《Transboundary and Emerging Diseases》：Evidence of Japanese Encephalitis Virus Exposure in Feral Pig Populations in North Queensland, Australia
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日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）可感染包括马和猪在内的多种动物物种。野猪（Sus scrofa）在自然栖息地被视作JEV的有效扩增宿主。本研究从北昆士兰州四个选定地方政府区域采集了265份野猪干血斑样本，并采用竞
日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）可感染包括马和猪在内的多种动物物种。野猪（Sus scrofa）在自然栖息地被视作JEV的有效扩增宿主。本研究从北昆士兰州四个选定地方政府区域采集了265份野猪干血斑样本，并采用竞争性酶联免疫吸附试验（competitive enzyme-linked immunosorbent assay, cELISA）检测JEV抗体。结果显示，26.4%（70/265）的野猪携带JEV特异性抗体。研究人员发现，与北昆士兰干旱热带地区相比，湿热带地区的JEV血清阳性率存在显著差异（p < 0.05）。结果表明，北昆士兰的野猪已暴露于JEV，提示其可能作为扩增宿主发挥重要作用。这些发现可为通过多部门One Health方法规划缓解措施提供参考依据。
**一、研究背景与科学问题**
日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）是一种重要的嗜神经性人畜共患蚊媒核糖核酸（RNA）病毒，属于黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒属日本脑炎种（Orthoflavivirus japonicum），与墨累谷脑炎病毒（Murray Valley encephalitis virus, MVEV）、圣路易斯脑炎病毒（St Louis encephalitis virus, SLEV）及西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）同属日本脑炎血清复合群。JEV的地方性动物传播循环涉及家猪和野猪作为主要扩增宿主，鹭科鸟类作为维持或贮存宿主。在温带地区，日本脑炎（Japanese encephalitis, JE）流行主要发生在夏季；而在热带地区，JEV呈地方性流行，全年以较低发病率传播。该病主要分布于亚洲和西太平洋国家，每年导致近10万例病毒性脑炎病例，其中14岁以下儿童疾病负担尤为沉重。澳大利亚自1995年在托雷斯海峡岛屿和约克角北半岛地区首次分离到JEV以来，病毒活动范围已从北昆士兰扩展至该国南部。2021—2022年澳大利亚南部暴发的JEV疫情与基因IV型相关，波及东南部各州80多个农场的猪群，并导致40余例人类确诊病例和7例死亡。北昆士兰湿热带地区拥有庞大的野猪种群，其环境和生态条件适宜JEV高水平循环，但野猪在该地区作为虫媒病毒潜在贮存宿主的作用尚不明确。本研究旨在调查北昆士兰干旱热带和湿热带地区野猪中JEV抗体的循环情况。
**二、研究设计与技术方法**
研究人员于2023年至2025年间，通过与猎人、农民、地方议会害虫管理项目及狩猎节合作，在北昆士兰四个地方政府区域随机采集了265份表观健康野猪的干血斑（dried blood spots, DBS）样本。四个区域中，查特斯堡地区议会和汤斯维尔市议会属于干旱热带，欣钦布鲁克郡议会和卡索瓦里海岸地区议会属于湿热带。样本采集后将血液点样于Whatman定性滤纸（Grade 1）并风干，记录年龄、性别、地点和采集日期，样本储存于?20°C。样本量依据Thrusfield公式计算，参考Yap等人在新加坡报告的15.6%血清阳性率，计算出最小样本量为202，并额外增加30%缓冲量，最终确定为265。采用竞争性酶联免疫吸附试验（cELISA）检测猪、牛和马血清中JEV总抗体水平，通过评估单克隆抗体989的抑制程度进行判定：抑制百分比（percentage inhibition, PI）≥50%为阳性，40%—49.9%为不确定，<40%为阴性。数据使用R 4.3.3版进行统计分析，采用Clopper-Pearson 95%置信区间评估变异度，通过单因素逻辑回归分析血清阳性率与预测变量（年龄、性别、年份、地方政府区域、天气条件）之间的关联；阳性样本的PI数据在Python（v2025.3.1.1）中使用pandas和seaborn库进行可视化分析。
**三、主要研究结果**
**总体血清阳性率**：265份野猪样本中检测到JEV总体血清阳性率为26.4%（70/265），表明北昆士兰野猪种群已大量暴露于JEV。该水平与亚洲JEV流行地区报告的3.7%至64.6%范围一致，但高于新加坡（15.16%）和日本部分地区的报道，低于韩国（66%）和日本部分地区的最高值。
**年龄与性别分布**：不同发育阶段的血清阳性率分别为成年猪26.9%（40/149）、幼年猪19.4%（13/67）和仔猪34.7%（17/49）。仔猪血清阳性率约为成年猪的1.5倍（OR = 1.45, 95% CI: 0.72–2.87; p = 0.29），但差异未达统计学显著性。公猪（24.8%, 28/113）与母猪（27.6%, 42/152）之间无显著差异（OR = 1.16, 95% CI: 0.67–2.03; p = 0.60）。
**时间分布**：2023年采集的野猪血清阳性率（34.3%; 23/67）高于2024年（25.5%; 47/184），2025年样本均为阴性（0/14）。但由于2025年样本量较小（n = 14）且各年采集地点存在差异，限制了直接比较。
**地理差异**：卡索瓦里海岸地区议会的野猪JEV血清阳性率最高，为43.1%（47/109）。欣钦布鲁克（OR = 0.2, 95% CI: 0.08–0.46）和汤斯维尔（OR = 0.21, 95% CI: 0.1–0.43）的血清阳性率显著低于卡索瓦里海岸地区。湿热带整体血清阳性率为33.33%（54/162），干旱热带为15.53%（16/103），湿热带野猪暴露于JEV的可能性是干旱热带的近3倍（OR = 2.72, 95% CI: 1.48–5.21; p = 0.00017）。
**抗体抑制水平分布**：70份阳性样本中，41份（58.6%）的抗体反应超过80%的抑制阈值。PI的下四分位数为64%，中位数为84%，上四分位数为97%，个体PI值范围在50%至107%之间。抗体抑制百分比在年龄、性别和地理区域等因素间表现出差异性。
**四、讨论与结论总结**
本研究提供了澳大利亚昆士兰湿热带地区野猪广泛暴露于JEV的首个证据。湿热带地区约三分之一的野猪检出JEV抗体，表明该地区存在实质性病毒暴露。湿热带较高的血清阳性率可能与该地区广泛的湿地、高年降雨量和持续温暖气温有关，这些条件有利于库蚊属（Culex）蚊媒的增殖并增加宿主—媒介接触机会。相比之下，干旱热带季节性降雨明显且永久性湿地栖息地较少，可能限制了媒介丰度并降低了传播强度。仔猪较高的表观血清阳性率可能反映母源抗体的持续存在、母源免疫消退后的近期暴露，或两者共同作用。湿热带地区位于东亚—澳大利亚迁徙线路上，该线路是水鸟的重要迁徙通道，可能通过迁徙水鸟引入或维持JEV。本研究的局限性包括各类别样本量不均导致置信区间较宽、横断面设计限制因果推断、2025年零阳性样本量过小难以解释、以及与其他黄病毒（如MVEV和WNV-Kunjin）的血清学交叉反应可能影响结果解读。尽管存在上述限制，研究结果为北昆士兰野猪种群中JEV抗体循环提供了一致证据。本研究所识别的区域此前未被优先纳入日本脑炎疫苗接种范围，动物监测作为JEV活动早期检测的关键组成部分，可在人类病例出现之前识别病毒循环，为及时采取公共卫生应对措施提供支持。研究表明，北昆士兰野猪可能作为JEV扩增宿主在病毒维持和传播中发挥重要作用，建议通过整合人类、野生动物、家畜、蚊媒和环境监测的One Health框架，加强早期预警能力，指导疫苗接种政策，并在气候变化背景下减轻JEV持续传播或扩展的风险。
**研究结论**：北昆士兰野猪种群已暴露于JEV，湿热带地区血清阳性率显著高于干旱热带地区。野猪可能作为JEV扩增宿主在该地区病毒传播循环中发挥重要作用。这些发现可为通过多部门One Health方法规划缓解措施提供依据。
