《Experimental and Molecular Pathology》：The MHC class II transactivator CIITA induction as a potential new tool to develop anti-tumor vaccines and predict the efficacy of immunotherapy
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MHC II类反式激活因子（CIITA）是适应性免疫最佳激活的关键调控因子。CIITA驱动的MHC-II诱导使肿瘤细胞能够充当抗原提呈细胞（APC）。表达CIITA的肿瘤细胞为抗肿瘤疫苗开发提供了平台。CIITA驱动的MHC-II表达可预测癌症免疫治疗疗效。体
MHC II类反式激活因子（CIITA）是适应性免疫最佳激活的关键调控因子。CIITA驱动的MHC-II诱导使肿瘤细胞能够充当抗原提呈细胞（APC）。表达CIITA的肿瘤细胞为抗肿瘤疫苗开发提供了平台。CIITA驱动的MHC-II表达可预测癌症免疫治疗疗效。体内CIITA恢复可能支持临床转化及与免疫检查点抑制剂（ICI）的联合应用。
论文解读文章
一、研究背景与科学问题
肿瘤免疫治疗虽已取得重大突破，但仍有大量患者对免疫检查点抑制剂（ICI）治疗无应答，其根本原因之一在于肿瘤细胞缺乏主要组织相容性复合体II类（MHC-II）分子的表达，无法直接向CD4+辅助性T细胞（Th）提呈肿瘤抗原，导致适应性抗肿瘤免疫应答激活不充分。MHC II类反式激活因子（CIITA）作为MHC-II基因的主要转录协调因子，不仅调控MHC-II及其相关抗原加工提呈组件的表达，还能增强MHC-I的基础表达，在适应性免疫的优化激活中发挥枢纽作用。然而，肿瘤细胞中CIITA常因表观遗传沉默而缺失表达，限制了肿瘤抗原的有效提呈与免疫识别。因此，如何恢复肿瘤细胞中CIITA的表达、使其获得替代APC功能，并据此开发新型抗肿瘤疫苗及预测免疫治疗疗效，成为肿瘤免疫学领域亟待解决的关键科学问题。
二、研究内容与核心结论
研究人员系统梳理了CIITA的调控机制及其在肿瘤免疫中的多重应用潜力，得出以下核心结论：CIITA可通过四种启动子（pI/II/III/IV）实现组成型或诱导型表达，其中pIV为IFN-γ诱导型启动子，受STAT1、IRF-1和USF-1等转录因子调控，并受TGF-β、IL-4/10/13等细胞因子负向调节。通过转染或转导方式将功能性CIITA导入肿瘤细胞，可使其稳定表达MHC-II并获得替代APC功能，在多种组织学来源的肿瘤模型中证实可被免疫活性同基因小鼠有效排斥或延缓生长，且能诱导针对亲本肿瘤的免疫记忆保护。基于CIITA阳性肿瘤细胞的免疫肽组学分析已鉴定出大量MHC-I和MHC-II限制性肿瘤抗原肽，其中MHC-II限制性肽疫苗已在结直肠癌模型中有效控制肿瘤生长，基于该策略开发的多肽疫苗IMA970A已在肝细胞癌的HepaVac-101临床试验中完成I/II期验证。此外，CIITA本身也可作为核酸疫苗直接体内递送，病毒载体（慢病毒、腺相关病毒）和非病毒载体（脂质纳米颗粒）各有优劣。值得注意的是，胶质母细胞瘤（GBM）的临床前研究结果存在矛盾：部分研究支持CIITA阳性肿瘤细胞的免疫刺激作用，另有研究提示CIITA介导的肿瘤生长抑制可能部分不依赖于MHC-II和抗原提呈，而涉及非免疫性抗增殖机制。表观遗传药物（DNA去甲基化药物、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白甲基转移酶抑制剂）可依据CIITA沉默的具体机制恢复其表达。临床证据表明，CIITA/MHC-II轴在不同肿瘤类型中对ICI疗效的预测价值具有高度背景依赖性，应作为多维分层框架的组成部分而非孤立生物标志物。
三、主要关键技术方法
研究人员综合运用以下关键技术方法：基因转染与病毒转导技术用于在肿瘤细胞中稳定导入CIITA；免疫肽组学结合质谱（MS）技术用于鉴定MHC-I和MHC-II限制性肿瘤抗原肽；同基因小鼠肿瘤模型及过继细胞转移（ACT）实验用于评估抗肿瘤免疫应答与免疫记忆；免疫缺陷小鼠（裸鼠、NSG小鼠）模型用于区分免疫依赖与非免疫依赖的抗肿瘤机制；染色质免疫沉淀（ChIP）技术用于解析CIITA启动子区的表观遗传修饰状态；二维贴壁培养、三维球体及三维Matrigel?培养体系用于评估CIITA对肿瘤细胞增殖的影响；临床样本队列来源包括黑色素瘤、肝细胞癌、GBM等多种肿瘤类型的ICI治疗患者。
四、研究结果
4.1 CIITA表达用于疫苗开发
细胞类疫苗（树突状细胞疫苗、全肿瘤细胞疫苗）和非细胞类疫苗（肿瘤来源外泌体、单肽及多肽疫苗）均可借助CIITA阳性肿瘤细胞鉴定重要肿瘤特异性抗原（TSA）和肿瘤相关抗原（TAA）。CIITA阳性肿瘤细胞来源的外泌体（TEX）可通过Th细胞应答延缓肿瘤生长。基于CIITA转染肿瘤细胞的免疫肽组学策略已鉴定出多种新型MHC-I和MHC-II限制性肽段，其中针对肝细胞癌开发的多肽疫苗IMA970A在HepaVac-101临床试验（NCT03203005）中于19例患者中10例诱导了Th应答，安全性良好。核酸疫苗（DNA和mRNA疫苗）可利用CIITA阳性肿瘤细胞鉴定的MHC-I和MHC-II限制性肽段进行开发，对低肿瘤突变负荷（TMB）的GBM等低免疫原性肿瘤尤为适用。
4.2 CIITA本身作为疫苗
核酸疫苗可直接将CIITA编码序列体内递送至肿瘤细胞，绕过体外和离体基因转移的局限。慢病毒载体（LV）已成功转导BLS-II患者的MHC-II阴性B细胞、肿瘤细胞及原代人皮肤细胞恢复MHC-II表达；含CIITA嵌合构建体DD-335-CIITA（后更名为NLRC5-SA）的腺相关病毒（AAV）载体可增强MHC-I和MHC-II表达并提高细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤效率。将CIITA整合入溶瘤病毒载体有望结合直接溶瘤活性与免疫原性肿瘤抗原提呈。然而，病毒载体存在免疫原性、插入突变风险、包装容量限制及脱靶转导等挑战；非病毒递送系统如脂质纳米颗粒（LNP）递送CIITA mRNA可实现瞬时蛋白表达，但面临肿瘤穿透不足、内体逃逸效率低、核酸不稳定等限制。
4.3 GBM中矛盾的临床前证据
原位小鼠模型中，二维贴壁培养的CIITA阳性GL261和CT-2A胶质瘤细胞颅内注射后肿瘤生长显著受损，并可诱导针对亲本肿瘤的保护性免疫及交叉保护。但Tan等人（2023）的研究显示，皮下接种照射后的亲本或CIITA阳性GL261细胞对后续颅内攻击提供相当的保护，且ACT实验和体外共培养实验不支持CIITA阳性肿瘤细胞增强GBM免疫原性。免疫缺陷小鼠模型中CIITA阳性GL261肿瘤生长仍延迟，证实存在非免疫性抗增殖机制。体外实验表明CIITA阳性GBM细胞系在二维、三维球体和三维Matrigel?条件下增殖均减慢，分子分析显示细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B（P27KIP1）上调和细胞周期通路抑制。Salvato等人（2025）的研究则显示CIITA转导的GBM类器官与PBMC共培养可导致类器官解体和肿瘤细胞杀伤，但该效应部分不依赖于MHC-II表达和抗原提呈，胞质定位的CIITA突变体（无法诱导MHC-II）足以促进T细胞接触依赖性杀伤。
4.4 表观遗传药物诱导CIITA
DNA低甲基化药物（DHA）可在CIITA pIV启动子甲基化时恢复其表达，已在多种肿瘤模型中证实，并获FDA批准用于血液肿瘤治疗，兼具免疫调节活性。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）如曲古抑菌素A、CXD101、QAPHA可在启动子未甲基化但染色质封闭时诱导CIITA和MHC-II表达。组蛋白甲基转移酶抑制剂（HMTi）如靶向EZH2的GSK126、他泽美司他、GSK343、EPZ011989可在H3K27me3介导的CIITA沉默时恢复其表达。靶向MEN1-KMT2A相互作用的抑制剂bleximenib及PRMT抑制剂也可诱导CIITA和MHC-II表达。DHA与HDACi联合在横纹肌肉瘤、胰腺癌和卵巢癌模型中显示叠加效应，但HDACi与HMTi联合虽增强MHC-II诱导却伴随更高毒性。
4.5 CIITA和MHC-II作为免疫治疗预测标志物
多项研究显示CIITA驱动的MHC-II表达与抗CTLA-4、抗PD-1和抗PD-L1治疗的更好预后相关，涉及黑色素瘤等多种肿瘤类型。然而，其预测意义高度依赖背景，受肿瘤微环境（TME）免疫状态（炎症型、耗竭型、排斥型或免疫抑制型）、肿瘤免疫原性（TMB）、MHC-II阳性肿瘤细胞丰度与空间定位以及肿瘤致癌背景（包括病毒病因）等多因素影响。MHC-II阳性肿瘤细胞可能支持生产性Th介导的抗肿瘤免疫，也可能通过抑制性MHC-II受体和慢性炎症信号促进适应性免疫抵抗。
五、讨论与结论
研究人员指出，CIITA/MHC-II轴在抗肿瘤免疫中的功能具有肿瘤类型和实验模型依赖性，尤其在GBM中需结合细胞系、培养条件和TME组成综合解读。表观遗传药物用于CIITA诱导不应依赖单一策略，而应依据各肿瘤中CIITA沉默的具体分子机制选择DHA、HDACi或HMTi，联合用药可能增强效果但需权衡毒性。表观遗传治疗可作为免疫学预激步骤恢复肿瘤内在CIITA和MHC-II表达，随后或同时给予检查点阻断以维持并放大适应性抗肿瘤应答，但目前最佳药物、剂量、疗程及与ICI的时序尚未临床定义。CIITA和MHC-II表达不应被视为孤立的二元生物标志物，而应作为整合肿瘤内在特征和微环境特征的多维分层框架的组成部分。未来研究应直接比较病毒与非病毒递送策略在相关肿瘤模型中的肿瘤选择性生物分布、CIITA表达幅度与持续时间、MHC-I和MHC-II诱导水平、安全性及系统性免疫激活程度，并最终评估抗肿瘤免疫应答的幅度与持久性。
