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**背景**：婴儿利什曼原虫（*Leishmania infantum*）是一种媒介传播的人兽共患寄生虫，导致南欧国家的人兽共患利什曼病，对免疫功能低下的人类或动物预后较差。在动物宿主层面改进人兽共患利什曼病的监测和控制，对于支持与世界卫生组织（WHO）
**背景**：婴儿利什曼原虫（*Leishmania infantum*）是一种媒介传播的人兽共患寄生虫，导致南欧国家的人兽共患利什曼病，对免疫功能低下的人类或动物预后较差。在动物宿主层面改进人兽共患利什曼病的监测和控制，对于支持与世界卫生组织（WHO）被忽视热带病路线图目标一致的全健康（One Health）协调应对至关重要。
**方法**：研究人员评估了基于葡萄牙公共市政动物收容所网络（CROA）的利什曼病监测系统的适用性，使用犬和猫作为白蛉暴露和婴儿利什曼原虫感染的哨兵。2021年至2024年间，在34个CROA和4个私人收容所接收的、代表葡萄牙大陆六个地理区域90个市镇的无主犬（n=1194）和猫（n=478）接受了临床评估，并通过多抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗利什曼原虫抗体和抗恶毒白蛉（*Phlebotomus perniciosus*）唾液蛋白抗体。
**结果**：犬利什曼病（CanL）和猫利什曼病（FeL）血清阳性率分别估计为11.8%和5.0%。犬和猫对恶毒白蛉暴露的血清学证据分别为18.2%和6.3%。全国范围内观察到CanL和FeL血清阳性率的显著区域差异，反映了不同的地方流行性区域。研究得出结论，CROA网络可通过在葡萄牙大陆多个区域实现动物宿主的空间分布采样，显著加强人兽共患利什曼病监测。当使用所提出的多抗原ELISA进行分析时，这些样本提供了易于获取、潜在有用且具有成本效益的流行病学信息。
**论文解读**
人兽共患利什曼病是由婴儿利什曼原虫（*Leishmania infantum*）引起的媒介传播人兽共患寄生虫病，在南欧国家广泛流行，主要经白蛉叮咬传播。犬是公认的人类感染的主要 domestic 储存宿主，而猫的感染也日益受到关注。尽管国际社会承诺消除被忽视热带病（NTD），但利什曼病的疾病负担仍因监测不规律、报告碎片化以及动物、媒介和人类数据整合不足而被低估。在葡萄牙，人类无症状感染率估计为4.8%，2010—2020年间诊断出221例内脏利什曼病（VL）病例，主要发生于HIV阳性个体和儿童。犬利什曼病（CanL）的血清阳性率是决定人类感染风险的关键因素，因此监测CanL是预防人类感染或暴发的核心策略。然而，葡萄牙现有的监测主要依赖被动病例发现，且局限于狂犬病疫苗接种活动，无法准确估计感染负担和地理分布。与此同时，葡萄牙估计有100万只无主犬猫自由活动，每年约有4万只进入公共市政动物收容所（CROA），这一庞大而地理分布多样的群体尚未被充分利用于监测。因此，研究人员旨在评估以CROA网络为平台、以无主犬猫为哨兵动物的利什曼病监测策略的可行性，并验证其能否补充现有监测系统，支持全健康（One Health）框架下的疾病防控。
研究人员于2021年至2024年间，从葡萄牙大陆34个CROA和4个私人收容所招募了1194只犬和478只猫，覆盖90个市镇及六个NUTS2大区。所有动物均接受临床评估，并采集血清样本。研究采用多抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）检测犬和猫血清中针对婴儿利什曼原虫不同抗原（可溶性前鞭毛体利什曼原虫粗蛋白[SPLA]、重组利什曼原虫驱动蛋白39[rK39]和婴儿利什曼原虫胞质锥虫过氧化物酶[CPX]）的总免疫球蛋白G（IgG）抗体，同时检测针对恶毒白蛉唾液重组蛋白03B（SP03B）的抗体，以评估媒介暴露。犬的血清阳性判定标准为SPLA和/或rK39阳性；猫则需SPLA、rK39和CPX三重阳性。通过受试者工作特征（ROC）曲线确定检测阈值，并使用卡方检验和Fisher精确检验进行统计学分析。
**3.1 犬和猫利什曼病血清流行率的地理分布及血清阳性与宿主因素的关联**
研究通过分层地理统计分析发现，犬利什曼病总体血清阳性率为11.8%（141/1194），猫为5.0%（24/478）。CanL血清阳性率在NUTS2和NUTS3区域间呈现显著异质性，最高值出现在塔霍河谷周边区域，如Lezíria do Tejo（31.6%）、Médio Tejo（22.6%）和里斯本大区的Mafra（24.0%），以及Norte大区的Douro（20.7%）和Centro大区的Coimbra（19.2%）。FeL的总体分布相对均匀，但在NUTS3/市镇尺度上显示出局灶性热点，例如Aveiro（18.2%）、Beiras e Serra da Estrela（15.8%）和Baixo Alentejo（15.8%）。全局比较显示，犬的血清阳性率显著高于猫（p<0.001），在多个同域采样点中差异同样显著。沿海与内陆区域之间未观察到显著差异。
**3.2 犬和猫对利什曼病相关疾病的易感性**
临床与血清学联合分析显示，5.1%（61/1194）的犬同时具有临床体征和血清阳性，其中43.3%的犬血清阳性但体检正常，表明存在大量亚临床储存宿主。宿主因素分析表明，雄性犬、体况评分（BCS）低于正常的犬以及未绝育的犬具有更高的血清阳性率，且差异具有统计学意义。犬的皮肤病变、淋巴结肿大、黏膜苍白和眼科病变等临床体征与CanL血清阳性显著相关。猫的分析显示，雄性猫、未绝育猫及低BCS猫的FeL血清阳性风险更高，且FeL阳性与全身性非特异性症状、眼部病变和皮肤病变等存在关联。
**3.3 犬和猫暴露于恶毒白蛉叮咬的血清学评估**
针对SP03B的抗体检测结果揭示，犬的恶毒白蛉暴露率为18.2%（181/995），猫为6.3%（21/335），犬显著高于猫。犬的SP03B血清反应性呈现明显季节性，从3/4月开始上升，5—10月达到高峰，1—2月未检出阳性样本，与已知的白蛉活动季节（5—11月）一致。地理分布上，犬暴露率在里斯本大区（24.8%）和Centro大区（21.4%）较高，且在NUTS3水平上存在高度异质性，部分区域如Douro、Aveiro和Lezíria do Tejo的犬暴露率超过40%。猫的暴露率在Oeste e Vale do Tejo最高（9.4%），但Alentejo地区猫的SP03B阳性率为0%，可能与当地白蛉物种组成不同有关。
**讨论与结论**
讨论部分指出，CROA网络为利什曼病监测提供了可扩展的地理分布采样框架，可补充基于兽医中心的被动监测；多抗原ELISA具有高灵敏度和特异性，犬CanL诊断灵敏度和特异性分别达到99%和98%，但仍需进行独立外部验证。SP03B血清学可作为媒介接触标志，但不能替代媒介本身监测。研究还强调，猫虽然哨兵灵敏度较低，但可作为补充监测对象，为某些微灶提供额外信息。该监测策略的主要局限包括设施自愿参与可能导致的选择偏倚、横断面设计无法评估时间趋势，以及不同地区样本量不均衡。未来若在动物入场时系统采样，并结合分子检测和媒介监测，可进一步优化。该框架可整合到国家监测平台，如人兽共患病综合监测和早期预警系统（SIVIZ），以强化全健康监测。
研究结论部分翻译如下：本研究证明了利用CROA设施作为地理分布框架，在葡萄牙收集人兽共患利什曼病流行病学和血清学数据的可行性。该方法凸显了这些公共基础设施提供地理分布流行病学信息的潜力，可能有助于未来的风险评估和监测活动，以支持全健康方法下的利什曼病控制。所提出的框架是一种可扩展的模型，可在葡萄牙及其他南欧流行地区进一步发展和验证。
