《Journal of Future Foods》：Yak whey protein peptides alleviate DSS-induced colitis by modulating the NLRP3 inflammasome and gut barrier
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牦牛乳清蛋白肽（Yak whey protein peptides, YWP）可缓解葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium, DSS）诱导的小鼠结肠炎。研究人员发现，YWP能够改善黏液分泌与紧密连接蛋白表达，并抑制NLRP3炎症小体活化。Y
牦牛乳清蛋白肽（Yak whey protein peptides, YWP）可缓解葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium, DSS）诱导的小鼠结肠炎。研究人员发现，YWP能够改善黏液分泌与紧密连接蛋白表达，并抑制NLRP3炎症小体活化。YWP还可调节肠道菌群并提升短链脂肪酸（Short-chain fatty acid, SCFA）水平。通过肽组学与分子对接，研究人员鉴定了具有潜在抗炎活性的肽段。上述结果表明，YWP作为食物来源的功能因子，在调控肠道免疫稳态与屏障功能方面具有应用潜力。
研究背景方面，溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis, UC）属于免疫介导的慢性结肠炎症，其发病与肠道屏障损伤、免疫紊乱、氧化失衡及菌群失调有关。传统治疗如糖皮质激素与生物制剂存在疗效不稳定、耐药和不良反应等问题。乳清蛋白具有抗氧化、免疫调节和抗炎等特性，但现有研究多聚焦普通奶牛乳清，牦牛（Bos grunniens）作为高原牛种，其乳清蛋白组成独特，却少有研究关注其对结肠炎的作用。因此，研究人员开展本研究，以DSS诱导小鼠急性结肠炎模型评估牦牛乳清蛋白肽（YWP）的保护效应与机制。
该论文发表于《Journal of Future Foods》。研究人员通过预防性灌胃给予YWP，结合组织学、生化、分子与微生物学分析，证实YWP可减轻体重下降、结肠缩短与脾肿大，降低疾病活动指数（Disease Activity Index, DAI）和组织学损伤，恢复杯状细胞与黏液层，上调闭合蛋白（Claudin）-1、Claudin-3、闭锁蛋白（Occludin）、闭合小环蛋白（Zonula occludens-1, ZO-1）及MUC2，抑制髓过氧化物酶（Myeloperoxidase, MPO）所反映的中性粒细胞浸润；同时降低肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白细胞介素（Interleukin, IL）-1β、IL-6、一氧化氮（Nitric oxide, NO）、诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxide synthase, iNOS）、环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2, COX-2）等炎症指标，并改善总超氧化物歧化酶（Total superoxide dismutase, T-SOD）、过氧化氢酶（Catalase, CAT）、总抗氧化能力（Total antioxidant capacity, T-AOC）和丙二醛（Malondialdehyde, MDA）所代表的氧化状态。
主要关键技术方法上，研究人员使用雄性BALB/c小鼠建立DSS结肠炎模型，设对照、DSS及YWP低中高剂量组；采用H&E与AB/PAS染色进行组织学评价，以ELISA、生化试剂盒、免疫组化、免疫荧光、RT-qPCR与Western blotting分析炎症、氧化与屏障蛋白；通过GC-MS检测结肠内容物SCFA，利用16S rRNA高通量测序分析肠道菌群；以肽组学鉴定YWP肽段，并用AutoDock Vina对MPO与NLRP3进行分子对接。
研究结果如下。YWP改善结肠炎临床表现：研究人员通过体重、脾重、结肠长度与DAI观察，得出YWP尤其中高剂量可减轻DSS所致全身与结肠表型异常。YWP保护结肠组织损伤：经H&E、AB/PAS与组织学评分，研究人员认为YWP可恢复隐窝结构、减少炎症浸润并增加杯状细胞与黏液。YWP减轻氧化应激与炎症反应：基于氧化酶、炎症介质、细胞因子与mRNA分析，研究人员得出YWP可增强抗氧化防御并下调促炎基因与蛋白。YWP改善肠道屏障相关蛋白：通过MPO、MUC2及Claudin-1、Claudin-3、Occludin、ZO-1检测，研究人员得出YWP可抑制中性粒细胞浸润、恢复黏液屏障并增强上皮紧密连接。YWP降低NLRP3炎症小体相关蛋白：Western blotting显示NLRP3、ASC、Caspase-1上调被YWP抑制；相关性分析表明炎症小体蛋白与促炎、氧化损伤指标正相关，与屏障和抗氧化指标负相关。YWP提高结肠SCFA浓度：GC-MS结果显示乙酸、丙酸、丁酸等恢复，尤YWP-H组接近对照，提示菌群代谢改善。YWP改变肠道菌群多样性与组成：16S分析显示DSS降低α多样性并增加变形菌门（Proteobacteria）与Akkermansia等，YWP可回升厚壁菌门（Firmicutes）、毛螺菌科（Lachnospiraceae）并改善群落结构。YWP肽组学与分子对接：共鉴定5821条肽，多数为3至6氨基酸短肽；KGPWFW、GGWGW、WFGY、FYYY对MPO与NLRP3具有较低对接自由能，形成氢键与π相关作用，但仅为计算预测。
讨论部分总结：研究人员指出，YWP的保护作用可能来自抗氧化、抑炎、屏障修复、SCFA增加与菌群调节的共同作用；NLRP3相关蛋白下降可能是氧化应激减轻、炎症减弱、屏障改善与微生物代谢产物变化的结果，但不能据此认定YWP直接抑制炎症小体组装。候选肽的消化稳定性、吸收与体内可及性仍不清楚，YWP应定位为营养干预而非临床替代药物，需与标准药物比较及用纯化肽、细胞模型进一步验证。
结论部分翻译：总之，在DSS暴露前及全程口服YWP可减轻小鼠急性结肠炎的发生与严重度。在该预防干预方案中，YWP减少临床与组织学异常，缓解氧化应激与炎症反应，维持肠道屏障相关特征，减轻DSS相关的肠道菌群组成改变，并保持较高结肠SCFA浓度；这些效应伴随NLRP3、ASC与Caspase-1表达降低。肽组学分析与分子对接进一步鉴定出若干与MPO具有有利预测相互作用的肽段。总体结果支持YWP作为一种食物来源的预防性营养成分类别，用于在炎症挑战下维持肠道稳态。但本研究存在局限：YWP仅在DSS诱导前给药，对已建立结肠炎的治疗效力未明；分离肽的活性需实验确认；YWP属食物来源营养干预而非临床抗结肠炎药物，故需与标准临床药物直接比较以评估其相对效力与转化潜力。
