SecB无序C端尾部作为底物滞留与转位酶交接的双重功能调节因子

《Communications Biology》：The disordered C-tail of SecB modulates holdase activity and translocase engagement

　　

摘要

分泌型伴侣蛋白使通过Sec翻译后途径分泌的前蛋白维持其未折叠的、具有转位能力的状态。SecB是一种变形菌门的分泌型伴侣蛋白，其C端拥有一段短而无序的尾部，该尾部的功能迄今尚未得到充分探索。本研究通过体内和体外功能测定、单分子FRET、氢氘交换质谱以及等温滴定量热法的组合手段，深入探讨了该尾部的作用。我们发现，SecB的C端尾部具有双重功能：一方面，通过延长底物蛋白在展开的、具有转位能力的构象中的滞留时间，强化SecB的保持酶活性；另一方面，通过将β-折叠对接表面维持于动态状态，削弱SecA的结合亲和力。尾部缺失表型部分地反映了底物结合型SecB的动态特征，提示该尾部作为一种条件性元件，将底物占据与SecA结合偶联在一起。这些发现表明，该无序C端尾部是Sec途径中底物滞留和转位酶交接的双重功能调节因子。