基于单拷贝基因的牛肉有证参考物质的开发与验证

《International Journal of Molecular Sciences》：Development of Bovine-Derived β-Actin Genomic DNA Reference Materials for Meat Adulteration

　　摘要肉类质量和真实性是重要的食品安全问题，尤其是易发生物种错标和掺假的加工肉制品。牛肉的准确分子鉴定依赖于物种特异性DNA标记，而核酸参考物质（RMs）在分子计量学中充当"标尺"。然而，单拷贝基因DNA参考物质的缺乏限制了检测的准确性和可靠性。为解决这一问题，我们利用牛基因组DNA开发并验证了用于食品产品中牛肉鉴定的有证参考物质（CRMs）。通过数字PCR检测牛肉中的β-actin基因建立了这些CRMs。基于9个独立协作实验室对β-actin的定量测定，CRMs中β-actin的认证值分别为（6.85 ± 0.63）× 103 copies/μL和（8.00 ± 0.77）× 102 copies/μL，扩展不确定度（包含因子k = 2）。此外，这些CRMs被用于评估标准的适用性，分析单拷贝基因法与多基因法之间的定量偏差，并进行真实样本测试。这些工作为扩展国家动物性食品成分有证参考物质目录以及提高检测准确性提供了有力支持。