IHC-PLA法原位检测乳腺癌组织中核内p53-PtdIns(3,4,5)P3信号体

《Cell & Bioscience》：In Situ detection of protein-phosphoinositide signalosome in tissues by immunohistochemistry-coupled proximity ligation assay

　　

摘要

磷脂酰肌醇（PIPs）是核心的脂质信号分子，其中PtdIns(3,4,5)P₃作为PI3K-AKT通路的关键调节因子，是肿瘤发生的重大驱动因素。该通路与p53突变或缺失一起，代表了人类癌症中最常失调的轴之一。我们最近鉴定出一个核内p53-PtdIns(3,4,5)P₃信号体，能够从头激活AKT，促进癌细胞存活、侵袭和耐药性，具有重要的生物学和临床意义。然而，在组织中原位检测此类蛋白质-脂质信号体一直面临技术挑战。在此，我们提出了一种免疫组化偶联邻近连接分析（IHC-PLA）方法，将PIP特异性抗体与邻近连接分析（PLA）和免疫组化相结合，以在乳腺癌组织中可视化内源性PtdIns(3,4,5)P₃与突变型p53的相互作用。该方法实现了核内蛋白质-PIP信号体的原位半定量高分辨率检测，为癌症病理学中的PIP信号研究提供了一个多功能工具。