肠道屏障损伤与多种炎症和代谢性疾病相关。甘草水提物(GC)已显示出恢复肠道屏障完整性的潜力。然而,其活性物质基础仍定义不足。为了解析其活性成分,将GC分离为多糖富集组分(GC-PS)和小分子组分(GC-SM),并采用LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤模型进行比较评价。GC-PS和GC-SM均减轻了屏障破坏,而整个提取物GC的总体效果强于任一单独组分。结构表征表明,GC-PS是一种富含α-糖苷键的呋喃型杂多糖。UPLC-Q-TOF-MSE分析在GC-SM中鉴定出63种化合物,其中在大鼠口服给药后的血清和结肠内容物中分别检测到26种和29种原型化合物。分子对接与细胞实验相结合表明,甘草苷、甘草亭酸苷、甘草苷C2、甘草酸和GC-PS通过上调紧密连接蛋白、增加跨上皮电阻(TEER)和降低FITC-葡聚糖通量来增强肠道屏障功能。这些发现为理解甘草活性成分在肠道屏障修复中的作用提供了实验依据,并为鉴定中药中的生物活性成分提供了理论支持。