澳大利亚本土啮齿动物保护性易位中的基线健康与疾病风险：Shark Bay mouse（Pseudomys gouldii）和greater stick-nest rat（Leporillus conditor）的多学科评估

《Animals》：Giving a Rat’s: Acquisition of Baseline Health Data on Native Australian Rodents During a Conservation Translocation

　　

关于澳大利亚本土啮齿动物的基线健康状况知之甚少。由此产生的知识空白对野生动物易位（wildlife translocation）构成问题，因为评估疾病风险是易位规划和易位结果不可或缺的部分。研究人员针对本土啮齿动物保护性易位（conservation translocation）至西澳大利亚Dirk Hartog Island开展了疾病风险分析（disease risk analysis, DRA）。该分析建议开展多学科项目，以减少关于Shark Bay mice（Pseudomys gouldii）和greater stick-nest rats（Leporillus conditor）健康状况的知识空白。2021年至2022年间，130只Shark Bay mice和122只greater stick-nest rats被易位至Dirk Hartog Island。研究人员从其中一部分个体采集了黏膜拭子、全血、粪便和体表寄生虫。对四种感染因子（infectious agents）进行了分子检测，检查了寄生虫负荷（parasite burdens）和血液学参数（haematological parameters），并评估了这些变量、健康指标与易位后短期存活（post-translocation short-term survival）之间的关系。在可行的情况下，研究人员对易位死亡个体进行了尸检（necropsies）和常规组织学评估（routine histological assessment）。研究人员发现了若干提示非感染性因素导致发病或死亡（morbidity or mortality）的指标，强调需要迭代评估易位策略。还明显缺乏某些宿主特异性寄生虫（host-specific parasites），提示在易位期间应考虑寄生虫保护（parasite conservation）的主动方法。在易位动物中检测到疱疹病毒（herpesviruses）、一种副黏病毒（paramyxovirus）、Bartonella sp.、Trypanosoma sp.和Mycoplasma spp.的分子证据。尽管在本研究中未与发病或短期死亡相关，但这些病原体的致病潜力仍然存在。总体而言，这些结果为两个物种的健康基线提供了重要的新数据，将有助于为未来保护规划提供信息。

研究背景：澳大利亚本土啮齿动物是生物多样性的重要组成，但自欧洲定居以来灭绝率和种群下降、分布缩小不成比例，保护关注度低。知识缺陷限制了循证保护决策。对澳大利亚本土啮齿动物生态、寄生动物及其对宿主健康影响的认识不足，尤其在半干旱和干旱环境，不能假设其与湿润或同人类伴生啮齿动物等价。保护性易位（conservation translocation；为保护目的将动物转移至新地点或补充种群）日益用于改善本土啮齿动物保护轨迹，但伴随生物安全风险。啮齿动物生活史可促进寄生虫获得、维持和传播，一些寄生虫具有One Health意义。易位补充已有啮齿动物网络可能增加空间重叠，放大生物安全风险。Shark Bay mouse（SBM；Pseudomys gouldii）和greater stick-nest rat（GSNR；Leporillus conditor）因大陆种群下降或灭绝被易位至多个地点，现依《Environment Protection and Biodiversity Conservation Act 1999》列为Vulnerable。残余种群在Bernier Island（SBM）和East、West Franklin Islands（GSNR）支持易位。近期易位至西澳Dirk Hartog Island（DHI）的“Return to 1616”生态恢复项目。四种啮齿动物最初纳入，后Ps. desertor和Ps. shortridgei移除。DHI原有ash-grey mouse（AGM；Ps. albocinereus）、sandy inland mouse（SIM；Ps. hermannsburgensis）和非本地house mouse（HM；Mus musculus）。以往分析显示澳大利亚啮齿动物易位成功可变，捕食、栖息地、气候、应激和释放方案等涉及失败；疾病尤其是感染性病因很少被确认，但一次GSNR易位中未知病因呼吸道病理与高死亡率相关。小体型、尸体快速腐烂、被食腐或捕食使尸检困难，健康状态作用可能被掩盖。两种物种虽有圈养，但基线健康数据有限。易位前DRA发现重大不确定性，故建议易位时采样。研究目标为获取SBM和GSNR易位至DHI的基线健康信息，以inform未来保护规划；假设来源组间测量变量不同，感染因子存在会负面影响健康和/或易位后短期存活。

关键技术方法（不超过250字）：2021—2022年，SBM来源于Northwest Island和Bernier Island，GSNR来源于Salutation Island及East、West Franklin Islands；共130只SBM和122只GSNR易位至DHI，运输时间30 min至约9 h。59只（30 SBM、29 GSNR）在全身麻醉（general anaesthesia, GA）下综合体检并采样。方法包括体况评分（body condition score, BCS）、血液学（红细胞压积PCV、总固体TS、白细胞WBC分类和中性粒细胞与淋巴细胞比N:L）、粪便锌硫酸浮集、体表寄生虫鉴定、针对Orthoherpesviridae、Paramyxoviridae、Trypanosoma spp.、Mycoplasma spp.的PCR/RT-PCR和测序系统发育分析，死亡个体尸检、组织病理和免疫组化，以及统计关联分析。

研究结果：
3.1 样本群体（Sample Population）：130只SBM和122只GSNR于2021、2022年易位至DHI；其中30只SBM和29只GSNR因无线电颈圈安装或福利评估接受麻醉，并进行较全面兽医评估和采样。
3.2 物理检查：59只受检中，3只SBM因可能捕获相关急性尾部脱套需GA福利评估；无GSNR需GA福利评估。1只SBM麻醉因无法达到稳定麻醉平面而放弃，恢复后释放，后Mycoplasma sp.阳性。GSNR最常见异常是BCS差（≤2/5），Salutation Island来源显著更常见；Franklin Islands来源组急性体重下降更显著。2022年所有麻醉GSNR接受预防性皮下补液，因体重下降部分归因于脱水。SBM两岛来源平均体重有差异但BCS无显著差异。另见GSNR口周皮炎伴脱发和结痂、包皮鞘小结节；SBM单侧完全白内障伴眼周皮炎和睑痉挛。
3.3 血液学：SBM样本小无法有意义分析。GSNR中，Franklin Islands来源PCV高于Salutation Island；雄性TS和N:L比高于雌性；体况差者总估计WBC更高；PCV随体重丢失百分比增加而升高，N:L比随体重丢失增加而升高，PCV与N:L比正相关。一只2022年SBM血涂片见与Bartonella sp.一致的胞内杆菌样包涵体，PCR检出Bartonella DNA，16S–23S ITS序列与B. queenslandensis clade成员同源但序列同一性较低（89.6%），无临床或血液学异常，存活至摘颈圈；该个体仅采集到Laelaps lybacia螨。
3.4 寄生虫学：132份粪便（89 SBM、43 GSNR）中，30.3%检出胃肠道寄生虫；SBM 27%，GSNR 37.2%。两物种均以原生动物最普遍，GSNR仅检出原生动物；SBM以Trichomonidae鞭毛虫/包囊为主，GSNR以Entamoeba和未鉴定原生动物卵囊为主。蠕虫卵仅见于SBM：Bernier Island一只Hymenolepis sp.，Northwest Island两只spiruroid。未发现粪便寄生虫与人口学或健康参数关联。体表寄生虫：Bernier Island自然SBM种群种类多于Northwest Island易位种群；Northwest仅L. lybacia；Bernier有L. lybacia、Mesolaelaps australiensis、Xenopsylla sp.、Haemaphysalis humerosa；SBM未采到虱。GSNR两来源均采到虱、螨、蚤；Xenopsylla sp.两来源均有；Echidnophaga myrmecobii和Parapsyllus australiacus仅Franklin Islands来源；Laelaps rothschildi在2021年Salutation Island来源GSNR鉴定到，2022年仅鉴定为Laelapidae；Hoplopleuridae虱（可能Hoplopleura leporilludis）两来源均有；混合感染常见。
3.5 选定感染因子检测：Orthoherpesviridae、Paramyxoviridae、Trypanosoma spp.、Mycoplasma spp.核酸均在至少一种啮齿动物中检出，但与性别、地点、BCS或短期存活无显著关联。仅一只GSNR对多种感染因子阳性（herpesvirus和Mycoplasma）。Trypanosoma序列在4只Franklin Islands GSNR检出，无临床异常且均存活立即释放期；18S rRNA基因序列100%相同，与埃塞俄比亚Mus mahomet的Trypanosoma sp.最接近（98.6% identity），属Herpetosoma亚属但位于T. lewisi亚支外围；所有阳性个体有蚤、螨或虱，无蜱；体表寄生虫未检测锥虫。Herpesvirus：SBM低流行3.8%（1/26），GSNR中等20.7%（6/29）；SBM序列仅54 nt，最接近murid betaherpesvirus；GSNR两来源均检出，与来自中国褐家鼠（Rattus norvegicus）的herpesvirus最接近（85%核苷酸、91%氨基酸同一性），GenBank前30命中为murid rhadinoviruses（Gammaherpesvirinae）；一只herpesvirus阳性SBM和GSNR释放后死亡但尸体不适合尸检；6只阳性GSNR中3只体况差，5只来自Salutation Island；所有阳性GSNR口腔–结膜拭子阳性，2只泌尿生殖–直肠拭子也阳性；SBM阳性仅泌尿生殖–直肠拭子。Paramyxovirus：Franklin Islands来源GSNR检出可能新型PMV序列（530 nt），与Meliandou uranomys virus最接近（79.5% identity）；阳性GSNR释放后死亡，但组织病理无PMV一致病变。Mycoplasma：两物种、所有地点均检出；3只SBM序列100%相同，最接近M. neurolyticum（96.82% identity）；GSNR序列包括不同来源组两条相同序列、与中美洲未培养蝙蝠Mycoplasma最接近（95.91%）、与M. spermatophilum接近（99.44%）、以及另一与中美洲未培养蝙蝠Mycoplasma较远（78.01%）。2只Mycoplasma阳性个体死亡，一只SBM在捕获时死亡且无murid Mycoplasma相关组织病理；一只GSNR释放后死亡且尸体不适合尸检，也是唯一多感染因子阳性个体；临床异常限于一只Mycoplasma阳性SBM在GA下呼吸异常并恢复，释放后存活时间未知。
3.6 死亡：无线电追踪期检出SBM 5只、GSNR 4只易位后死亡；仅2021年2只和2022年1只GSNR尸体适合尸检，其余因高度分解或无完整尸体不能尸检。所有易位后死亡均与爬行动物（巨蜥和蛇）或猛禽捕食/食腐证据相关。尸检GSNR死因均与捕食一致；2021一只成熟皮质白内障；2022一只PMV阳性但组织学无显著异常提示PMV导致发病或捕食。另2022年Bernier Island处理中死亡2只SBM，尸检组织病理见微芯片部位皮下出血（一只轻、一只广），肌肉弥漫苍白，多器官被动充血/淤血，一只单侧肾上腺包膜下出血；两只心肌Martius Scarlet Blue阳性提示超急性心肌细胞变性，无收缩带；一只骨骼肌原虫包囊最大100 μm，含新月形缓殖子，Toxoplasma免疫组化阴性，基于包囊大小最可能为Sarcocystis sp.。

讨论总结：研究提供SBM和GSNR易位至DHI的多学科基线健康评估，发现来源组间物理、血液学和寄生虫差异；结果提示需继续减少易位操作应激。Trypanosoma sp.、Bartonella sp.、herpesviruses、Mycoplasma spp.和一种paramyxovirus均为新宿主记录；虽未明确关联健康或短期死亡，但部分类群曾与啮齿动物适合度下降或人兽共患潜力相关。SBM身体异常少，GSNR主要问题为差体况和急性体重下降，尤其Franklin Islands来源，结合血液学提示应激；N:L比和PCV与体重丢失相关，可能涉及儿茶酚胺驱动中性粒细胞重分布、脾收缩或液体丢失；由于易位诱导扰动，未计算参考范围。寄生虫方面，L. lybacia可能随SBM宿主受威胁；复杂生活史寄生虫仅见于残余种群；未在GSNR发现物种特异性蚤Acanthopsylla franklinensis，提示未来可考虑寄生虫保护。Trypanosoma阳性均在Franklin Islands，可能受载体限制；T. lewisi为罕见人兽共患且曾与澳大利亚本土啮齿动物灭绝相关，但本研究无发病。Bartonella序列可能为B. queenslandensis clade新种，为西澳野生动物首次；无临床异常，符合自然储存宿主感染。Herpesvirus为SBM和GSNR首次检测；GSNR序列可能为Gammaherpesvirinae新种；慢性应激可能再激活潜伏感染，5/6 GSNR阳性来自Salutation Island，该种群易位时密度高、粪糖皮质激素升高，提示需谨慎易位波动种群。未发现Sendai virus或M. pulmonis；Mycoplasma spp.序列部分接近M. neurolyticum，但需更长序列；一只呼吸异常不能结论。PMV无法与不良健康关联，但PMV可跨种，应重视。局限包括采样偏健康或最重个体、小样本、无纵向数据、采样可能漏检、4只Salutation GSNR PCR产物未测序视为阴性，可能低估；尸体回收困难，死亡虽均可能为捕食但食腐不能排除；白内障可能增加捕食易感性；两只SBM处理中猝死病因未明，可能涉及应激相关心肌病、肾上腺危机、出血性休克或儿茶酚胺驱动心律失常，均发生于微芯片后。结论翻译：本研究为GSNR和SBM提供重要基线健康数据，识别若干新宿主–寄生虫关联。首次报告Trypanosoma sp.、Mycoplasma spp.、herpesviruses、Paramyxoviridae和Bartonella sp.在这些物种中的记录，并识别若干可能contribute morbidity or mortality的非感染性因素。检测到的感染因子未影响短期易位成功，当前证据不支持通过筛查排除感染个体。然而，其致病潜力仍不明确，原因包括研究局限、疾病动态复杂因素相互作用以及野生动物疾病影响常较隐蔽。持续监测，尤其继续调查未来死亡事件，对评估这些感染因子对野生动物健康和易位长期成功的作用很重要。考虑到DHI已有啮齿动物网络及空间和遗传接近性增强寄生虫溢出潜力，这尤为关键。尽管发现新颖，也反映历史上对澳大利亚本土啮齿动物疾病状况了解有限，强调扩展和优化现有知识库的重要机会。恢复团队应考虑支持研究以填补这些空白，并将研究聚焦于已建立种群。Greater stick-nest rats、SBMs和其他本土啮齿动物局限于有限种群，多个机构希望支持易位努力。通过有效协调、规划和资助，实施研究以构建informing translocation strategies的健康知识是可行的，并将显著扩展澳大利亚本土啮齿动物健康的有限理解。