含与不含小麦次粉的氨基酸缺乏日粮对火鸡雏鸡组织滴虫水平传播的影响

《Poultry Science》：Influence of amino acid-deficient diets with and without wheat middlings inclusion on the horizontal transmission of Histomonas meleagridis in turkey poults

　　

本研究旨在评估2种氨基酸（amino acid, AA）缺乏日粮对饲养于层叠式笼中的火鸡雏鸡组织滴虫（Histomonas meleagridis）水平传播及疾病进展的影响。在出雏当天（d0），火鸡雏鸡称重、随机化并分配到2个处理组（每组10个笼）。d0-6期间，所有火鸡均饲喂一种不含药物、营养充足、基于玉米-豆粕（soybean meal, SBM）的火鸡开食料。d6-33期间，火鸡被饲喂2种不含药物的氨基酸缺乏日粮之一：1）玉米-SBM基础日粮；或2）玉米-SBM-小麦次粉（wheat middlings, WM）基础日粮。日粮被配制成等能，且含有相同浓度的总钙（Ca）、非植酸磷（P）和可消化氨基酸（AA）。采用同群感染（seeder）攻毒模型来模拟组织滴虫在层叠式笼中的传播。在d13，对所有雏鸡称重，每处理组12只雏鸡通过口腔灌服8.32 mg/kg（1 mL）异硫氰酸荧光素-葡聚糖（fluorescein isothiocyanate-dextran, FITC-d）以评估肠道通透性。此外，每笼随机选取2/8只雏鸡，以1 × 10⁵个组织滴虫细胞/0.5 mL攻毒（种子鸡[seeder]），并与未攻毒的同伴（接触鸡[contact]）放回同一笼中。在d27，移除种子鸡并记录肝脏和盲肠病变评分。在d33，对所有剩余的接触鸡称重、实施安乐死并进行病变评分。各日粮处理之间的火鸡生产性能、死亡率、肠道通透性和感染率均未观察到差异（P > 0.05）。存在日粮×年龄交互作用（P < 0.05），其中与日粮2相比，日粮1的表观代谢能（apparent metabolizable energy, AME）和氮校正表观代谢能（nitrogen-corrected AME, AME_n）随年龄增幅更大。日粮1的种子鸡盲肠病变评分高于（P < 0.05）日粮2。接触鸡的病变评分无差异（P > 0.05）。本研究数据表明，在氨基酸缺乏日粮中添加WM与氨基酸缺乏的玉米-SBM日粮相比，并未增加水平传播或疾病严重程度。由于两种日粮均为营养限制型，这些结果应在氨基酸缺乏的背景下解读，且无法确定相对于营养充足日粮的限制效应。

**氨基酸缺乏日粮中添加小麦次粉对火鸡雏鸡组织滴虫水平传播影响的评价**

**一、研究背景与目的**

组织滴虫（Histomonas meleagridis）是引起火鸡组织滴虫病（histomonosis）的原虫，该病以肝脏靶样坏死灶和盲肠芯形成为特征，可导致肝炎和盲肠炎，造成火鸡发病、死亡和性能下降。商业火鸡群中该病死亡率可达10%至100%。传统控制依赖砷制剂，但最后一种药物nitarsone于2015年退市，目前无获批药物可用，因此亟需深入了解病原传播机制并建立实验室攻毒模型。水平传播在商业条件下可能通过食粪行为促进，同群感染（seeder）模型可用于模拟该传播过程。应激因素（包括饲料限制和日粮成分）可能影响感染严重程度，但相互作用尚不完全清楚。先前研究发现，含小麦次粉（wheat middlings, WM）的低营养密度日粮可增加组织滴虫水平传播的稳定性，但WM本身的作用未被独立解析。因此，本研究使用两种等能、等氨基酸缺乏程度的日粮（玉米-豆粕基础日粮和玉米-豆粕-小麦次粉基础日粮），评估WM对饲养于层叠笼中火鸡雏鸡组织滴虫水平传播、疾病进程和肠道通透性的影响，以确定不使用WM是否仍能维持传播模型。

**二、研究内容与主要结论**

研究人员将出雏火鸡雏鸡随机分配到两种氨基酸缺乏日粮处理组，采用同群感染模型：每笼8只鸡中2只为攻毒种子鸡，与6只接触鸡混养。结果显示，日粮类型对生长性能、死亡率、肠道通透性和感染率均无显著影响。种子鸡中，饲喂玉米-豆粕日粮的盲肠病变评分显著高于含WM日粮，但接触鸡的病变评分无差异。代谢能测定显示存在日粮×年龄交互作用，两种日粮的AME和AME_n均随年龄增加，但玉米-豆粕日粮增幅更大。研究结论表明，在氨基酸缺乏背景下，添加WM并未增加水平传播或疾病严重性；玉米-豆粕氨基酸缺乏日粮能够支持传播模型的建立，可能更适合用于未来评估饲料添加剂效果的攻毒试验。

**三、关键技术方法概述**

试验动物为从Select Genetics商业孵化场获得的Nicholas Select母雏鸡，出雏至d6饲喂营养充足的玉米-豆粕开食料，d6-33饲喂两种氨基酸缺乏日粮（可消化氨基酸约为供应商推荐值的56%）。采用同群感染模型，d13每笼选2只经泄殖腔灌入1 × 10⁵个组织滴虫细胞/0.5 mL作为种子鸡，与6只接触鸡混养。d13另选每处理12只雏鸡灌服FITC-d（8.32 mg/kg）测定血清浓度评估肠道通透性。病变评分采用0-3分系统，感染率定义为盲肠评分1-3的百分比。通过使用TiO₂指示剂和全收粪法测定表观代谢能（AME、AME_n）。统计分析采用SAS GLM、卡方检验等。

**四、研究结果**

**1. SBM和WM的营养组成**

通过原料成分分析，WM的总膳食纤维、可溶性纤维和不可溶性纤维含量均高于SBM。在单糖组成上，WM的阿拉伯糖和木糖含量较高，而SBM的蔗糖、棉子糖、水苏糖和毛蕊花糖等低聚糖含量较高。这些结果确认了WM作为高纤维稀释剂的特点。

**2. 生长性能**

从d13-33挑战期间，饲喂两种日粮的采食量、接触鸡的体增重和饲料转化率均无统计学差异；种子鸡从d6-27的体增重也无差异。表明在氨基酸缺乏背景下，是否添加WM未影响生产性能。

**3. 肠道通透性、感染率和死亡率**

d13血清FITC-d浓度在日粮间无显著差异。种子鸡的感染率（95% vs 100%）和死亡率（40% vs 25%）在两种日粮间无统计学差异，但玉米-豆粕日粮组种子鸡死亡率数值较高。接触鸡的感染率分别为52.5%和45%，无显著差异；接触鸡未发生组织滴虫相关死亡。

**4. 病变评分**

种子鸡的肝脏病变评分无差异；玉米-豆粕日粮组种子鸡盲肠病变评分显著高于WM日粮组（2.60 vs 2.05，P = 0.041）。接触鸡的肝脏和盲肠病变评分均无日粮间差异。

**5. 代谢能**

AME和AME_n在两种日粮间无主效应，但日粮×年龄交互作用显著；随年龄增加，玉米-豆粕日粮组的代谢能增幅大于WM日粮组，研究人员推测这可能与日粮纤维含量差异有关。

**五、讨论与结论**

讨论部分指出，先前研究将水平传播增加归因于WM，但本研究通过控制日粮能量和氨基酸水平，证明WM并非水平传播增加的必要因素。研究人员认为，氨基酸缺乏可能损害火鸡免疫应答，从而增加易感性。WM日粮虽然含较高纤维和禽脂，但未引起肠道通透性显著改变，也未导致接触鸡传播差异。本研究的局限性包括未设置营养充足对照组，以及层叠笼饲养限制了观察周期。总而言之，在氨基酸缺乏日粮中添加WM并未增加组织滴虫水平传播和感染严重程度；玉米-豆粕氨基酸缺乏日粮能够维持传播模型，适合未来研究。仍需进一步探索日粮与组织滴虫传播的相互作用。