无DSB胞嘧啶碱基编辑策略BE-PLUS-iSTOP精准灭活HPV18 E6/E7癌基因治疗宫颈癌

《Molecular Therapy》：Base editing-mediated induction of stop codons in HPV18 E6/E7 for cervical cancer therapy

# 摘要高危型人乳头瘤病毒（hrHPV）的持续性感染是宫颈癌发生的驱动因素，其中病毒癌基因E6和E7起着至关重要的作用。传统的核酸酶基因编辑策略受限于全基因组范围内的脱靶效应以及与双链断裂（DSBs）相关的基因组扰动。为应对这些挑战，我们开发了BE-PLUS-iSTOP，这是一种无DSB的胞嘧啶碱基编辑策略，旨在通过在HPV18 E6/E7中精准插入提前终止密码子（PTCs）来使其失活。该策略实现了较高的靶向编辑效率（E6为51.00 ± 2.94%，E7为26.33 ± 2.62%），同时内切/缺失插入（indel）的形成量极少（E6为不可检测，E7 < 0.1%）。功能分析表明，BE-PLUS-iSTOP可有效降低E6/E7蛋白表达，从而显著抑制HPV18阳性宫颈癌细胞的恶性表型。在皮下异种移植小鼠模型中，瘤内递送BE-PLUS-iSTOP诱发了广泛的肿瘤坏死并显著抑制了肿瘤生长，在所测条件下未观察到明显的全身毒性。综上所述，这些发现确立了BE-PLUS-iSTOP作为针对HPV18阳性宫颈癌的精准高效的病因导向治疗策略的地位，为其进一步的转化开发提供了支持，并拓展了抗病毒基因治疗的适用范围。# 图形摘要（含图形摘要图片）