汉逊毕赤酵母通过氨基酸交叉喂养促进发酵香肠中细菌的生长和风味代谢物的形成

《Food Research International》:Amino acid cross-feeding by Debaryomyces hansenii promotes bacterial growth and flavor metabolite formation in fermented sausages

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年09月29日 来源:Food Research International 8.8

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   •D. hansenii 通过氨基酸交叉喂养促进细菌风味代谢。•D. hansenii FD-1 分泌低成本氨基酸支持细菌生长。•S. xylosus E-2 通过生长和酸前体形成支链酯。•L. plantarum LP-5 吲哚衍生物与氨基酸支持的生长相关。•CDM27衍生

  
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    D. hansenii 通过氨基酸交叉喂养促进细菌风味代谢。
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    D. hansenii FD-1 分泌低成本氨基酸支持细菌生长。
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    S. xylosus E-2 通过生长和酸前体形成支链酯。
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    L. plantarum LP-5 吲哚衍生物与氨基酸支持的生长相关。
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    CDM27衍生的相互作用模式在发酵香肠中得到重现。

引言

发酵香肠是一种传统肉制品,具有由发酵和成熟期间微生物代谢形成的特征风味轮廓(Li et al., 2026)。传统发酵香肠的生产依赖于源自环境和肉的复杂微生物群落,这些群落在发酵过程中产生关键的风味化合物和营养(Ma et al., 2023; Van Reckem et al., 2021; Xiao et al., 2020)。现代发酵工艺主要使用由特定细菌和酵母菌株组成的商业发酵剂(Leroy et al., 2023)。这些发酵剂能够在受控条件下实现快速发酵,提高一致性和效率。然而,简化的发酵系统可能无法完全重现更多样化的微生物群落中存在的代谢相互作用,这会影响发酵香肠中特征风味化合物的形成(Yang et al., 2022; Zhang, Yang, et al., 2023)。
研究表明,支链酯(BCEs),如乙基2-甲基丙酸酯、乙基3-甲基丁酸酯和乙基2-甲基丁酸酯,对传统发酵香肠的果香和花香贡献显著(Flores & Piornos, 2021)。这些化合物的嗅阈值低,即使在微量时也会显著影响风味(Flores & Piornos, 2021)。S. xylosus 在BCE合成中发挥重要作用(Van Der Veken & Leroy, 2022)。据报道,与传统发酵香肠相比,使用商业发酵剂生产的产品含有相对较少的生物活性肽和吲哚衍生物(Heres, Li, et al., 2023, Heres, Mora, & Toldrá, 2023; Hu et al., 2022; Yang et al., 2022; Li et al., 2022)。吲哚衍生物如吲哚-3-乳酸和吲哚丙烯酸也在发酵食品中被检测到,可能由L. plantarum产生(Li et al., 2023; Xue et al., 2023; Zhao et al., 2023)。L. plantarum在合成这些吲哚衍生物方面显示出潜力(Wang et al., 2024; Zhang, Zhao, et al., 2023)。先前的研究还表明,D. hansenii对BCEs和吲哚衍生物的产生至关重要(Flores et al., 2017; Perea-Sanz et al., 2020)。这些观察结果表明,这些代谢物的积累不仅依赖于单个菌株的代谢能力,还依赖于酵母和细菌之间的代谢合作(McCarty & Ledesma-Amaro, 2019; Roell et al., 2019)。因此,利用发酵香肠中微生物之间的代谢相互作用提供了一种有前景的策略,以克服单菌株的局限性并增强风味和营养属性(Liu et al., 2023; Thommes et al., 2019)。全面理解微生物相互作用机制对于将发酵过程与最佳调控策略相结合,以实现风味和营养的同时控制至关重要(Auchtung et al., 2025; Rong et al., 2024)。
定义好的微生物菌群提供了一种有用的方法来解析发酵食品中物种特异性代谢相互作用(Thommes et al., 2019)。在我们先前的研究中,涉及D. hansenii FD-1、S. xylosus E-2和L. plantarum LP-5的相互作用与模拟发酵食品系统中BCEs和吲哚衍生物积累的增强相关(Rong et al., 2024)。酵母调理培养物中的氨基酸动态进一步表明,氨基酸供应有助于细菌生长,而共培养和调理培养物的比较表明支链酸前体转化在BCE积累中起作用。然而,这些关系主要是从代谢物动态和培养物表型推断的,并没有通过定义好的氨基酸和前体补充进行进一步测试。基于这些观察,本研究使用化学定义培养基,结合氨基酸补充和缺失实验以及前体补充实验,以功能性地评估氨基酸交叉喂养,并区分氨基酸介导的生存支持和与前体相关的代谢物积累效应。在这些受控条件下确定的主要相互作用模式在接种发酵香肠模型中进行了进一步评估(Wei et al., 2026)。
因此,本研究旨在确定D. hansenii FD-1是否通过氨基酸交叉喂养促进细菌生长和风味相关代谢物积累。使用化学定义培养基和接种发酵香肠模型来鉴定酵母衍生的代谢物,评估它们对S. xylosus E-2和L. plantarum LP-5的影响,并在发酵香肠中验证主要相互作用模式。通过将定义好的氨基酸交叉喂养与物种特异性的细菌反应和代谢物积累联系起来,本研究为理解发酵香肠发酵中的酵母-细菌合作提供了更清晰的机制基础。

章节摘录

化学品

所有氨基酸均购自Sigma-Aldrich(美国密苏里州);2-甲基-3-庚酮、氯霉素、放线菌素、雷帕霉素、乙腈(色谱级)、甲醇(色谱级)、乙酸铵、葡萄糖、维生素和亚硝酸盐均购自上海阿拉丁生化科技有限公司(上海,中国);乙基2-甲基丙酸酯(纯度≥99.9%,GC级)、乙基3-甲基丁酸酯(纯度≥99.9%,GC级)和乙基2-甲基丁酸酯(纯度≥99.9%,GC级)

FD-1通过CDM27中的细胞外小代谢物促进细菌生长

CDM27是根据单氨基酸缺失实验构建的用于检测真菌-细菌相互作用的营养限制培养基(图S1A和B;表S5)。在CDM27中,与FD-1共培养增加了E-2和LP-5的生物量,与它们单独培养相比(图1A)。在固体CDM27上也观察到了类似的促生长作用(图S1C)。这些结果表明CDM27适合于评估FD-1对细菌生长的促进作用。为了确定这种

讨论

本研究的主要发现是,D. hansenii FD-1培养过程中细胞外积累的氨基酸有助于S. xylosus E-2和L. plantarum LP-5的生长促进,尽管这种贡献的程度和模式在两种细菌伙伴之间有所不同。在CDM27中,与FD-1共培养和FD-1调理培养基都显著增强了细菌生长,而pH调节、蛋白酶处理、3 kDa过滤和非极性提取未能消除

CRediT作者贡献声明

Ting Sun: 撰写 – 审阅与编辑,撰写 – 初稿,可视化,调查,数据管理,构思。 Lan Zhang: 撰写 – 审阅与编辑,撰写 – 初稿,可视化,调查,数据管理,构思。 Ruren Li: 撰写 – 审阅与编辑,监督,资金获取。 Kaihao Liu: 撰写 – 初稿,数据管理。 Mairui An: 方法论,调查,数据管理。 Di Zhang: 方法论,数据管理。 Liangyan Rong: 撰写 –

未引用参考文献

González and Hall, 2017
Ken and Guan, 2006
Mejía-Caballero and Marco, 2026
Wang, Qiu and Tang, 2026

利益冲突声明

作者声明,他们没有已知的可能影响本文报告工作的竞争财务利益或个人关系。

致谢

本工作得到了中国国家自然科学基金项目(32572614);陕西省教育厅重点科学研究计划项目(重点产业链协同创新项目)(25JU015);陕西省教育厅服务地方发展科学研究计划(产业化培育项目)(24JC015);陕西省三秦人才引进计划青年项目(SXV20240516);的资助。
Ting Sun|Lan Zhang|Ruren Li|Kaihao Liu|Mairui An|Di Zhang|Liangyan Rong
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