短暂p38 MAPK抑制改善CRISPR-Cas9编辑造血干细胞的质量与长期适应性

《Molecular Therapy》：p38 MAPK inhibition safeguards genome integrity during gene editing of hematopoietic stem and progenitor cells

【字体：大中小】 时间：2026年09月28日 来源：Molecular Therapy 11.4

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　　摘要体外基因编辑造血干细胞和祖细胞（HSPCs）具有显著的治疗潜力，但仍受到与核酸酶诱导的 DNA 双链断裂、DNA 供体模板递送与感知以及体外操作期间的增殖诱导应激相关的基因毒性风险的制约。这些过程可能导致染色体不稳定、大片段靶点内缺失、供体错误整合、脱靶事件以及长期干细胞

摘要

体外基因编辑造血干细胞和祖细胞（HSPCs）具有显著的治疗潜力，但仍受到与核酸酶诱导的 DNA 双链断裂、DNA 供体模板递送与感知以及体外操作期间的增殖诱导应激相关的基因毒性风险的制约。这些过程可能导致染色体不稳定、大片段靶点内缺失、供体错误整合、脱靶事件以及长期干细胞功能受损，从而引发对临床转化的安全担忧。在此，我们评估了短暂 p38 MAPK 抑制对临床相关 CRISPR-Cas9 编辑期间基因组完整性的影响，并表明该干预措施可减轻体外培养相关应激，而不会增加可检测的基因毒性结果。全面的基因毒性分析，包括大片段靶点内缺失的定量、腺相关病毒载体错误整合以及 CAST-seq 易位图谱绘制，显示 p38 MAPK 抑制后基因编辑相关的结构改变没有可测量的差异，而微核显著减少。重要的是，长期异种移植后的全外显子组测序显示，经 p38 抑制剂处理的 HSPCs 表现出较低的突变负担，且没有基因组改变增加的证据。总之，这些发现表明短暂 p38 MAPK 抑制是一种改进基因编辑 HSPCs 质量和长期适应性的策略，且对基因编辑结果没有可检测的负面影响，支持将其进一步评估为临床相关 CRISPR-Cas9 编辑工作流程的优化手段。