白介素-17A、白介素-8及血小板计数与川崎病儿童基线冠状动脉病变的相关性：一项回顾性探索性队列研究

《Immunity, Inflammation and Disease》：Interleukin-17A, Interleukin-8, and Platelet Count Are Associated With Baseline Coronary Artery Lesions in Children With Kawasaki Disease: A Retrospective Exploratory Cohort Study

　　

专业摘要翻译：
背景：川崎病（Kawasaki disease, KD）是一种急性儿童血管炎，冠状动脉病变（coronary artery lesions, CAL）决定长期心血管风险。研究人员评估了静脉注射免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin, IVIG）治疗前的一组聚焦生物标志物与基线Z评分定义的冠状动脉受累之间的关联。

目的：探讨白介素-17A（interleukin-17A, IL-17A）、白介素-8（interleukin-8, IL-8）和血小板计数（platelet count, PLT）是否与基线CAL相关，并评估这一探索性标志物组合的稳健性和内部区分度。

方法：这项单中心回顾性探索性队列研究筛选了2023年收治的242例疑似KD患儿。排除43例后，共分析199例患儿（非CAL组，n＝166；CAL组，n＝33）。CAL采用机构超声心动图数据库中记录的预处理节段水平冠状动脉Z评分定义。为限制模型复杂度，主要Firth惩罚逻辑模型仅限于三个预测因子（PLT、IL-8和IL-17A；每个预测因子11个事件）。九协变量临床信息模型和疾病时机/不完全KD模型作为敏感性分析。内部验证采用1000次重抽样bootstrap乐观校正和100次重复分层五折交叉验证并进行完全重拟合。

结果：与非CAL组相比，CAL组患儿的PLT、IL-6、IL-8和IL-17A更高，红细胞压积（hematocrit, HCT）更低，以及其他组间差异。在主要Firth模型中，PLT（比值比[odds ratio, OR]，每100×10⁹/L为3.081；95%置信区间[confidence interval, CI]，1.582–6.002）、IL-8（OR，每10 pg/mL为1.167；95% CI，1.076–1.266）和IL-17A（OR，每10 pg/mL为6.555；95% CI，3.054–14.071）与基线CAL相关。表观曲线下面积（area under the receiver operating characteristic curve, AUC）为0.975，乐观校正AUC为0.972，重复交叉验证平均AUC为0.966（标准差[standard deviation, SD]，0.006）。

结论：较高的IVIG前IL-17A、IL-8和PLT与基线Z评分定义的CAL相关。这些经过内部验证但为单中心观察性研究的结果既不能建立机制，也不能证明生物标志物指导的影像学检查或治疗合理。在临床使用前需要进行前瞻性多中心外部验证。

论文解读文章：

川崎病（Kawasaki disease, KD）是一种急性自限性中型血管血管炎，主要累及婴幼儿，但冠状动脉受累时可导致长期的甚至危及生命的心血管后果。静脉注射免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin, IVIG）的及时给药显著降低了冠状动脉瘤的发生率，但仍有临床重要比例的患儿发生冠状动脉扩张、动脉瘤形成、血栓、狭窄及晚期缺血事件。当代KD管理不仅需要识别急性临床综合征，还需要仔细评估冠状动脉受累情况和炎症表型，以筛选可能需要加强超声心动图监测、早期心脏科介入或辅助抗炎治疗的患儿。传统炎症标志物如C反应蛋白（C-reactive protein, CRP）、红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate, ESR）和白介素-6（interleukin-6, IL-6）主要反映全身性炎症状态，而非冠状动脉特异性的血管损伤。流行病学证据显示，KD在东亚人群中发病率最高，但全球范围内均有发生，且在许多高收入国家是儿童获得性心脏病的首要病因。中国和日本的大规模调查表明，尽管诊断意识和IVIG使用率显著提高，冠状动脉受累仍会发生。既往临床风险评分如Kobayashi、Egami和Sano评分源自日本人群，在外部验证中显示出可变的敏感性和校准度，而在部分北美队列中，基线冠状动脉Z评分可能优于仅含实验室指标的评分。近年研究聚焦于Th17/IL-17轴，尤其是白介素-17A（interleukin-17A, IL-17A）；白介素-8（interleukin-8, IL-8）可促进中性粒细胞趋化、黏附和跨内皮迁移。然而，观察性生物标志物研究本身不能确立因果通路，目前尚不清楚以细胞因子为中心的聚焦标志物组合是否与基线冠状动脉病变（coronary artery lesion, CAL）相关。为此，研究人员开展了一项单中心回顾性探索性队列研究，旨在评估IVIG治疗前的IL-17A、IL-8和血小板计数（platelet count, PLT）与基线Z评分定义的CAL之间的关联，并对此探索性标志物组合进行稳健性检验和内部区分度评估。

该研究于2023年1月至12月在河北儿童医院进行，共连续筛查242例疑似KD患儿。按照明确的排除标准（包括入院前已接受IVIG或全身性糖皮质激素治疗、复发KD、最终诊断为其他发热/炎症性疾病、细胞因子检测缺失、基线超声心动图缺失及关键临床/实验室数据不全等）排除43例后，最终分析队列包含199例患儿，其中非CAL组166例，CAL组33例。CAL定义为治疗前超声心动图记录的节段水平冠状动脉最大Z评分≥2.0。主要分析采用Firth惩罚逻辑回归，并将模型限制为三个预测因子（PLT、IL-8和IL-17A，相当于每个预测因子11个事件），以降低模型复杂度；同时进行了九协变量临床信息模型和疾病时机/不完全KD模型的敏感性分析。内部验证采用1000次重抽样bootstrap乐观校正和100次重复分层五折交叉验证（完全重拟合）。

研究结果显示：在基线特征方面，CAL组患儿的入院/采血疾病日、IVIG前发热持续时间和入院至IVIG时间均更长，IVIG抵抗比例更高，但年龄和性别分布与无CAL组无显著差异。在单变量生物标志物比较中，CAL组表现出更显著的炎症和血液学扰动：PLT、ESR、白细胞计数、CRP、D-二聚体、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、脑钠肽、铁蛋白、IL-6、IL-8和IL-17A均显著升高，而血红蛋白、红细胞压积（hematocrit, HCT）、白蛋白、前白蛋白和钠水平较低。其中IL-17A在细胞因子中呈现最大组间分离：CAL组中位数为33.80 pg/mL（四分位距20.40–44.60），非CAL组为5.96 pg/mL（3.87–9.87），差异具有统计学意义（p＜0.001）。超声心动图结果显示，CAL组的左主干冠状动脉、左前降支和右冠状动脉内径及相应Z评分均显著高于非CAL组；CAL组最大Z评分中位数为2.62（2.23–3.81），显著高于非CAL组的1.04（0.63–1.30）。在33例CAL患儿中，单纯扩张15例（45.5%）、小动脉瘤12例（36.4%）、中等动脉瘤5例（15.2%）、大/巨动脉瘤1例（3.0%）；24例为单支血管受累，9例为双支血管受累。在主要Firth惩罚逻辑回归模型中，PLT（比值比[odds ratio, OR]每100×10⁹/L为3.081；95%置信区间[confidence interval, CI] 1.582–6.002）、IL-8（OR每10 pg/mL为1.167；95% CI 1.076–1.266）和IL-17A（OR每10 pg/mL为6.555；95% CI 3.054–14.071）均与基线CAL显著相关。扩展的九协变量模型显示，较低的HCT以及较高的PLT、IL-8和IL-17A仍与CAL相关；在分别加入入院疾病日或不完全KD状态、IVIG前发热持续时间或不完全KD状态的模型中，三项生物标志物的效应估计方向保持一致，而疾病时机和不完全KD协变量均未达到统计学显著。在区分度方面，IL-17A具有最高的表观单标志物AUC（0.932；95% CI 0.876–0.987），其次为IL-8（0.873）、IL-6（0.870）和PLT（0.830）。三预测因子主要模型的表观AUC为0.975，经1000次bootstrap重抽样后平均乐观度为0.003，乐观校正AUC为0.972；100次重复分层五折交叉验证的平均AUC为0.966（SD 0.006；经验95%区间0.951–0.972）。相比之下，九协变量扩展模型虽具有更高的表观AUC，但交叉验证性能稳定性较差，提示过拟合风险。额外稳健性分析显示方差膨胀因子较低，无明显线性共线性；IL-17A与疾病日无相关性，且在疾病日受限分析和log2转化细胞因子分析中，关联方向保持一致。

讨论部分指出，该研究的主要贡献不在于发现新的生物标志物或验证实验机制，而在于临床表型整合与分析评估：在IVIG前队列中，将IL-17A和IL-8置于完整细胞因子面板中评估，并联合PLT与记录的节段水平Z评分定义的冠状动脉受累进行关联分析，同时采用降低复杂度的Firth模型和重复内部验证来应对有限的事件数。研究结果支持独立临床复制和假设精化，但不能建立因果通路或作为可部署的临床预测工具。IL-6虽有显著的单变量差异和较高的表观单标志物区分度，但由于仅33个CAL事件，将其加入三预测因子主要模型会增加预测因子负担，因此仅保留为单变量和单标志物分析结果，不对其独立多变量效应作任何推断。临床意义应保持保守：这些生物标志物不应独立改变超声心动图检查频率、辅助治疗或随访策略；影像学监测和辅助抗炎治疗仍应基于既有指南指征，包括异常冠状动脉Z评分、持续或复发性发热、IVIG抵抗及其他高危特征。研究的局限性包括：单中心回顾性设计、33个事件限制了统计精度；残余混杂无法完全排除；存档数据库未保留Z评分方程或软件版本，限制了方法学可重复性；完整病例和细胞因子可用性选择可能引入偏倚；单次IVIG前测量无法进行轨迹分析；少数中/巨动脉瘤限制严重度分层建模；观察性关联不能确立机制、中介、临床效用或因果关系。

研究结论翻译如下：在这项回顾性探索性队列中，较高的IVIG前IL-17A、IL-8和PLT与基线Z评分定义的CAL相关。三预测因子Firth模型降低了小样本过拟合风险（但未完全消除），并显示出较高的内部验证区分度。IL-6表现出显著的单变量差异，但未进入简化多变量模型，这是事件数限制所致，本研究不对IL-6的独立效应作出任何推断。这些数据独立复制了既往临床炎症信号，但未建立机制，也不支持改变影像学检查或治疗决策。在临床使用前必须进行前瞻性多中心外部验证。