摘要
黄芪甲苷（CAL）是从黄芪（Astragalus membranaceus）中提取的一种异黄酮单体，具有强效的抗炎和抗氧化药理活性。然而，CAL在脂多糖（LPS）诱导的心肌细胞炎症损伤中的具体作用尚待阐明。本研究建立了LPS刺激H9c2心肌细胞的体外炎症损伤模型，以评估CAL的心肌保护作用。我们通过检测细胞活力、活/死细胞染色、氧化应激标志物、炎症因子谱和心脏损伤生物标志物来表征CAL的保护效果。采用定量蛋白质组学结合生物信息学分析探索其潜在机制。通过分子对接和分子动力学模拟分析CAL与靶蛋白PPARγ和NF-κB之间的预测结合亲和力及复合物稳定性。采用qPCR和Western blot检测PPARγ和NF-κB的mRNA和蛋白水平，并通过PPARγ特异性抑制剂GW9662进行拯救实验以验证靶点依赖性。我们的结果表明，CAL对LPS诱导的心肌细胞损伤具有显著的保护作用，能有效增强细胞活力、减少细胞死亡、减轻细胞内ROS蓄积、调节氧化应激相关参数、抑制过度炎症反应并减少心脏损伤生物标志物的释放。蛋白质组学分析显示，差异表达蛋白显著富集于PPAR信号通路。分子模拟预测CAL与PPARγ和NF-κB均具有稳定结合。PCR和Western blot结果显示，CAL在mRNA和蛋白水平上调PPARγ并抑制NF-κB介导的促炎基因表达。值得注意的是，用GW9662药理学阻断PPARγ部分消解了CAL的心肌保护作用。综上所述，这些发现表明CAL通过依赖于激活PPARγ及随后抑制NF-κB信号通路的保护机制，改善H9c2心肌细胞中LPS诱导的炎症损伤。
