《Discover Animals》：Mosquito fauna (Diptera: Culicidae) in the Ria Celestún Biosphere Reserve (RCBR) with a new record for Yucatán, México
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对自然保护区内的蚊类（Diptera: Culicidae）进行物种编目具有重要意义，因为这些地点接纳大量旅游业活动，并可能与公共卫生相关。本研究旨在确定Ría Celestún生物圈保护区（RCBR）多种生境类型中的蚊类区系。在雨季，研究人员于2024年10
对自然保护区内的蚊类（Diptera: Culicidae）进行物种编目具有重要意义，因为这些地点接纳大量旅游业活动，并可能与公共卫生相关。本研究旨在确定Ría Celestún生物圈保护区（RCBR）多种生境类型中的蚊类区系。在雨季，研究人员于2024年10月和11月采用横断面采样法捕获成蚊。共捕获3755只个体，隶属17种6属。Aedes taeniorhynchus为最优势蚊种，在所有采样点均有发现。受扰动植被区捕获物种数最多（n=12），其次是“Isla de los Pájaros”小岛和可淹水区，均为7种。Anopheles gabaldoni Vargas, 1941为尤卡坦州新纪录蚊种。另有8种为RCBR新纪录：Aedes scapularis (Rondani, 1848)、Aedes angustivittatus Dyar & Knab, 1907、An. gabaldoni、Anopheles punctipennis (Say, 1823)、Anopheles vestitipennis Dyar & Knab, 1906、Culex nigripalpus Theobald, 1901、Mansonia titillans (Walker, 1848)和Uranotaenia lowii Theobald, 1901。研究人员向GenBank提交了3条蚊类基因序列：Ae. angustivittatus、An. vestitipennis和Coquillettidia venezuelensis (Theobald, 1912)。该研究证实了该自然保护区内新蚊种的存在；其中一些是虫媒病毒的有效媒介。
蚊类（双翅目：蚊科）是多种虫媒病原体的传播媒介。在生态保护区开展蚊类本底调查，不仅有助于区分骚扰性蚊虫与病原体传播媒介，也对游客密集区域的公共卫生风险评价至关重要。全球蚊科已知3729种，墨西哥记录254种，其中尤卡坦半岛93种、尤卡坦州59种。然而，尤卡坦州针对生态保护区的蚊类研究仍然较少。Ría Celestún生物圈保护区（RCBR）是尤卡坦州面积最大的保护区之一，植被类型包括红树林、海岸沙丘植被和盐沼，同时存在人类社区和高密度鸟类聚集区。此前研究已在RCBR捕获的蚊虫中检测到South River病毒和甲病毒（Togaviridae: Alphavirus）RNA，并在鸟类Cyanocorax yncas中分离出圣路易斯脑炎病毒。为完善该保护区的蚊类区系资料，本研究在雨季开展横断面调查，目标包括记录不同生境蚊虫组成，并通过线粒体细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因测序验证疑难蚊种。
研究人员于2024年10月至11月，在RCBR的27个采样点采用背负式吸蚊器和BG-Sentinel诱蚊器采集成蚊；采样点依照可达性与安全性选择，覆盖红树林、盐沼、受扰动植被、小岛等生境。形态学鉴定后，对形态相似或易混淆的Aedes angustivittatus、Coquillettidia venezuelensis和Anopheles vestitipennis进行DNA提取，PCR扩增COI片段；另对Ae. angustivittatus扩增内转录间隔区2（ITS2）。扩增产物经Sanger测序后，使用BLAST比对、贝叶斯系统发育分析和p-distance遗传距离分析确认物种身份与遗传分化。
3.1 物种丰富度与丰度：在27个采样点中，21个点有捕获，共获3755只成蚊，隶属17种6属。Aedes taeniorhynchus雌蚊占总数95.26%（3577/3755），且在所有生境均有分布，显示其与沿海湿地和红树林的密切关联。受扰动植被区物种数最多（12种），其次为“Isla de los Pájaros”小岛和可淹水区（各7种）。Anopheles gabaldoni Vargas, 1941在受扰动植被区和小岛被捕获，成为尤卡坦州新纪录。除An. vestitipennis外，其余按蚊物种均来自“Isla de los Pájaros”小岛。6个采样点未采获蚊虫，包括盐田2个、受扰动植被区1个和小岛3个。采集方法方面，背负式吸蚊器捕获了94.70%的个体，BG-Sentinel诱蚊器仅捕获5.30%。
3.2 DNA条形码：三种蚊虫的COI序列均获得高置信度比对：Anopheles vestitipennis的704 bp序列与GenBank参考序列一致性99.56%；Coquillettidia venezuelensis的687 bp序列一致性99.85%；Aedes angustivittatus的707 bp序列与墨西哥金塔纳罗奥州样本的一致性为98.50%，但与其他地理种群（恰帕斯州、美国）的遗传距离为3.11%~4.15%。Ae. angustivittatus的ITS2序列（377 bp）与Aedes trivittatus一致性93.64%，显示公共数据库中近缘种ITS2序列不足的限制。
3.3 系统发育分析：贝叶斯系统发育分析显示，三种蚊虫均与特定地理来源的参考序列形成高支持率分支；墨西哥来源的Cq. venezuelensis序列以100%支持率聚支，An. vestitipennis的墨西哥与洪都拉斯序列以99%支持率聚支，Ae. angustivittatus本研究序列与金塔纳罗奥州序列以98%支持率聚支。该结果支持DNA条形码的物种鉴定。
讨论部分指出，本研究使RCBR已知蚊类增至24种，An. gabaldoni使尤卡坦州蚊类总数增至60种；新增8个保护区新纪录种包括Ae. scapularis、Ae. angustivittatus、An. gabaldoni、An. punctipennis、An. vestitipennis、Culex nigripalpus、Mansonia titillans和Uranotaenia lowii。Ae. taeniorhynchus的丰度优势与其耐盐和利用人工容器的生态特性相符。受扰动植被区与高保护价值红树林的交汇可能增加生境异质性，从而支持更高的蚊类丰富度。系统发育和遗传距离表明，Ae. angustivittatus在尤卡坦州及金塔纳罗奥州可能构成独立的地理谱系，甚至可能是隐存种；研究者认为需进一步开展形态学检查和线粒体基因组分析。此外，讨论强调多种捕获物种均为虫媒病毒潜在媒介，例如Ae. taeniorhynchus、Ae. scapularis和Ma. titillans；RCBR已有甲病毒、South River病毒和圣路易斯脑炎病毒的循环证据，因此新纪录种的媒介潜能对公共卫生监测具有意义。局限性方面，本研究每个采样点仅调查一次，且未覆盖旱季，尚不能视为完整区系清单。未来应加强旱季采样、在“Isla de los Pájaros”小岛开展蚊媒病毒检测，并利用线粒体基因组解析隐存种。
结论：本研究在自然保护区内记录了多种新增蚊类，其中部分为虫媒病毒有效媒介，提示该地区需持续进行蚊类多样性与蚊媒病毒监测。
