欧亚猞猁中检出该绦虫，但该国境内的中间宿主此前未知。西伯利亚狍在哈萨克斯坦分布广泛，种群数量估计约115,250只，因此被推测为该国T. lynciscapreoli的潜在中间宿主。本研究旨在通过对西伯利亚狍体内采集的metacestodes进行分子鉴定，以确定T. lynciscapreoli在哈萨克斯坦的中间宿主。

研究人员于2024年9月至2025年12月，在哈萨克斯坦中北部和东部的三个狩猎场依法采集了15只成年和亚成年西伯利亚狍（两性均有）。所有动物经形态学确认后，每个狩猎场选取一只代表个体，通过线粒体D-loop/控制区片段聚合酶链反应（PCR）扩增和Sanger测序进行分子物种确认，结果均证实为C. pygargus（GenBank登录号PZ727150–PZ727152）。寄生虫学检查中，对全肺、心脏、肝脏、肠系膜及约0.5 kg大腿肌肉进行了宏观检查。对检出的metacestodes进行计数、测量并保存于70%乙醇中。随后，从每只阳性狍的一个代表性metacestode中提取基因组DNA（酚-氯仿法），利用引物对JB11/JB12扩增线粒体nad1基因部分片段（约450 bp），经Sanger测序后，通过BLASTn比对和最大似然法（MEGA11）构建系统发育树进行物种鉴定。所得nad1序列已提交GenBank（登录号PZ508661–PZ508664）。

结果：metacestodes的检测与形态学特征。在15只西伯利亚狍中，4只（27%）检出metacestodes（年龄1–4岁，三雄一雌），且全部来自Akkol区（Akmola Region）的同一狩猎场，该处受检的4只狍全部感染（100%）。metacestodes仅见于肺脏，位于胸膜下和肺实质深部，肝脏、心脏和肌肉组织均未检出。共计21个metacestodes，感染强度为2–8（平均5.3），直径0.6–1.5 cm，内含透明液体和白色内陷的原头蚴；外翻的原头蚴长3–4 cm，具有带两排大小钩的顶突，钩总数32–34。上述寄生部位和形态特征与T. lynciscapreoli的报道一致。

结果：分子鉴定与系统发育分析。四个metacestodes分离株经PCR扩增获得约420–450 bp的产物。BLASTn分析显示，部分线粒体nad1基因序列与T. lynciscapreoli参考序列（JX860630、PV855065）具有100%一致性。系统发育分析将所有本研究获得的序列与参考序列PV855065和JX860630置于一个高支持度的分支中（100%自展值）。其中，分离株PZ508662与JX860630聚在一起（100%自展值），而PZ508661、PZ508663、PZ508664则与来自同一研究区域（Akkol区）的猞猁分离株L24-06、L25-3（Lider et al., 2026）及参考序列PV855065聚在一起（100%自展值）。T. hydatigena、T. multiceps、T. krabbei和T. serialis则形成各自独立的物种特异性分支，外群为Dipylidium caninum。系统发育结果支持所有研究序列均为T. lynciscapreoli。

讨论与结论。结合此前在同一地区欧亚猞猁中检获成虫的记录，本研究中在共存西伯利亚狍体内检测并分子鉴定T. lynciscapreoli幼虫，为C. pygargus在哈萨克斯坦作为该绦虫中间宿主提供了分子证据，并支持该国终宿主与中间宿主之间的关联。系统发育分析显示，西伯利亚狍分离株与当地猞猁分离株及欧洲（芬兰、罗马尼亚）参考序列聚类，仅有轻微差异的Kos25-02仍位于T. lynciscapreoli分支内，可能反映种内序列变异。研究局限在于nad1片段较短，系统发育分辨率有限，推断近缘种间关系受限。Akkol区狩猎场同时支持猞猁和西伯利亚狍种群，共存的捕食者与猎物可能促进该寄生虫在当地维持传播，但由于样本量小，解释需谨慎。T. lynciscapreoli仅在三个狩猎场之一检出，可能反映猞猁丰度、狍密度、猎物可利用性或随机效应的局部差异，但尚属推测。未来需更大规模研究，涵盖更多猞猁、西伯利亚狍及其他潜在中间宿主（如驼鹿），以阐明T. lynciscapreoli在哈萨克斯坦的分布与传播生态。本研究结论：对C. pygargus体内T. lynciscapreoli幼虫的分子鉴定，结合同一区域欧亚猞猁体内成虫的既往检出，提供了C. pygargus作为该绦虫在哈萨克斯坦中间宿主的分子证据。该研究扩展了该虫种的已知地理分布范围，有助于深入理解其中亚传播生态。