内源重链抗体iPRC2识别促卵泡激素受体胞内环并调控其内吞转运与信号输出

《Communications Biology》：A single domain intrabody biases the follicle-stimulating hormone receptor subcellular trafficking

　　

摘要

源自骆驼科重链抗体（VHH）的可变片段能够稳定G蛋白偶联受体（GPCRs）的活性构象，从而实现三维结构表征，并通过将受体构象状态与下游信号传导联系起来，支持详细的构效关系研究。当这些VHH在细胞内表达时，最近被证明有助于追踪活性GPCRs在亚细胞区室间的分布。在此，我们报告了iPRC2的分离与表征，这是一种内源VHH，能够特异性识别人促卵泡激素受体（hFSHR）的细胞内环。在表达hFSHR的细胞中表达iPRC2会降低FSH诱导的cAMP积累，同时需要Gαs以实现最佳的受体相互作用。重要的是，iPRC2促进hFSHR在早期内体中的积累并限制其回收至细胞表面。因此，与以往报道的识别活性GPCR细胞内位置的intra-VHH不同，iPRC2本身即可诱导定位偏向。通过重塑hFSHR的转运过程，iPRC2提供了一种独特的活细胞工具，可操纵受体定位并研究区室化GPCR转运如何影响信号输出。