IGF2BP3通过m6A介导的NPY1R稳定化驱动巨噬细胞M1极化从而促进颅内动脉瘤破裂

《Peptides》：IGF2BP3 drives macrophage M1 polarization to promote intracranial aneurysm rupture through m6A-mediated NPY1R stabilization

　　• 从颅内动脉瘤（IA）患者分离的巨噬细胞中IGF2BP3和NPY1R表达异常升高。• NPY1R激活PI3K/STAT3通路，驱动巨噬细胞M1极化。• Igf2bp3通过m?A修饰促进巨噬细胞中Npy1r mRNA的稳定性和Npy1r表达。• Igf2bp3通过上调Npy1r并激活PI3K/STAT3通路促进巨噬细胞M1极化。## 引言颅内动脉瘤（IA）是一种常见的脑血管疾病，其特征是颅内动脉壁的局部异常扩张，主要发生在血流动力学高应力区域[1]。既往文献记载，IA在一般人群中的患病率为0.5%–3%[2]。破裂性IA可导致蛛网膜下腔出血等致命并发症[3]。微创介入治疗是主要的临床治疗手段，但受限于术后复发和血栓形成[2]。因此，阐明IA的发病机制对于理解其发展至关重要。现有研究表明，巨噬细胞极化失衡，特别是促炎性M1表型的过度激活，促进了IA的发生、进展和破裂[4]。因此，明确IA病灶中巨噬细胞极化的分子调控机制，可能为免疫调节治疗提供重要的理论基础和潜在治疗靶点。神经肽Y受体1（NPY1R）属于G蛋白偶联受体超家族，是神经肽Y受体家族中首个被成功克隆和表征的亚型[5]。既往研究已证实，NPY1R是与IA发展密切相关的特征性基因之一，且位于雌激素反应通路中[6]。另一项研究报告称，在RAW264.7巨噬细胞中过表达NPY1R可促进TGFβ1的合成与分泌，并诱导PI3K磷酸化，从而驱动巨噬细胞向促炎性M1表型极化[7]。我们团队此前发表的研究也表明，NPY1R在IA组织中过表达，并通过介导血管平滑肌细胞表型转化、加剧局部炎症反应以及促进M1巨噬细胞极化，加速了IA的进展和破裂[8]。尽管这些研究初步揭示了NPY1R在IA发展中的作用，但NPY1R在IA病灶部位巨噬细胞中的表达情况，以及其是否通过调节巨噬细胞极化直接参与IA的分子机制，仍有待进一步深入研究。N?-甲基腺苷（m?A）修饰是真核生物mRNA分子中最普遍的内部化学修饰。通过在腺苷位点引入甲基基团，该修饰可实现对基因表达的动态、可逆性调控，从而广泛参与体内多种生理活动和病理过程的调控[9]。既往研究已证实m?A修饰与IA发展密切相关，并通过调节免疫微环境（如巨噬细胞极化）影响疾病进程[10]。在IA样本中，多种m?A相关调控因子的表达异常。其中，胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3（IGF2BP3）、IGF2BP1、YTHDF2、ZNF217、RBM15和YTHDF3呈上调趋势，而YTHDC1、FTO和LRPPRC则表现为下调[11]。作为典型的m?A"阅读器"蛋白，IGF2BP3可特异性识别并结合目标mRNA上的m?A修饰位点，通过维持目标mRNA的稳定性和提高其翻译效率，在基因表达的转录后调控中发挥关键作用[12]。在本研究中，我们通过SRAMP数据库预测了NPY1R mRNA序列上存在m?A修饰位点。进一步利用RM2Target分析确认了NPY1R mRNA与IGF2BP3之间潜在的相互作用位点。因此，我们假设IA样本中NPY1R的异常高表达可能与IGF2BP3通过m?A修饰维持NPY1R mRNA稳定性密切相关。基于现有研究背景，本研究旨在探究IGF2BP3是否通过m?A修饰机制调控NPY1R mRNA的稳定性，从而介导巨噬细胞M1极化，最终促进IA的破裂过程。通过结合体内和体外实验，本研究将验证Igf2bp3对Npy1r mRNA的作用效果，以及该调控作用对巨噬细胞极化表型的影响。需要注意的是，本研究中使用的巨噬细胞是从外周血而非动脉瘤组织中分离获得的；因此，人类体外数据主要反映全身性免疫变化，而局部动脉瘤壁生物学特性则通过小鼠IA模型进行研究。预期本研究结果将为阐明IA进展的免疫调控机制提供新的实验证据，并有望为基于m?A修饰和巨噬细胞极化的IA免疫干预策略确定潜在治疗靶点。## 分节摘要### 人源样本本研究共纳入62名参与者，包括23名健康志愿者、21名未破裂IA患者和18名破裂IA患者。所有参与者的临床特征汇总于表1。所有参与者在入院时均采集外周血样本。鉴于这些样本来自外周血而非动脉瘤组织，其反映的是参与者的全身免疫状态而非局部动脉瘤壁免疫### IA进展可能与循环巨噬细胞中巨噬细胞M1极化、NPY1R表达升高及m?A修饰水平升高有关为阐明IA中巨噬细胞极化过程中NPY1R表达和m?A修饰的特征，我们收集了健康志愿者、未破裂IA患者和破裂IA患者的外周动脉血样本进行分析。流式细胞术结果显示，与健康志愿者相比，未破裂IA患者外周血巨噬细胞中M1极化比例升高，且该比例在### 讨论巨噬细胞极化在IA的发生和破裂中发挥着关键的调控作用[14]。我们此前的研究表明，NPY1R在IA病灶中高表达，并通过驱动血管炎症反应和促进M1巨噬细胞极化加速疾病进展[8]。然而，NPY1R在IA组织巨噬细胞中的表达及其在促进M1极化中的潜在作用仍有待进一步阐明。在本研究中，我们利用外周血### 伦理声明所有参与者或其法定代理人已书面同意参与本研究并发表本文章。研究过程中尊重了参与者的隐私权。本研究严格遵守研究所在地相关法律法规、监管框架和指南。本研究经南华大学附属第二医院伦理委员会批准（批准号：2024049）。本研究在以下机构开展### 基金资助国家重点临床专科培育项目、衡阳市出血性脑血管疾病重点实验室、湖南省自然科学基金联合项目（编号：2025JJ81007）、湖南省卫生健康委员会重点指导项目（编号：20201912）及衡阳市引导计划项目。### CRediT作者贡献声明**何健**：写作 – 审阅与编辑，写作 – 初稿，验证，项目管理，调查研究，概念构思。 **唐婷**：写作 – 审阅与编辑，软件，方法论，概念构思。 **段永红**：写作 – 审阅与编辑，软件，形式分析，数据管理。 **江远大**：写作 – 审阅与编辑，监督，项目管理，概念构思。 **梁日楚**：写作 – 审阅与编辑，验证，资源，数据管理。 **周敏**：写作 –## 利益冲突声明作者声明不存在可能影响本文所报告工作的已知竞争性经济利益或个人关系。## 致谢不适用。### 利益冲突作者声明不存在任何利益冲突，无论是财务上的还是其他形式的。何健|唐婷|段永红|梁日楚|周敏|王冰|江远大